HDR供体载体
GeneCopoeia为HDR介导的应用提供标准或定制的供体克隆载体。我们提供了广泛的捐赠者载体主干、启动子、标记和其他有用元素，以满足您的实验需要，例如：
- 两个多克隆位点（MCS）用于插入同源重组臂（左和右）。
- 基于细胞排序的阳性克隆选择的报告基因，如GFP（可选）
- 阳性克隆选择的选择标记，如嘌呤霉素和新霉素
- 消除随机积分的TK选择标记（可选）
- LoxP位置（可选），便于Cre-mediated盒式磁带取出。
HDR捐赠服务
GeneCopoeia还提供定制HDR捐赠者设计和施工服务，有两个版本（图2）：
HDR供体基因敲除HDR
第一种自定义HDR供体基因设计和构建服务旨在用于HDR介导的基因敲除（图2A）。这些供体基因是结合我们的CRISPR和TALEN靶位点设计的，可以从我们的CRISPR/TALEN全基因组搜索页面订购，可用在这里当你为你的基因搜索CRISPR sgRNA或TALEN靶点时，你会看到兼容HDR介导的敲除供体的选项。虽然组成性基因敲除不需要HDR供体，但HDR供血者确实可以为您的敲除细胞应用药物选择或使用荧光分选提供便利，这对于转染效率低的细胞系尤其重要。基因敲除HDR供体也能让你精确定义敲除突变的性质。
用于条件敲除、突变和框内融合标记的敲除HDR供体
GeneCopoeia定制HDR供体设计和构建服务的第二个版本旨在用于HDR介导的敲除应用程序（图2B），该应用程序需要HDR供者，包括1）条件基因敲除（位于外显子两侧的loxP位点用于Cre介导的失活）；2） 基因突变（引入特定的碱基对变化以突变基因或将突变基因恢复为野生型）；基因标签（在基因的5′端或3′端添加一个框架内融合蛋白基因标签）。定制HDR敲入捐赠者需要定制报价，可通过填写询价单。
A类
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B类
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| 图2。GeneCopoeia的两个版本的定制HDR捐赠者克隆设计和建造服务。A.淘汰HDR捐赠者策略示例。构建了一个同时含有药物选择标记物（Puro）和荧光报告物（GFP）的HDR供体。药物选择或荧光分选增强了获得淘汰的能力。注：为了简单起见，只显示了一个等位基因。B.突变的敲入供体策略示例。上图：单个碱基对改变的供体与CRISPR sgRNAs或TALENs共同转染。一个药物选择标记（Puro）和一个荧光报告子（GFP）被放置在突变位点附近的内含子中。药物选择或荧光分选允许分离具有突变等位基因的克隆。 |
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Fast Fusion™克隆工具包–GeneCopoeia提供Fast-Fusion™克隆工具包，加快克隆构建速度。任何PCR片段都可以在室温下15分钟内克隆到线性化载体中。在一个单一的反应中，多达八个DNA片段可以连接在一起。适当制备的载体可产生近100%的阳性克隆。交界处无限制场地要求。线性化的载体可以通过PCR或限制性内切酶消化生成。PCR产物可以由Taq DNA聚合酶或其他高保真DNA聚合物产生。
