主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR4686-66]到NFkB p100/NFKB2 适用于:ICC/IF、IP、WB 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
日本 兔单克隆抗体 [EPR4686-66]至NFkB p100/NFKB2 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 老鼠 -
免疫原 人NFkB p100/NFKB2内的重组片段。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: Q00653问题 -
阳性对照 WB:Jurkat、HeLa、Daudi、HCT116和MCF7细胞裂解物。 ICC/IF:野生型HAP1细胞。 IP:Jurkat细胞
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:9%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA、50%组织培养上清液 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR4686-66 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
产品
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替代版本 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照
应用
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靶标
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相关性 NF-kappa-B是一种存在于几乎所有细胞类型中的多效性转录因子,是一系列信号转导事件的终点,这些事件由与炎症、免疫、分化、细胞生长、肿瘤发生和凋亡等许多生物过程相关的大量刺激物启动。 NF-kappa-B是由类Rel结构域蛋白RELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、Rel和NFKB2/p52形成的同源或异二聚体复合物。 二聚体结合在其靶基因DNA中的kappa-B位点,并且单个二聚体对不同的kappa-B位点有不同的偏好,它们可以以不同的亲和力和特异性结合。 不同的二聚体组合分别作为转录激活物或阻遏物。 NF-kappa-B受翻译后修饰和亚细胞分隔的各种机制以及与其他辅因子或辅抑制因子的相互作用控制。 NF-kappa-B复合物被保存在细胞质中,处于与NF-kampa-B抑制剂家族成员复合的非活性状态。 在传统的激活途径中,I-kappa-B激酶(IKK)对不同的激活物进行磷酸化,随后降解,从而释放转移到细胞核的活性NF-κB复合物。 在非规范激活途径中,MAP3K14激活的CHUK/IKKA同型二聚体磷酸化与RelB相关的NFKB2/p100,诱导其蛋白水解为NFKB2/p52,并形成NF-kappa-B RelB-52复合物。 NF-kappa-B异二聚体RelB-52复合物是一种转录激活物。 NF-kappa-B p52-p52同型二聚体是一种转录阻遏物。 NFKB2似乎具有双重功能,如通过p100在细胞质中保留附着的NF-kappa-B蛋白和通过共翻译过程生成p52。 蛋白酶体介导的过程确保了p52和p100的产生,并保持了它们的独立功能。 p52与kappa-B一致序列5'-GGRNNYCC-3'结合,位于参与免疫反应和急性期反应的基因的增强子区域。 p52和p100分别是小调和大调; p100的处理相对较差。 异构体p49是NF-kappa-B蛋白复合物的一个亚单位,它与p65协同刺激HIV增强子。 与RELB一致,通过抑制clock-ARNTL/BMAL1异二聚体的转录激活物活性来调节生物钟。 -
细胞定位 细胞质和细胞核 -
数据库链接 -
别名 CVID10抗体 DNA结合因子KBF2抗体 H2TF1抗体
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图片
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车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :NFκB p100敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :Jurkat细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HeLa细胞裂解物(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在97 kDa下观察到ab175192。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用NFκB p100敲除样品时,ab175192被证明与NF kb p100特异性反应。 对野生型和NFκB p100敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab175192和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/10000和1/2000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附液开发印迹( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸附床( 约216776 )在成像前在室温下以1/10000稀释1小时的二次抗体。 -
ab175192染色野生型HAP1细胞中的NFkB p100/NFKB2(顶部面板)和NFkB p100/NFKB2敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab175192以1/250的稀释度培养细胞 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 -
所有车道: 稀释1/1000时的抗NFkB p100/NFKB2抗体[EPR4686-66](ab175192) 车道1: 野生型HCT116细胞裂解物 车道2: NFKB2 CRISPR/Cas9编辑的HCT116细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的频带大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在97 kDa下观察到ab175192。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab175192与野生型HCT116细胞中的NFkB p100/NFKB2反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约266883 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257245号 )97kDa以下的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型HCT116和NFKB2 CRISPR/Cas9编辑的HCT117细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab175192和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以1/10000和1/20000的稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗NFkB p100/NFKB2抗体[EPR4686-66](ab175192) 车道1: 野生型HepG2细胞裂解物 车道2: NFKB2 CRISPR/Cas9编辑的HepG2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的频带大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在120 kDa下观察到ab175192。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 western blot显示ab175192与野生型HepG2细胞中的NFkB p100/NFKB2反应。 CRISPR/Cas9编辑细胞系中观察到的条带 约262323 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 ab257247号 )97kDa以下的车道可能代表截断形式和劈开碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型HepG2和NFKB2 CRISPR/Cas9编辑的Hep G2细胞裂解产物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab175192和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别以万分之一的稀释度和万分之一的稀释度在4°C下孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 1/10000稀释的抗NFkB p100/NFKB2抗体[EPR4686-66](ab175192) 车道1: Jurkat细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 3号车道: Daudi细胞裂解物 车道4: MCF7细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 97千帕 -
Jurkat细胞裂解物免疫沉淀颗粒的Western blot分析,在1/10稀释度下用ab175192标记NFkB p100/NFKB2。
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载