主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP700Y]抗E Cadherin-BSA和无叠氮化合物 适用于:流式细胞周期(内部)、WB、IHC-P、ICC/IF、mIHC 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP700Y]至E Cadherin-无BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 IHC-P:人乳腺癌、肺腺癌和结肠腺癌组织。 甲状腺乳头状癌和肾组织移行细胞癌。 ICC/IF:MCF7、HT-29和A431细胞。 流动Cyt(内部):A431和MCF7细胞。 WB:MCF-7、HT-29、HepG2和PC-3全细胞裂解物。 mIHC:人类子宫内膜组织。
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规则说明 ab256580是无载波版本的 约40772 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种可结合的形式设计用于荧光染料、金属同位素、寡核苷酸和酶,这使它们成为抗体标记、功能性和基于细胞的分析、基于流式分析(如质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 . 小鼠、大鼠:我们有初步的内部测试数据,表明这种抗体可能不会与这些物种发生反应。 请联系我们了解更多信息。
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP700型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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备选版本 Alexa Fluor®488抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( ab185013年 ) Alexa Fluor®647抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( ab194982年 ) 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-低内毒素,无氮( 大约201499 ) Alexa Fluor®555抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约206878 ) Alexa Fluor®594抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约206880 ) PE抗-E钙粘蛋白抗体[EP700Y]( 约224959 ) APC抗-E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约224960 ) 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约40772 )
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兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 钙粘蛋白是钙依赖的细胞粘附蛋白。 在连接细胞时,它们优先以亲同方式与自身相互作用; 因此,钙粘蛋白可能有助于异质细胞类型的分类。 CDH1参与调节上皮细胞的细胞间粘附、迁移和增殖的机制。 具有强大的侵袭抑制作用。 它是整合素α-E/β-7的配体。 E-Cad/CTF2促进阿贝塔前体的非淀粉样降解。 对APP C99和C83的产生具有较强的抑制作用。 -
组织特异性 非神经上皮组织。 -
疾病相关 CDH1缺陷是遗传性弥漫性胃癌(HDGC)的原因[MIM:137215]。 一种常染色体显性癌症易感综合征,对弥漫性胃癌的易感性增加。 弥漫性胃癌是一种恶性疾病,其特征是分化不良的浸润性病变导致胃壁增厚。 恶性肿瘤始于胃,可扩散至食道或小肠,并可穿过胃壁延伸至附近的淋巴结和器官。 它也可以转移到身体的其他部位。 注=杂合子种系突变CDH1是弥漫性胃癌家族性病例的原因。 在散发性弥漫性胃癌和小叶性乳腺癌患者中也发现了体细胞突变。 CDH1缺陷是子宫内膜癌(ENDMC)易感性的一个原因[MIM:608089]。 CDH1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 -
序列相似性 包含5个钙粘蛋白域。 -
翻译后修饰 在细胞凋亡或钙内流期间,被膜结合金属蛋白酶(ADAM10)、PS1/gamma-分泌酶和caspase-3裂解,分别产生约38 kDa(E-CAD/CTF1)、33 kDa。 由钙内流诱导的金属蛋白酶处理导致细胞间粘附中断,随后β-catenin释放到细胞质中。 残余的膜系留裂解产物通过细胞内蛋白水解途径快速降解。 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解释放细胞质尾部,导致肌动蛋白微丝系统解体。 γ-分泌酶介导的分裂促进粘附连接的分解。 -
细胞定位 细胞连接。 细胞膜。 内体。 高尔基体>转高尔基体网络。在肠上皮细胞的细胞-细胞接触部位与DLGAP5进行结肠化。 通过与α-、β-和γ-肌动蛋白结合锚定在肌动蛋白微丝上。 凋亡或钙内流诱导的连续蛋白水解导致细胞与细胞接触部位向细胞质移位。 在从高尔基体运输到质膜的过程中,与RAB11A内体发生结肠化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 Arc 1抗体 CADH1_人类抗体 钙粘蛋白1抗体
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图片
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所有车道: 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约40772 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: CDH1敲除A431细胞裂解物 3号车道: Caco-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千Da 观察到的频带大小: 110130,40,55,80千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). Western blot:抗CDH1抗体[EP700Y]( 约40772 )以1/1000稀释度染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )1/2000稀释的负载对照染色显示为红色。在蛋白质印迹中, 约40772 被证明与CDH1特异结合。 在野生型A431细胞裂解液中在130、110、80、55、40 kDa处观察到一条带,在CDH1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约273747 (敲除细胞裂解物 约273781 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDH1敲除A431细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗小鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/2000。 -
所有车道: 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约40772 )稀释度为1/10000 车道1: 野生型Raji细胞裂解物 车道2: CDH1敲除Raji细胞裂解物 3号车道: MCF7细胞裂解物 车道4: MDA-MB-231细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗鼠IgG H&L 680RD(20000µg) 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千Da 观察到的频带大小: 105130千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). Western blot假彩色图像:抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记物染色(1/10000稀释),以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约40772 在野生型Raji细胞裂解液中观察到105/130 kDa的条带,在CDH1敲除细胞系中没有观察到这种大小的信号 约273747 (敲除细胞裂解物 约273781 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDH1敲除Raji细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗小鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/2000。 -
