主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EP1808Y]到Nrf2 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、WB、IHC-P 敲除已验证 反应对象:人类
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相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1808Y]至Nrf2 -
宿主 兔子 -
特异性 Nrf2的表达受到氧化应激、电泳物和化学激活物的刺激(PMID:25761198、PMID:27638861和PMID:28587109)。 Nrf2抗体(ab62352)在WB中大多数未经处理的样本中未检测到信号。 建议使用刺激物处理过的样品。 我们不建议在组织裂解物的western blot中使用该产品,但一些客户已经使用浓缩样品成功使用了该抗体(参见提交的评论)。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:MG-132处理的HeLa全细胞裂解物、THP-1、MG-132治疗的HepG2全细胞分解物、MG-131处理的HCT-116和A549全细胞裂解液、人iPSC-心肌细胞核分数 IHC-P:人类胰腺癌和肾癌组织。 ICC/IF:HepG2和MG-132处理HeLa细胞。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP1808Y型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 与靶基因启动子区的抗氧化反应(ARE)元件结合的转录激活剂。 对氧化应激反应中基因的协调上调很重要。 可能通过介导β-珠蛋白基因座控制区超敏位点2的增强子活性参与β-珠蛋白质簇基因的转录激活。 -
组织特异性 广泛表达。 在成人肌肉、肾脏、肺、肝脏和胎儿肌肉中表达最高。 -
序列相似性 属于bZIP家族。 CNC子系列。 包含1个bZIP域。 -
结构域 N端的酸性激活域和C端的DNA结合域。 -
翻译后修饰 氧化应激反应中PKC对Ser-40的磷酸化使NFE2L2与其细胞质抑制剂KEAP1分离,促进其转位到细胞核。 -
细胞定位 细胞质>胞浆。 核心。 细胞质在无应力条件下,在亲电试剂的诱导下易位到细胞核。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 红系衍生2抗体 HEBP1抗体 类2抗体
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图片
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ab62352在未经处理的野生型A549细胞(左面板)、处理的野生类型A549细胞和未经处理NFE2L2敲除的A549细胞中染色Nrf2(右面板)。 用2µM MG-132处理细胞18小时( 2003年10月14日 ). 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用浓度为0.2µg/ml的ab62352培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )在2µg/ml(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2µg/ml(以洋红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 1/500稀释的抗-Nrf2抗体[EP1808Y](ab62352) 车道1: 野生型HeLa对照MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物 车道2: 野生型HeLa处理的MG132(2 uM,18 h)细胞裂解物 3号车道: NFE2L2敲除HeLa对照MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物 车道4: NFE2L2敲除HeLa处理的MG132(2 uM,18 h)细胞裂解物 车道5: HCT 116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 68千Da 观察到的频带大小: 85千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-Nrf2抗体[EP1808Y]-ChIP级染色,稀释1/500,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab62352显示与Nrf2特异结合。 在野生型HeLa细胞裂解物中观察到85kDa的条带,而在NFE2L2 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中没有观察到该大小的信号 约262507 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约263934 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于85kDa的裂解液通道中观察到的谱带可能代表Nrf2的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和NFE2L2 CRISPR-Cas9编辑的HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )以1/2000稀释。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-Nrf2抗体[EP1808Y](ab62352) 车道1: 野生型A549车辆控制MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物 车道2: 野生型A549处理的MG132(2μM,18小时)细胞裂解物 3号车道: NFE2L2[21]敲除A549车辆控制MG132(0 uM,18 h)细胞裂解物 车道4: NFE2L2[21]敲除A549处理的MG132(2 uM,18 h)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 68千Da 观察到的频带大小: 85-90千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-Nrf2抗体[EP1808Y]-ChIP级染色,稀释度为1/1000,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )1/2000稀释的负载对照染色,显示为红色。在蛋白质印迹中,ab62352显示与Nrf2特异性结合。 在野生型A549细胞裂解液中观察到85-90 kDa的靶带(箭头所示),在NFE2L2敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约285359 (敲除细胞裂解物 约289682 ). WT和KO上都存在低于目标的波段,我们不确定该波段的身份。 为了生成此图像,分析了野生型和NFE2L2敲除A549细胞裂解物。 请注意,MG132治疗不会影响Nrf2的表达水平。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
