主要功能和细节
重组(无动物)生产,批次间一致性高,长期供应安全 兔抗HIF-1α单克隆抗体 适用范围:ICC/IF、Flow Cyt、IP、WB、IHC-P 反应:人类
概述
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产品名称 -
描述 [EP1215Y]至HIF-1α -
宿主 兔子 -
特异性 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 -
阳性对照 WB:DFO处理HeLa核裂解物( ab180880型 )用Cocl2处理拉莫斯细胞裂解物。 IHC-P:人卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、宫颈鳞癌组织。 人胃癌组织。 人结肠癌肿瘤组织。 ICC/IF:DFO处理的Hela细胞,Cocl2处理的Hela细胞和黄芩素处理的HepG2细胞。 Flow Cyt:DFO处理的Hela核裂解物。
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常规说明 小鼠特异性Hif-1-α兔单克隆抗体见 ab179483(克隆ID:EPR16897)。 ab179483号 已确认WB中的小鼠样品。 我们混合了客户对大鼠特异性的反馈,因此我们无法确认和保证其对大鼠样本的性能。 更多信息请联系技术团队。 本品为重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高了敏感性和特异性 -长期供应保障 -动物自由生产
了解更多信息 看这里 . 我们的教友 ® 这项技术是一项基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉马布 ® 专利 . 重复性是推进科学发现和加速科学家下一步突破的关键。 Abcam在我们的重组抗体、基因敲除验证抗体和敲除细胞系方面处于领先地位,所有这些都支持改进的重复性。 在我们的应用程序中,我们的产品和应用程序都是经过我们的合作者推荐的,所以我们的产品和应用程序都是经过我们的合作者推荐的 ™ 保证。 我们保证为这个产品的更新做准备。 我们也在更新产品的应用和品种,该产品已经“预计可以使用”,但这些信息不包括在我们的Abpromise保证范围内。 未在我们自己的实验室或我们的供应商的实验室中测试的出版物和文章中的应用和品种不在Abpromise担保范围内。 请在购买前检查该产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或顾虑,请在购买前向我们发送询价和/或联系我们的支持团队。 本产品的推荐替代品可以在下面找到,以及客户评论和问答。
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。在+4°C下短期储存(1-2周)。 交货时等分。 储存在-20°C。避免冻融循环。 -
解离常数(K D ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS,40%甘油,0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP1215Y型 -
同种型 免疫球蛋白 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
化验试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
接合试剂盒 -
同型控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
靶标
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功能 作为缺氧适应性反应的主要转录调节因子。 在缺氧条件下,激活40多个基因的转录,包括红细胞生成素、葡萄糖转运体、糖酵解酶、血管内皮生长因子和其他蛋白质产物增加氧气输送或促进代谢适应缺氧的基因。 血管生成在胚胎血管生成中起着重要的病理生理作用。 与靶基因启动子缺氧反应元件(HRE)内的核心DNA序列5'-[AG]CGTG-3'结合。 激活需要招募转录辅激活因子,如CREBPB和EP300。 通过与NCOA1或NCOA2的相互作用,活性得到增强。 与氧化还原调节蛋白APEX的相互作用似乎激活了CTAD,并增强了NCOA1和CREBBP的激活。 -
组织特异性 在肾脏和心脏组织中表达量最高。 在大多数常见的人类癌症及其转移瘤中过度表达,这是由于肿瘤内缺氧的存在以及编码癌蛋白和肿瘤抑制因子的基因突变所致。 -
序列相似性 包含1个基本螺旋-环-螺旋(bHLH)结构域。 包含1个PAC(PAS关联C-终端)域。 包含2个PAS(PER-ARNT-SIM)域。 -
结构域 包含两个独立的C-末端反式激活域,NTAD和CTAD,它们协同作用。 它们的转录活性被一个干预的抑制域(ID)所抑制。 -
