主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[E247]抗β-连环蛋白-BSA和无叠氮化合物 适用人群:IHC-P、IP、WB、ChIP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E247]转β-连环蛋白-不含BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体不适用于小鼠和大鼠的ICC测试。 我们的室内测试表明,在western blot中,该抗体在Raw264.7细胞系中不起作用。 我们有另一种抗体 约68183 在较低表达Raw264.7中检测到弱带。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测可用于: 绵羊、仓鼠、奶牛、猕猴、非洲绿猴 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:A431、HeLa、野生型HAP1、HCT 116和野生型MCF7细胞裂解物。 ICC/IF:A431和野生型HAP1细胞。 SW480和SK-N-SH电池。 IHC-P:人肺腺癌、肾腺癌、结肠癌、宫颈癌、乳腺癌、甲状腺乳头状癌、大鼠肝和胰腺、小鼠肝和胰腺; IP:A431全细胞裂解液和小鼠脑裂解液。
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常规说明 ab196204是无载波版本的 约32572 . 我们的 无载体 抗体通常以仅PBS的制剂提供,经纯化且不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高了灵敏度和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E247型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 典型Wnt信号通路的关键下游成分。 在缺乏Wnt的情况下,与AXIN1、AXIN2、APC、CSNK1A1和GSK3B形成复合物,促进N末端Ser和Thr残基的磷酸化,并通过BTRC泛素化CTNNB1,随后被蛋白酶体降解。 在Wnt配体存在的情况下,CTNNB1不是泛素化的,而是在细胞核中积累,在细胞核中它作为TCF/LEF家族转录因子的共激活因子,从而激活Wnt应答基因。 参与细胞粘附的调节。 大多数β-catenin定位于细胞膜,是E-cadherin/catenin粘附复合物的一部分,拟将钙粘蛋白偶联到肌动蛋白细胞骨架。 -
组织特异性 表达于几种毛囊细胞类型:基底和外周基质细胞,以及内外根鞘细胞。 以冒号表示。 -
疾病相关 CTNNB1缺陷与结直肠癌(CRC)相关[MIM:114500]。 注=CTNNB1的激活突变具有致癌活性,导致肿瘤发展。 体细胞突变存在于各种肿瘤类型中,包括结肠癌、卵巢癌和前列腺癌、肝母细胞瘤(HB)、肝细胞癌(HCC)。 乙肝是一种恶性胚胎性肿瘤,主要影响生命最初三年的幼儿。 CTNNB1缺陷是毛瘤(PTR)的原因[MIM:132600]; 一种常见的良性皮肤肿瘤。 CTNNB1缺陷是髓母细胞瘤(MDB)的原因[MIM:155255]。 MDB是一种恶性的、侵袭性的小脑胚胎性肿瘤,在儿童中最常见。 CTNNB1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 注=涉及CTNNB1的染色体畸变见于涎腺多形性腺瘤,这是涎腺最常见的良性上皮肿瘤。 用PLAG1易位t(3;8)(p21;q12)。 -
序列相似性 属于beta-catenin家族。 包含12个ARM重复。 -
翻译后修饰 GSK3B的磷酸化需要另一激酶预先磷酸化Ser-45。 然后,磷酸化从Thr-41进行到Ser-37和Ser-33。 EGF刺激酪氨酸磷酸化。 Tyr-654上的磷酸化降低CDH1结合并增强TBP结合。 当GSK3B磷酸化时,SCF(BTRC)E3连接酶复合物泛素化,导致其降解。 被包含UBE2D1、SIAH1、CACYBP/SIP、SKP1、APC和TBL1X的E3泛素连接酶复合物泛素化,导致其随后的蛋白酶体降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞质>细胞骨架。 细胞连接>粘附连接。 细胞连接。 细胞膜。 当细胞质不稳定(高水平磷酸化)或与CDH1结合时。 当其稳定时转移到细胞核(低水平磷酸化)。 与GLIS2和MUC1的相互作用促进核移位。 与EMD的相互作用抑制核定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 539003 奶牛 Entrez基因: 1499 人类 Entrez基因: 12387 鼠标 Entrez基因: 84353 老鼠 Entrez基因: 绵羊 Omim公司: 116806 人类 瑞士保护银行: Q0VCX4型 奶牛 瑞士保护银行: 第35222页 人类
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别名 b-连环蛋白抗体 β连环蛋白抗体 β-连环蛋白抗体
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图片
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用浓度为1µg/ml的ab196204对福尔马林固定石蜡包埋的人扁桃体标记β-catenin进行免疫组织化学分析。免疫染色在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上使用OptiView DAB IHC检测试剂盒进行。 使用ULTRA细胞调节液(CC1 pH 8.5)进行热介导抗原回收32分钟。 ab196204抗β-连环蛋白抗体在37°C下孵育16分钟。 切片用苏木精II复染。 图像插图显示仅二级抗体对照组无染色 -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级( 约32572 )稀释1/5000 车道1: 野生型MCF7细胞裂解物 车道2: CTNNB1敲除MCF7细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000 在还原条件下进行。 预测波段大小: 85千帕 观察到的频带大小: 85/90千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级染色,稀释1/5000,以绿色显示; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约32572 被证明与β-连环蛋白特异结合。 