概述
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产品名称 -
产品概述 Western blot数据表明,CRISPR基因编辑可能导致相关蛋白的截短。 请参阅数据图像。 -
亲代细胞系 HepG2型 -
有机体 人类 -
突变描述 利用CRISPR/Cas9实现敲除,纯合子:第12外显子28 bp缺失。 -
通道编号 <20 -
淘汰验证 桑格测序 -
重组说明 为了用作白细胞对照,将冻干液重新悬浮在50µL LDS*样品缓冲液中,使最终浓度达到2 mg/ml。对于还原条件,我们建议最终浓度为0.1 M DTT。 *不建议将SDS样品缓冲液用于这些冻干溶血物。 -
说明 裂解液制备: 我们的裂解产物是使用RIPA缓冲液制成的,我们在其中添加了蛋白酶抑制剂鸡尾酒和磷酸酶抑制剂鸡尾液(比例:300:100:10)。 这意味着感兴趣的蛋白质变性了。 如果您需要天然形式的蛋白质,请使用活细胞版本-找到 在这里 。请参阅我们的裂解协议,了解我们裂解产物的制备方法的更多详细信息。 用户存储说明: 冻干液可在4°C下储存。 复原后,在-20°C下短期保存或-80°C下长期保存。 获取数千种由常用癌症细胞系产生的敲除细胞裂解物。 有关敲除细胞裂解物的更多信息,请参阅此处。 Abcam没有也不打算申请客户使用含有欧洲授权清单(附件十四)物质的产品的REACH授权。 我们的客户有责任检查REACH授权和任何其他相关授权在其预期用途中应用的必要性。 本产品受The Broad Institute和ERS Genomics limited的有限使用许可,并采用专利技术开发。 有关有限使用许可证和相关专利的详细信息,请参阅我们的 有限使用许可证 和 专利页 . -
试验
性能
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存放说明 储存于-80°C。 请参阅协议。 -
组件 1套 ab263508-人NFKB2敲除HepG2细胞裂解物 1 x 100微克 ab263911-人类野生型HepG2细胞裂解物 1 x 100微克 -
研究领域 -
单元格类型 上皮的 -
疾病 肝细胞癌
靶
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相关性 NF-kappa-B是一种存在于几乎所有细胞类型中的多效性转录因子,是一系列信号转导事件的终点,这些事件由与炎症、免疫、分化、细胞生长、肿瘤发生和凋亡等许多生物过程相关的大量刺激物启动。 NF-kappa-B是由类Rel结构域蛋白RELA/p65、RELB、NFKB1/p105、NFKB1/p50、Rel和NFKB2/p52形成的同源或异二聚体复合物。 二聚体结合在其靶基因DNA中的kappa-B位点,并且单个二聚体对不同的kappa-B位点有不同的偏好,它们可以以不同的亲和力和特异性结合。 不同的二聚体组合分别作为转录激活物或阻遏物。 NF-kappa-B受翻译后修饰和亚细胞分隔的各种机制以及与其他辅因子或辅抑制因子的相互作用控制。 NF-kappa-B复合物被保存在细胞质中,处于与NF-kampa-B抑制剂家族成员复合的非活性状态。 在传统的激活途径中,I-kappa-B激酶(IKK)对不同的激活物进行磷酸化,随后降解,从而释放转移到细胞核的活性NF-κB复合物。 在非规范激活途径中,MAP3K14激活的CHUK/IKKA同型二聚体磷酸化与RelB相关的NFKB2/p100,诱导其蛋白水解为NFKB2/p52,并形成NF-kappa-B RelB-52复合物。 NF-kappa-B异二聚体RelB-52复合物是一种转录激活物。 NF-kappa-B p52-p52同型二聚体是一种转录阻遏物。 NFKB2似乎具有双重功能,如通过p100在细胞质中保留附着的NF-kappa-B蛋白和通过共翻译过程生成p52。 蛋白酶体介导的过程确保了p52和p100的产生,并保持了它们的独立功能。 p52与kappa-B一致序列5'-GGRNNYCC-3'结合,位于参与免疫反应和急性期反应的基因的增强子区域。 p52和p100分别是小调和大调; p100的处理相对较差。 异构体p49是NF-kappa-B蛋白复合物的一个亚单位,它与p65协同刺激HIV增强子。 与RELB一致,通过抑制clock-ARNTL/BMAL1异二聚体的转录激活物活性来调节生物钟。 -
细胞定位 细胞质和细胞核 -
别名 CVID10公司 DNA结合因子KBF2 H2TF1型
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应用
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图片
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车道1: 野生型HepG2细胞裂解物(20µg) 车道2: NFKB2敲除HepG2细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约175192 在120 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约175192 western blot显示,抗NFkB p100/NFKB2抗体[EPR4686-66]与野生型HepG2细胞中的NFkB p100/NFKB2特异性反应。 在敲除细胞系中观察到的条带 约262323 97kDa以下的(敲除细胞裂解物ab257247)通道可能代表截短形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和NFkB p100/NFKB2敲除样品进行SDS-PAGE分析。 将膜在室温下用3%脱脂奶粉在0.1%TBST中封闭1小时。 约175192 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1比10000和1比20000稀释度。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
车道1: 野生型HepG2细胞裂解物(20µg) 车道2: NFKB2敲除HepG2细胞裂解物(20µg) 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约109440 在120 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 约109440 western blot显示,抗NFkB p100/NFKB2抗体[EPR4686]与野生型HepG2细胞中的NFkB p100/NFKB2特异性反应。 在敲除细胞系中观察到的条带 第262323页 97kDa以下的(敲除细胞裂解物ab257247)通道可能代表截短形式和裂解碎片。 尚未对此进行进一步调查。 对野生型和NFkB p100/NFKB2敲除的样品进行SDS-PAGE。 将膜在室温下用3%脱脂奶粉在0.1%TBST中封闭1小时。 约109440 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4点孵育过夜 ° C分别为1000分之一和20000分之一稀释度。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
纯合子:第12外显子28 bp缺失
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载