主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗干扰素调节因子9/IRF-9的兔单克隆抗体[EPR24260-55] 适用人群:WB、IP、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR24260-55]至干扰素调节因子9/IRF-9 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:用干扰素α(10 ng/ml)处理的HeLa细胞、THP-1细胞、人卵巢癌、人肝癌裂解物。 IHC-P:用IFN-α(10ng/ml)处理的HeLa细胞,人脾脏和人肺,清除人肾组织的癌。 ICC/IF:用干扰素α-1(10 ng/ml)处理的HeLa细胞。 IP:用干扰素α-1(10 ng/ml)处理的HeLa细胞,THP-1细胞。
-
规则说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59.94%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克康宁 单克隆 -
克隆编号 EPR24260-55 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 通过I型干扰素(IFN-α和IFN-β)调节信号传导的转录调节因子。 在I型干扰素与细胞表面受体结合后,Jak激酶(TYK2和JAK1)被激活,导致STAT1和STAT2的酪氨酸磷酸化。 磷酸化的STAT二聚化,与IRF9/ISGF3G结合形成一种称为ISGF3转录因子的复合物,进入细胞核。 ISGF3与干扰素刺激反应元件(ISRE)结合,激活干扰素激发基因的转录,从而使细胞处于抗病毒状态。 -
序列相似性 属于IRF家族。 含有1个IRF色氨酸五肽重复DNA结合结构域。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 通过IFN-α/β激活后转移到细胞核中。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 干扰素α应答转录因子亚单位抗体 IFN-α应答转录因子亚单位抗体 干扰素调节因子9抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55](ab271043),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa处理的干扰素α1(hIFN-a1)(10 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道2: IRF9敲除HeLa处理的:hIFN-a1(10 ng/ml,16 h)细胞裂解物 3号车道: 野生型HeLa控制干扰素α1(hIFN-a1)(0 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道4: IRF9敲除HeLa载体对照:hIFN-a1(0 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道5: THP-1细胞裂解物 车道6: ACHN细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 48千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab271043被证明与干扰素调节因子9/IRF-9特异性结合。 在处理过的野生型HeLa细胞裂解液中,在48 kDa处观察到一条带,在IRF9 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 约266051 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约258472 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于48 kDa的裂解物通道中观察到的条带可能代表干扰素调节因子9/IRF-9的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和IRF9 CRISPR-Cas9编辑的HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55](ab271043),稀释度为1/1000 车道1: 野生型A549处理的干扰素α1(hIFN-a1)(10 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道2: IRF9敲除A549处理的干扰素α1(hIFN-a1)(10 ng/ml,16 h)细胞裂解物 3号车道: 野生型A549对照干扰素α1(hIFN-a1)(0 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道4: IRF9敲除物A549对照干扰素α1(hIFN-a1)(0 ng/ml,16 h)细胞裂解物 车道5: THP-1细胞裂解物 车道6: ACHN细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 48千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab271043被证明与干扰素调节因子9/IRF-9特异性结合。 在IRF9 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中,在处理过的野生型A549细胞裂解液中观察到48 kDa处的一条带,在该大小下未观察到信号 ab267119 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约258473 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于48 kDa的裂解物通道中观察到的条带可能代表干扰素调节因子9/IRF-9的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和IRF9 CRISPR-Cas9编辑的A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
ab271043染色野生型A549细胞和IRF9敲除A549细胞中的干扰素调节因子9( 约48750 )10 ng/ml,持续16小时。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用浓度为0.4μg/ml的ab271043培养细胞 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