在野生型MCF7细胞裂解液中在85/90 kDa处观察到一条带,在CTNNB1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约286762 为了生成此图像,分析了野生型和CTNNB1敲除MCF7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ). -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级( 约32572 )稀释1/5000 车道1: 野生型HepG2细胞裂解物 车道2: CTNNB1敲除HepG2细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 车道4: A431细胞裂解液 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测波段大小: 85千帕 观察到的频带大小: 85千帕 Western blot假彩色图像:抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级染色,稀释1/5000,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约32572 被证明与β-连环蛋白特异结合。 在野生型HepG2细胞裂解液中在85 kDa处观察到一条带,在CTNNB1敲除细胞系中未观察到该大小的信号( ab277911型 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CTNNB1敲除HepG2细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级( 约32572 )稀释1/5000 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测波段大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级染色,稀释1/5000,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约32572 被证明与β-连环蛋白特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中观察到95kDa的条带,在CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约273712 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 ab275247号 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于95 kDa的裂解物通道中观察到的条带可能代表β-连环蛋白的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成此图像,分析了野生型和CTNNB1 CRISPR-Cas9编辑的HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中5%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级( 约32572 )稀释1/500 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: CTNNB1敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测波段大小: 85千帕 观察到的频带大小: 86千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ). 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32572 在86 kDa下观察到。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 约32572 western blot显示与野生型HeLa细胞中的β-连环蛋白反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255352号 (敲除细胞裂解物 约263756 )已使用。 对野生型HeLa和CTNNB1敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约32572 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/500和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
约32572 CTNNB1(β-连环蛋白)野生型HAP1细胞(顶部)和CTNNB1基因敲除HAP1的细胞(底部)染色。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约32572 稀释1/250 约195889年 以1/250的稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附(ab150081)二级抗体 浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ). -
β-连环蛋白在人肝癌组织和癌旁肝组织中的表达水平不同。 将HCT、PLT石蜡包埋并切成5μm厚的切片,用于苏木精-伊红和免疫组织化学(IHC)分析。 约32572 以1:400的稀释度使用。 第二种抗体是生物素化IgG,在37°C下孵育40分钟。 最后,用3,3-二氨基联苯胺溶液对组织切片进行可视化,并用苏木精进行复染。 用磷酸盐缓冲盐水替代一级抗体作为IHC的对照。 在HCT(E-H)和PLT(M-P)中分别检测到具有阴性、弱、中度和强染色活性的β-连环蛋白。 如上所示的E部分,有关完整图像,请参阅原始纸张。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ). -
