主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[EPR362]至p21 适用于:Flow Cyt(Intra)、ICC/IF、WB、IP、IHC-P 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR362]至p21 -
宿主 兔子 -
特异性 不同组织/细胞系之间的目标蛋白表达水平不同,在某些情况下,可能需要诱导才能观察到信号。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:MCF7、HeLa、HEK293、HUVEC、LnCaP、U87 MG或HEK-293T细胞裂解物。 IHC-P:人宫颈癌或甲状腺乳头状癌组织。 ICC/IF:MCF-7细胞。 流动Cyt(内部):HeLa细胞。 IP:HEK-293细胞裂解物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油、59%PBS、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR362型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 可能是p53/TP53介导其作为细胞增殖抑制剂对DNA损伤作出反应的重要中间产物。 结合并抑制细胞周期依赖性激酶活性,防止关键细胞周期依赖激酶底物的磷酸化并阻止细胞周期进展。 在细胞周期蛋白D-CDK4复合物的核定位和组装中发挥作用,并促进其激酶活性朝向RB1。 在较高的化学计量比下,抑制细胞周期蛋白D-CDK4复合物的激酶活性。 -
组织特异性 在所有成人人体组织中表达,在大脑中观察到低5倍的水平。 -
序列相似性 属于CDI家族。 -
结构域 PIP-box K+4基序介导与PCNA的相互作用和DCX(DTL)复合体的恢复:当PIP-box与PCNA相互作用时,K+4亚基序的存在会招募DCX(DTL)复合物,导致其泛素化。 细胞周期蛋白D-CDK4复合物的核定位需要C末端。 -
翻译后修饰 Akt对Thr-145的磷酸化或PKC对Ser-146的磷酸化会损害与PCNA的结合。 GSK3-β在Ser-114的磷酸化增强了DCX(DTL)复合物的泛素化。 MKRN1泛素化; 导致多泛素化和26S蛋白酶体依赖性降解。 DCX(DTL)复合物泛素化,也称为CRL4(CDT2)复合物,导致其在S相或紫外线照射后降解。 DCX(DTL)复合物的泛素化对控制复制许可至关重要,并且是PCNA依赖性的:通过其PIP盒与PCNA相互作用,而PIP盒中含有“K+4”基序的存在会募集DCX(DTL)复合物,导致其降解。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 CAP20抗体 CDK-相互作用蛋白1抗体 CDKI抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR362](ab109520) 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: CDKN1A敲除HCT 116细胞裂解物 3号车道: 野生型MCF7细胞裂解物 车道4: CDKN1A敲除MCF7细胞裂解物 车道5: 野生型A549细胞裂解物 车道6: CDKN1A敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 蛋白质印迹:1/1000稀释的抗CDKN1A抗体[EPR362](ab109520)染色,显示为绿色; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab109520显示与CDKN1A特异性结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中21 kDa处观察到一条带,在CDKN1A敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和CDKN1A敲除HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p21抗体[EPR362](ab109520) 车道1: 野生型HeLa载体对照氟伐他汀(20μM,24小时)细胞裂解物 车道2: 野生型HeLa处理的氟伐他汀(50 uM,24 h)细胞裂解物 3号车道: CDKN1A敲除HeLa Vehicle Control氟伐他汀(20 uM,24 h)细胞裂解物 车道4: CDKN1A敲除HeLa处理的氟伐他汀(50 uM,24 h)细胞裂解物 车道5: MCF7细胞裂解物 车道6: SH-SY5Y细胞裂解液 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 Western blot假彩色图像:稀释1/1000的抗-p21抗体[EPR362]染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab109520显示与p21特异性结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中21 kDa处观察到一条带,在CDKN1A敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约255349 (敲除细胞裂解物 约263812 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDKN1A敲除细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道1 :野生型DLD-1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :野生型DLD-1 20μM 2,3-DCPE,用于16小时处理的细胞裂解液(20µg) 3号车道 :p21敲除DLD-1细胞裂解物(20µg) 4号车道 :p21敲除20μM 2,3-DCPE,用于16小时DLD-1细胞裂解液(20µg) 车道5: HT1080细胞裂解液(20μg) 1-5车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20kDa下观察到ab109520。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 经20μM 2,3-DCPE处理的野生型DLD-1细胞中,ab109520可特异性识别p21。 当使用p21敲除样品+/-2,3-DCPE处理时,未观察到条带。 野生型和p21基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab109520和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。 -
用纯化的ab109520在1/100处标记p21的人甲状腺癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
重叠直方图显示HeLa细胞用未纯化的ab109520染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween 20渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab109520,1/100)培养30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)( 约172730 ,1微克/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
在0.2µg/ml的MCF7(人乳腺癌上皮细胞)裂解液上测试不同批次的ab109520。在每条车道上装载15µg裂解液。 在21 kDa下观察到的谱带。 -
用纯化的抗体109520标记p21的MCF7细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析(1/1000)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 约150120 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 对照1:一级抗体(1/1000)和二级抗体, 约150120 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/500)。 -
车道1 :野生型DLD-1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :野生型DLD-1 20μM 2,3-DCPE,用于16小时处理的细胞裂解液(20µg) 3号车道 :p21敲除DLD-1细胞裂解物(20µg) 4号车道 :p21敲除20μM 2,3-DCPE,用于16小时DLD-1细胞裂解液(20µg) 车道5: HT1080细胞裂解液(20μg) 1-5车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在20kDa下观察到ab109520。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 这个western blot图像是ab109520和竞争对手最常引用的兔多克隆抗体之间的比较。 -
所有车道: 1/2000稀释(纯化)的抗p21抗体[EPR362](ab109520) 车道1: MCF7细胞裂解物 车道2: HEK293细胞裂解物 3号车道: U87-MG细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
甲状腺乳头状癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,以1/100的稀释度,用未纯化的ab109520标记p21。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
抗p21抗体[EPR362](ab109520),稀释(纯化)1/10000+LnCaP细胞裂解液,20µg 次要 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 21千帕 观察到的频带大小: 21千帕 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
人类宫颈癌组织标记p21的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,使用稀释度为1/100的未纯化ab109520。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
所有车道: 1/1000稀释的抗-p21抗体[EPR362](ab109520)(未纯化) 车道1: MCF7细胞裂解物 车道2: HeLa细胞裂解物 3号车道: HUVEC细胞裂解物 车道4: LnCap细胞裂解物 车道5: U87 MG细胞裂解液 车道6: 293T电池lsyate 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab6721号 ) 预测的带宽大小: 21千帕
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文献 (391)
Alhawamdeh M公司 等。 干扰素‑γ脂质体对肺癌患者淋巴细胞主要信号转导途径的影响。 Oncol Lett公司 27:8 (2024). 公共医学:38028180 严J 等。 Phoenixin-20对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(FLS)细胞衰老的保护作用。 老龄化(纽约州奥尔巴尼市) 15:14607-14616 (2023). 公共医学:38112587 Ruggiero广告 等。 脂肪组织中辐射的延迟效应反映了祖细胞损伤,而不是细胞衰老。 古生物学 45:507-521 (2023). 公共医学:36136223 陈Q 等。 低氧诱导的miR-653通过靶向circSETD3/KLF6轴促进结直肠癌进展。 J癌症 14:163-173 (2023). 公共医学:36605481 歌曲X 等。 循环衰老相关分泌表型水平与2型糖尿病相关性牙周炎严重程度的关系:一项横断面研究。 牙周病学杂志 94:986-996 (2023). 公共医学:36688675