ab271043染色野生型HeLa细胞中的干扰素调节因子9和用干扰素a1处理的IRF9敲除HeLa的细胞( 约48750 )10 ng/ml,持续16小时。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用浓度为0.4μg/ml的ab271043培养细胞 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55](ab271043),稀释度为1/1000 车道1: 未经处理的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: 用10ng/ml人干扰素α1处理HeLa( 约48750 )16小时,全细胞裂解 3号车道: THP-1(人单核细胞白血病单核细胞)全细胞裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/50000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 48千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 IFN-α增加了IRF9的表达(PMID:18190617)。 曝光时间:15秒。 -
所有车道: 抗干扰素调节因子9/IRF-9抗体[EPR24260-55](ab271043),稀释度为1/1000 车道1: 人卵巢癌组织裂解物 车道2: 人肝癌组织裂解物 每车道40µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )稀释度为1/1000(IP二级抗体(HRP)的VeriBlot) 预测的带宽大小: 44千帕 观察到的频带大小: 30,48千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 IFR9可以被EV71编码的3C蛋白酶降解。 观察到48-kDa全长和30-kDa劈开的IRF9。 分子量与文献中描述的一致(PMID:21536800)。 曝光时间:3分钟。 -
石蜡包埋HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞(A)和经10 ng/ml IFN处理18 h的HeLa细胞(B)的免疫组织化学分析,用ab271043在1/2000稀释度(0.233 ug/ml)下标记干扰素调节因子9/IRF-9,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 在HeLa细胞上几乎没有染色(A),在用10ng/ml IFN处理18h的HeLa细胞上有强阳性染色(B)。 该切片在室温下与ab271043孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
用ab271043对石蜡包埋的人脾组织标记干扰素调节因子9/IRF-9进行免疫组织化学分析,稀释度为1/2000(0.233 ug/ml),然后进行即用(Bond™Polymer Refine Detection)。 人脾染色阳性。 该切片在室温下与ab271043孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
石蜡包埋的人肺组织的免疫组织化学分析,以1/2000稀释度(0.233 ug/ml)的ab271043标记干扰素调节因子9/IRF-9,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 人肺阳性染色(PMID:30355451)。 该切片在室温下与ab271043孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是一种现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
对石蜡包埋的人类肾组织透明细胞癌进行免疫组织化学分析,在1/2000稀释度(0.233 ug/ml)下用ab271043标记干扰素调节因子9/IRF-9,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 人肾脏透明细胞癌阳性染色(PMID:30355451)。 该切片在室温下与ab271043孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
4%对甲醛固定、0.1%TritonX-100渗透HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/50稀释度(9.3 ug/ml)下用ab271043标记干扰素调节因子9/IRF-9,然后 约150081 羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/500(绿色)。 共聚焦图像显示,用干扰素α-1(10 ng/ml)处理HeLa细胞16小时后,细胞核和细胞质染色增强。 约195889年 使用抗α-Tubulin小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa-Fluro®594)在1/200稀释度下对微管蛋白进行反染色(红色)。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/500稀释度预吸附。 -
干扰素调节因子9/IRF-9从0.35 mg处理过的HeLa全细胞裂解液中以1/30稀释度(0.35 mg裂解液中2 ug)用ab271043免疫沉淀。 用ab271043在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1 :用10 ng/ml人干扰素α1处理HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)( 约48750 )16小时,全细胞裂解物10 ug 2号车道 :用10 ng/ml人干扰素α1处理的HeLa中的ab271043 IP( 约48750 )16小时的全细胞裂解物 3号车道 :兔单克隆IgG( 约172730 )而不是用10 ng/ml人干扰素α1处理的HeLa中的ab271043( 约48750 )16小时全细胞裂解液 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3分钟。 -
干扰素调节因子9/IRF-9从0.35 mg THP-1(人单核细胞白血病单核细胞)全细胞裂解液中用ab271043以1/30稀释(0.35 mg裂解液中2 ug)进行免疫沉淀。 用ab271043在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000稀释度使用。 车道1 :THP-1全细胞裂解物10 ug 2号车道 :ab271043 IP在THP-1全细胞裂解液中 3号车道 :兔单克隆IgG( 约172730 )代替THP-1全细胞裂解液中的ab271043 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3分钟。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载