所有车道: 抗β-连环蛋白抗体[E247]-ChIP级( 约32572 )稀释1/5000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: CTNNB1(ß-catenin)敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: A431全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测波段大小: 85千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32572 在90 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 约32572 在野生型HAP1细胞中显示与CTNNB1(β-catenin)特异性反应。 使用CTNNB1(β-catenin)敲除样品时未观察到条带。 对野生型和CTNNB1(β-catenin)敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约32572 和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C、1/5000稀释度和1/10000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体开发的( 约32572 ). 根据Abcam Dual-X-ChIP协议*,从HCT 116细胞制备染色质。 细胞用1.5 mM EGS固定30分钟,然后用甲醛固定10分钟。 使用25µg染色质、5µg 约32572 (红色),或5µg兔正常IgG 约172730 (灰色)和20µl蛋白质A/G sepharose珠。 免疫沉淀DNA通过实时PCR定量(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点) 底漆和探针来自纸张PMID:28625518 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20协议 -
克隆E247(ab196204)已被Abcam成功接合。 此图像是使用抗β-连环蛋白抗体[E247](Alexa Fluor®488)生成的。 请参阅 约194118 了解协议详细信息。 约194118 野生型HAP1细胞中的β-catenin染色(上图)和β-catentin敲除HAP1的细胞(下图)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约194118 1/500稀释(显示为绿色),以及 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
克隆E247(ab196204)已被Abcam成功接合。 此图像是使用抗β-连环蛋白抗体[E247](Alexa Fluor®647)生成的。 请参阅 ab194119号 了解协议详细信息。 ab194119号 野生型HAP1细胞中的β-catenin染色(上图)和β-catentin敲除HAP1的细胞(下图)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 ab194119号 稀释1/500(以红色显示),以及 约195887年 以1/250稀释度(以绿色显示)在+4°C下过夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
约32572 BIO处理的SW480(人大肠腺癌细胞系)细胞的β-连环蛋白染色( 公元120891年 )如文献所述,β-连环蛋白表达增加与BIO浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养48小时,培养基中含有不同浓度的 公元120891年 (BIO)在DMSO中,用4%甲醛在室温下固定10分钟,用含有10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清和0.1%吐温的PBS在室温下封闭2小时。 用 约32572 在含有1%BSA和0.1%吐温的PBS中,在4°C下隔夜进行(1/200)稀释。 A类 山羊抗狂犬病IgG H&L(DyLight ® 488)预吸附(ab96899)二级抗体 以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ). -
约32572 奥氮平处理的SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞系)细胞中β-连环蛋白的染色( 邮编120736 )国际商会/国际单项体育联合会。 如文献所述,β-连环蛋白表达增加与奥氮平浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养24小时,培养基中含有不同浓度的 邮编120736 (奥氮平)置于二甲基亚砜中,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下使用含10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用 约32572 (1/200稀释)在含1%BSA和0.1%吐温的PBS中于4°C下过夜。 A类 山羊抗狂犬病IgG H&L(DyLight ® 488)预吸附(ab96899)二级抗体 以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32572 ).
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (33)
曹X 等。 建立一种新的小鼠肝癌模型,用于生物发光成像动态监测肿瘤发展。 前Oncol 12:794101 (2022). 公共医学:35251971 蒋K 等。 miR-92b的增强表达通过靶向PTEN激活PI3K/AKT/ß-catenin通路来减弱大肠杆菌脂多糖介导的炎症损伤。 国际生物科学杂志 17:1289-1301 (2021). 公共医学:33867846 李JY 等。 miR-128上调通过激活Wnt/β-catenin信号通路介导心力衰竭小鼠的心脏损伤。 器官发生学 17:27-39 (2021). 公共医学:34965835 Okuda Y公司 等。 Wnt信号作为多形性腺瘤细胞分化的可能促进因子。 国际医学科学杂志 11:971-8 (2014). IHC-P公司 ; 人类 . 公共医学:25076852 恩迪桑JF&蒂瓦里S 用氯化血红素诱导血红素加氧酶通过增强再生蛋白改善肥胖Zucker大鼠心包脂肪细胞的形态和功能。 Exp Biol Med(梅伍德) 不适用:不适用(2014)。 老鼠 . 公共医学:25053781