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.1992年3月15日;267(8):5025-8.

凝血酶激活血小板中p21rasGAP与Fyn、Lyn和Yes的相关性

附属公司
  • PMID: 1544885
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凝血酶激活血小板中p21rasGAP与Fyn、Lyn和Yes的相关性

K奇乔夫斯基等。 生物化学杂志. .
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摘要

凝血酶和其他生理激动剂激活血小板导致多种细胞蛋白的酪氨酸磷酸化显著增加(Ferrell,J.E.和Martin,G.S.(1988)分子细胞。生物学8,3606-3610;Golden,A.和Brugge,J.S.(1989)Proc。国家。阿卡德。科学。美国86,901-905;Nakamura,S.和Yamamura,H.(1989)J.Biol。化学。264, 7089-7091). 迄今为止,还没有发现参与血小板活化的酪氨酸激酶,也没有发现对激动剂产生磷酸化反应的底物。为了利用已知酪氨酸激酶-底物相互作用的稳定性,采用了“激酶捕获”策略来解决这两个问题。p21rasGAP抗体用于检测激动剂治疗血小板中GAP的磷酸化状态,并分离潜在的GAP激酶复合物。我们表明,凝血酶刺激后,GAP和两个59和68 kDa的蛋白质在酪氨酸上磷酸化,三个Src-相关蛋白酪氨酸激酶Fyn、Lyn和Yes与复合物中的GAP相关,只有在激动剂刺激后才能检测到。对GAP免疫沉淀物中这些激酶的凝血酶依赖性检测表明,凝血酶可能诱导这些复合物的形成,或在激动剂刺激之前或之后激活与GAP相关的激酶。这种“捕获”与底物结合的激酶的方法将有助于识别参与信号通路的非受体酪氨酸激酶。此外,尽管GAP磷酸化以前被牵涉到生长因子信号通路中,但这是第一个从G蛋白偶联受体下游参与的例子。

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