E-Cadherin的免疫荧光染色 约40772 野生型A431细胞(顶部面板)和CDH1敲除型A431电池(底部面板)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约40772 在1µg/mL和 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )(以绿色显示)和山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( ab150120型 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). -
E-Cadherin的免疫荧光染色 约40772 野生型A431细胞(顶部面板)和CDH1敲除型A431电池(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 约40772 0.2µg/mL和 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )(显示为绿色)和山羊抗小鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( ab150120型 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). -
人类子宫内膜的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)。 A组:抗E Cadherin融合染色(ab256580,红色;Opal™690),抗SLC34A2( 约238793 ,绿色; Opal™520)和抗CD10( 约255609 ,青色; Opal™570)。 B组:基质细胞上的抗CD10染色。 C组:腺细胞上有抗E钙粘蛋白染色。 图D:抗SLC34A2染色于腺细胞的顶膜上。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体。 切片在三轮染色中培养:按照ab256580的顺序,在1/3000稀释度(0.324μg/ml)下培养30分钟, 约238793 稀释1/1000(2.26μg/ml)10分钟 约255609 在室温下以1/1000稀释(0.615μg/ml)30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 在徕卡生物系统BOND上进行免疫染色 ® 带有Opal™4色套件的RX仪器。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)加热介导的抗原回收20分钟。 DAPI(蓝色)用作核反染剂。 -
所有车道: 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约40772 )稀释度为1/1000 车道1: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: A375(人恶性黑色素瘤上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: HT-1080(人纤维肉瘤上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千Da 观察到的频带大小: 80-125千道尔顿 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 约181602 作为GAPDH加载控制。 曝光时间:1道:3秒; 2-5车道:40秒。 A375、HeLa和HT-1080被报告为E钙粘蛋白阴性或表达低水平(PMID:30393081,PMID:16980628,PMID:34715746),PMID:25411788)。 -
抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约40772 )1/1000稀释+MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解液20µg 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千Da 观察到的频带大小: 80-125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3.25秒。 封闭和稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 全长E Cadherin的分子量约为125 kDa。 根据细胞类型或细胞条件,也可以观察到其他分子量在80-100 kDa之间。 PMID:27274359,PMID:26983597,PMID:18478055,PMID:22375065。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). -
约40772 用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)染色HT-29(人大肠腺癌)细胞中的E Cadherin。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%tritonX-100渗透。 样品与一级抗体以1/500稀释度孵育。 Alexa Fluor公司 ® 488山羊抗兔( 约150077 )以1/1000稀释度作为二级抗体。 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594) ( 约195889年 )以1/200稀释度作为副染色。 DAPI被用作核染色。 这是显示HT-29细胞系上膜染色的共聚焦图像。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). -
重叠直方图显示未经纯化的A431(人表皮样癌细胞系)细胞 约40772 (红线)。 细胞用80%甲醇固定(5分钟),并在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后用抗体培养细胞( 约40772 ,1/1000稀释)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约40772 ). -
标记E-Cadherin的MCF7(人乳腺癌上皮)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析 约40772 细胞用4%多聚甲醛固定,用0.1%tritonX-100渗透。 然后将样品与一级抗体以1/500的稀释度孵育,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )二级抗体的稀释度为1/1000(绿色)。 核反染为DAPI(蓝色)。 用 约195889年 抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594),稀释度为1/200(红色)。 共聚焦图像显示MCF7细胞系膜染色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲制剂中使用相同的抗体克隆开发的( 约40772 ).
实验方案
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (2)
刘X 等人。 miR-155促进MCF-7细胞的增殖和上皮-间质转化。 实验治疗学 21:218 (2021). 公共医学:33500705 孔D 等人。 PEA通过调节ROCK/MLC信号,防止脑缺血/再灌注(I/R)损伤后早期BBB中断。 生物化学-生物物理研究委员会 566:164-169 (2021). 公共医学:34126347