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比较研究
.1986年2月5日;261(4):1890-903.

DARPP-32,一种多巴胺和环腺苷酸调节的神经元磷酸蛋白。蛋白磷酸酶抑制剂-1的一级结构及其同源性

  • PMID: 3511054
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比较研究

DARPP-32,一种多巴胺和环腺苷酸调节的神经元磷酸蛋白。蛋白磷酸酶抑制剂-1的一级结构及其同源性

K R威廉姆斯等。 生物化学杂志. .
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摘要

牛脑DARPP-32是一种多巴胺和环腺苷酸调节的神经元磷酸蛋白,是蛋白磷酸酶1催化亚单位的一种有效和特异性抑制剂,其完整氨基酸序列已被测定。S-14C-羧甲基化蛋白通过内蛋白酶Lys-C、内蛋白酶Arg-C、胰蛋白酶、糜蛋白酶和金黄色葡萄球菌V8蛋白酶进行酶切,并通过溴化氰进行化学切割。重叠的肽组通过高效液相色谱纯化,并通过自动Edman降解进行氨基酸测序,以推断完整序列。该蛋白质由202个残基的单一NH2末端封闭多肽链组成,计算分子量为22591道尔顿,不包括未识别的NH2末端阻断基团。该分子质量大大低于基于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳或流体力学测量的早期估计值。被环AMP依赖性蛋白激酶磷酸化的苏氨酸残基(Hemmings,H.C.,Jr.、Williams,K.R.、Konigsberg,W.H.和Greengard,P.(1984)J.Biol。化学。259、14486-14490),必须磷酸化才能表达抑制活性,位于位置34。该分子仅包含1个半胱氨酸残基和1个色氨酸残基,分别位于72和161位。DARPP-32具有很强的亲水性,从119位到134位含有16个连续的酸性残基。预测的二级结构表明存在47%的α-螺旋、7%的β-片和46%的随机线圈,有11个β-圈。对牛DARPP-32和兔骨骼肌蛋白磷酸酶抑制剂-1的完整氨基酸序列进行比较,发现这两种蛋白质的NH2末端区域具有显著的序列一致性。抑制剂-1的活性区域已定位于NH2末端片段(Aitken,A.和Cohen,P.(1982)FEBS Lett。147,54-58),分子中与DARPP-32最相似的部分。这些数据表明,这两种蛋白磷酸酶抑制剂的抑制活性可能具有共同的结构基础,并可能与一个共同的祖先基因有关。

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