ab62352染色未经处理的HeLa细胞(顶部面板)和处理的HeLa细胞(底部面板)中的Nrf2。 用2µM MG-132处理细胞18小时( 2003年10月14日 ). 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1µg/ml浓度的ab62352培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下与羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2µg/ml(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2µg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 1/200稀释的抗-Nrf2抗体[EP1808Y](ab62352)(纯化) 车道1: HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)全细胞与5%NFDM/TBST裂解 车道2: 用25uM MG-132和5%NFDM/TBST的全细胞裂解物处理HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)4小时 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 68千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 60秒 Nrf2的表达受到氧化应激、电泳物和化学激活物的刺激(PMID:25761198、PMID:27638861和PMID:28587109)。 ab62352在WB的大多数未处理样本中未检测到信号。 建议使用刺激物处理过的样品。 -
用1/250稀释的纯化ab62352标记Nrf2的人胰腺癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索( 约93684 ). 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab97051) 作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精沉彩。 -
对人肾癌组织切片进行免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,在1/100稀释度下用ab62352标记Nrf2。 用多聚甲醛固定组织,并用pH 9.0的TRIS-EDTA缓冲液执行热介导抗原回收步骤。 用ab62352在1/100的稀释缓冲液中进行染色,并在20°C下封闭30分钟。 使用未稀释的山羊抗兔HRP结合二级抗体。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-Nrf2抗体[EP1808Y](ab62352) 车道1: 人iPSC-心肌细胞胞质分数 车道2: 人iPSC-心肌细胞核分数 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/2000 使用ECL技术开发。 预测的带宽大小: 68千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟 采用1:1000的ab62352对人iPSC-心肌细胞进行Western blot分析。 封闭剂和稀释缓冲液为TBS-Tween中5%脱脂乳。 对人iPSC-心肌细胞进行细胞分馏,以将细胞核与细胞质分离(2巷)。 -
HeLa细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用1/500纯化的ab62352标记Nrf2。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透 山羊抗兔IgG H&L(Alexa Fluor®488)(ab150077)二级抗体 (1/1000)作为二级抗体。 细胞被复染 约195889年 ,抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594). DAPI染色细胞核为蓝色。 二级抗体对照:用PBS代替一级抗体作为阴性对照。 -
用ab62352标记1/40(红色)的Nrf2的HeLa(人宫颈腺癌)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 Alexa荧光笔 ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/2000)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。
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文献 (584)
张杰 等。 来自ACE2修饰的人脐带间充质干细胞的小细胞外囊泡(EVs)对肾缺血再灌注损伤的保护作用。 肾病学(卡尔顿) 29:5-17 (2024). 公共医学:37667547 聂Q 等。 氧化铁纳米粒子与紫杉醇协同捆绑,通过自噬途径诱导铁下垂。 分子医学代表 28:不适用(2023年)。 公共医学:37681444 吴浩 等。 LMNTD2-AS1通过靶向FUS调节NRF2信号通路,调节免疫细胞浸润并促进前列腺癌进展。 美国癌症研究杂志 13:3384-3400 (2023). 公共医学:37693143 白X 等。 COX-2过度表达诱导的Exo-miR-1290通过CUL3-Nrf2途径促进肺腺癌中癌相关成纤维细胞活化和肿瘤进展。 小区通信信号 21:242 (2023). 公共医学:37723559 Pun SH公司 等。 PLAC8介导的NOX4信号传导激活在实验性缺氧中恢复内皮集落形成细胞的血管生成功能。 细胞 12:不适用(2023年)。 公共医学:37759443