翻译后修饰 在常氧条件下,通过EGLN1/PHD1和EGLN2/PHD2在氧依赖性降解域(ODD)上与Pro-402和Pro-564羟基化。 EGLN3/PHD3也被证明是羟基化的Pro-564。 羟基化脯氨酸促进与VHL的相互作用,启动快速泛素化和随后的蛋白酶体降解。 经USP20脱氮。 在缺氧条件下,脯氨酸羟基化受损,泛素化减弱,导致稳定。 在常氧条件下,通过HIF1AN在Asn-803上羟基化,从而消除了与CREBBP和EP300的相互作用并阻止转录激活。 这种羟基化反应被铜锌螯合剂Clioquinol抑制。 Cys-800的S-亚硝基化可能是HIF-1复合物转录活性所必需的p300辅激活子增加的原因。 DNA结合需要磷酸化。 苏门答腊的;缺氧时由苏木造成的。 Sumoylation通过与rwd3的相互作用而增强。 SENP1的去甲基化可提高HIF1A的稳定性和转肽活性。 泛素化;在常氧状态下,羟基化和与VHL相互作用。 Lys-532似乎是泛素化的主要位点。 Clioquinol,Cu/Zn螯合剂,通过阻止Asn-803上的羟基化来抑制泛素化。 天冬酰胺的铁和2-酮戊二酸依赖的3-羟基化反应在HIF-CTAD结构域内具有立体专一性。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 常氧状态下胞质,缺氧时核移位。 缺氧条件下,与SUMO1在细胞核内共定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 ARNT相互作用蛋白抗体 ARNT相互作用蛋白抗体 碱性螺旋-环-螺旋PAS蛋白MOP1抗体
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所有车道: 抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608),稀释1/2000 车道1: MCF-7(常氧) 车道2: MCF-7用0.5%氧气处理24小时 每车道30000个细胞的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 1/1000稀释度多克隆猪抗兔IgG-HRP 预测带大小: 93千伏安 阻断缓冲液:5%牛奶,4小时 ° C、 在 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡切片)-抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608) Zeindl Eberhart E等。上皮-间充质转化诱导人结直肠肿瘤细胞内质网应激反应。 公共科学图书馆综合图书馆9:e87386(2014)。 用ab51608作HIF-1α染色法对福尔马林固定石蜡包埋的人大肠癌组织进行免疫组化分析,切片内源性过氧化物酶被7.5%H抑制 2 O 2 室温下 在肿瘤中心区,β-catenin主要定位于细胞膜(A),而胞浆GRP78(B)和 HIF-1α 染色结果为阴性(C)。 在侵袭前沿可检测到强核β-连环蛋白,提示EMT(D,G)。 在相应区域,GRP78在胞浆中有强表达(E,H)。 在某些情况下是一种强烈的核武器 HIF-1α 观察到染色(F,缺氧),但其他人(I,无缺氧)(放大200倍;比例尺:100µm)。 -
用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光法)对Cocl2处理的HeLa细胞系进行ab51608染色。 细胞用4%多聚甲醛和0.1%曲通X-100渗透固定。 样品用原代抗体(1/500)孵育。 Alexa Fluor公司 ® 以兔抗ig8抗体(48g/g)作为二级抗体。 细胞核用DAPI(右手图像)复染。 -
重叠直方图显示未经处理的HeLa(蓝线)和HeLa处理的(红线-去铁胺,1mM,24小时)细胞被ab51608染色。 细胞用80%甲醇固定(5分钟),然后用0.1%PBS吐温渗透20分钟。然后将细胞培养在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中,以阻断非特异性蛋白质相互作用,然后在22℃下用抗体(ab51608,1/11709稀释度)30分钟。使用的次级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( ab150081号 )在1/2000稀释,22℃下30分钟。 用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了大于5000个事件。 -
用0.5mg HeLa核DFO处理的全细胞提取物免疫沉淀HIF-1-alpha( ab180880型 ),5µg兔多克隆至HIF1α和50µl蛋白质g磁珠(+)。 对照组(-)中未添加抗体。 抗体用蛋白G微球搅拌培养10min,将HeLa-DFO处理过的全细胞提取液稀释于RIPA缓冲液中,搅拌10min。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70°C下孵育10分钟;在SDS-PAGE凝胶上分离每个样品的10µl,转移到硝化纤维膜上,用5%BSA封闭,并用未纯化的ab51608进行探测。 次级:抗兔IgG轻链(HRP)的小鼠单克隆抗体[SB62a]( ab99697号 ). 波段:110kDa;HIF1α -
HeLa细胞未经处理或用1mM去铁胺(DFO)处理24h后,用多聚甲醛固定,荧光显微镜下成像。 细胞被阻断,用1X阻断缓冲液染色( ab126587号 ). 未净化的ab51608在1:500使用。 用DAPI标记细胞核。 HIF1α染色在未处理的细胞中缺失,并由DFO处理诱导。 HIF1α定位于细胞核。 -
抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608),1/100稀释+用10µg的Cocl2处理的Ramos细胞 次要 山羊抗兔IgG,(H+L),HRP-共轭,稀释1/1000 预测带大小: 93千伏安 -
ab51608免疫组化法(IHC-P-多聚甲醛固定石蜡包埋切片)对人卵巢癌组织切片HIF-1-alpha的染色。 用trisa/edt包埋于组织缓冲液中固定抗原。 样品用原代抗体(1/100)孵育。 以未稀释的HRP结合的抗兔IgG作为次级抗体。 组织用苏木精复染。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡切片)-抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608) Chen L等。胃癌患者胃切除术后HIF-1α过度表达与整体生存率和无病生存率相关。 公共科学图书馆综合图书馆9:e90678(2014)。 石蜡包埋福尔马林固定人胃癌组织HIF-1α免疫组化分析 ab15608 稀释1/600。 组织切片用迈耶苏木精复染。 柠檬酸缓冲液(pH6.0)抗原回收的标准方法 C。 HIF-1α主要定位于肿瘤细胞核(阳性表达×400)。
D。 HIF-1α原始放大倍率×100。 -
ab51608免疫细胞化学/免疫荧光法(ICC/IF)对未处理HeLa细胞系HIF-1-α的染色。 细胞用4%多聚甲醛和0.1%曲通X-100渗透固定。 样品用原代抗体(1/500)孵育。 Alexa Fluor公司 ® 以488株羊抗兔IgG(1/200)为二级抗体。 细胞核用DAPI(右手图像)复染。 -
未纯化ab51608免疫组化分析显示乳腺癌组织呈阳性染色。 -
用未纯化的ab51608进行免疫组化分析,在结肠腺癌组织中显示阳性染色。在开始IHC染色之前,通过微波方法进行热介导抗原回收。 -
未纯化ab51608免疫组化分析显示宫颈鳞状细胞癌组织呈阳性。 在开始IHC染色前,通过微波方法进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608),稀释1/2000(未纯化) 车道1: HeLa核提取液( ab150036号 ) 车道2: Hela-DFO处理(0.5mM,24h)核裂解物( ab180880型 ) 每道40µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 兔抗-H-G和羊抗-H-P( ab97051 )稀释1/10000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测带大小: 93千伏安 观察到的频带大小: 110千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? 曝光时间: 8分钟 Abcam建议使用5%的牛奶作为阻断剂,在一次和二次孵化期间降低到2%。 Abcam欢迎客户的反馈,并将感谢您对本产品和上述数据的任何意见。 -
瞬时转染干扰siRNA(lanes1-3和7-9)或HIF-1-αsiRNA(4-6和10-12道)后,抗HIF-1-α未纯化抗体(ab51608)与Hep3B细胞裂解物的反应性降低。 细胞在含有21%O的培养基中培养 2 (1-6车道)或1%O 2 (7-12道)裂解前4h。SDS-PAGE后,在25℃下将膜在5%牛奶中封闭1h,然后在4℃下与未纯化的ab51608(1/1000稀释5%牛奶)孵育16h。然后用抗兔HRP结合的二级抗体培养印迹,然后用ECL显影。 -
所有车道: 抗HIF-1α抗体[EP1215Y](ab51608),稀释1/2000(未纯化) 车道1: HeLa全细胞裂解物(未处理,阴性对照) 车道2: HeLa-DFO处理(0.5mM,24h)全细胞裂解液 车道3: HeLa核细胞裂解物(未处理,阴性对照) 车道4: HeLa核DFO处理(0.5mM,24h)细胞裂解液 每道40µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 兔抗-H-G和羊抗-H-P( ab97051 )稀释1/10000 在还原条件下进行。 预测带大小: 93千伏安 观察到的频带大小: 110千伏安 为什么实际的频带大小与预测的不同? 曝光时间: 2分钟 Abcam建议使用5%的牛奶作为阻断剂,在一次和二次孵化期间降低到2%。 Abcam欢迎客户的反馈,并将感谢您对本产品和上述数据的任何意见。
实验方案
文献 (168个)
魏H 等等。 间充质干细胞来源的外显体miR-223调节神经细胞凋亡。 细胞死亡 11: 290年(2020年)。 公共医疗:32341353 张Z 等等。 缺氧条件下HIF-1a通过调节FOXO3a影响子痫前期发病的滋养细胞凋亡。 摩尔医学代表 21:2484-2492(2020年)。 公共医疗:32323858 段C 等等。 Drp1通过Clec16a、BAX和GSH-途径调节缺血损伤中的线粒体功能障碍和代谢紊乱。 细胞死亡 11: 251(2020年)。 公共医疗:32312970 上官H 等等。 环状RNA环c25a16通过表观遗传修饰参与非小细胞肺癌的糖酵解。 细胞死亡 11: 437年(2020年)。 公共医疗:32513983 胡X 等等。 LncRNA Oprm1过表达通过Oprm1/miR-30b-5p/CSE轴增加内源性硫化氢,减轻心肌缺血/再灌注损伤。 生命科学 254:117699(2020年)。 公共医疗:32437793