主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[Y236]对p27 KIP 1-BSA和无叠氮化物 适用于:Flow Cyt(Intra)、IHC-P、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y236]至p27 KIP 1-不含BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
特异性 这种抗体识别p27(Kip1)。 大鼠推荐基于WB结果。 我们不保证老鼠的IHC-P。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 MCF-7细胞裂解物、PC-12细胞、人乳腺癌
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常规说明 ab206927是的无运营商版本 约32034 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度允许提高缀合效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 运输温度为4°C。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 Y236年 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
美国
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靶标
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功能 细胞周期进展的重要调节器。 参与G1逮捕。 细胞周期蛋白E-和细胞周期蛋白A-CDK2复合物的有效抑制剂。 与细胞周期蛋白型D-CDK4复合物形成复合物,参与CCND1-CDK4络合物活化的组装、稳定性和调节。 作为细胞周期蛋白型D-CDK4复合物的抑制剂或激活剂,取决于其磷酸化状态和/或计量学。 -
组织特异性 在所有受试组织中表达。 骨骼肌中含量最高,肝脏和肾脏最低。 -
疾病相关 CDKN1B缺陷是多发性内分泌肿瘤4型(MEN4)的原因[MIM:610755]。 多发性内分泌肿瘤综合征是甲状腺的遗传性癌症综合征。 MEN4是一种MEN1和MEN2表型重叠的MEN样综合征。 -
美国 属于CDI家族。 -
结构域 仅包含AA 28-79的肽序列保留了大量Kip1细胞周期蛋白A/CDK2抑制活性。 -
翻译后修饰 磷酸化; 磷酸化发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基上。 Ser-10上的磷酸化是静息细胞磷酸化的主要部位,发生在G(0)-G(1)期,导致蛋白质稳定。 有丝分裂原、生长因子、cMYC和某些癌细胞株大大增强了其他部位的磷酸化。 细胞质中的磷酸化形式是失活的。 Thr-198上的磷酸化是与14-3-3蛋白质相互作用所必需的。 CDK2对Thr-187的磷酸化导致蛋白质泛素化和蛋白酶体降解。 酪氨酸磷酸化促进了这一过程。 PKB/AKT1的磷酸化可被PI3K催化亚基抑制剂LY294002抑制。 Tyr-88和Tyr-89上的磷酸化对结合CDK2没有影响,但需要结合CDK4。 通过G-CSF对酪氨酸残基进行去磷酸化。 泛素化; 在细胞质中由KPC复合体(由RNF123/KPC1和UBAC1/KPC2组成)和在细胞核中由SCF(SKP2)。 后者需要预先对Thr-187进行磷酸化。 泛素化; 通过含有SCF(SKP2)的类TRIM21复合物; 导致其退化。 易在溶酶体中降解。 与SNX6的相互作用促进溶酶体降解。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 内皮细胞。 静止细胞中的细胞核和细胞质。 AKT或RSK介导的Thr-198磷酸化结合14-3-3,易位到细胞质并促进细胞周期进展。 丝裂原激活的UHMK1在Ser-10上的磷酸化也导致向细胞质的移位和细胞周期的进展。 Ser-10上的磷酸化促进了核出口。 在Tyr-88和Tyr-89的磷酸化上转移到细胞核。 用SNX6在内体处结肠化,这导致溶酶体降解。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 AA408329抗体 AI843786抗体 Cdki1b抗体
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图片
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所有车道: 抗p27 KIP 1抗体[Y236]( 约32034 )稀释1/5000 车道1: 野生型RAW 264.7细胞裂解物 车道2: CDKN1B敲除RAW 264.7细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 22千帕 观察到的波段大小: 28千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:1/5000稀释的抗-p27 KIP 1抗体[Y236]染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约32034 显示与p27 KIP 1特异性结合。 在野生型RAW 264.7细胞裂解液中28 kDa处观察到一条带,在CDKN1B敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约281619 (敲除细胞裂解物 约282970 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDKN1B敲除RAW 264.7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
该WB数据是使用相同的抗p27 KIP 1抗体克隆Y236在不同的缓冲液配方(cat# 约32034 ). 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: CDKN1B敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(20µg) 车道4: MCF7全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约32034 在30 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 未净化 约32034 在野生型HAP1细胞中显示与CDKN1B特异性反应。 使用CDKN1B敲除样品时未观察到条带。 对野生型和CDKN1B基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 约32034 和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷控制)分别在1/1000和1/10000的4°C下培养过夜。 在成像前,用800CW山羊抗兔和680CW山羊抗鼠二级抗体在室温下以1/10000稀释1小时制备印迹。 -
重叠直方图显示HAP1野生型(绿线)和HAP1-CDKN1B敲除细胞(红线) 约32034 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在1x PBS/10%正常山羊血清中,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体( 约32034 ,1µg/ml)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)预吸收( 约150081 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 一种兔IgG同型控制抗体( 约172730 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用(HAP1野生型-黑线,HAP1-CDKN1B敲除-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和530/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体也可用于用4%PFA固定的HAP1细胞(10分钟),在相同条件下用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32034 ). -
约32034 (纯化)1:20稀释(2μg),在MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物中免疫沉淀p27 KIP 1。
车道1(输入): MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物10μg 车道2(+): 约32034 &MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是 约32034 MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 用于蛋白质印迹,用于IP检测试剂(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )用于1:1000稀释度的检测。 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32034 ). -
石蜡包埋人乳腺癌的免疫组织化学分析 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32034 ). -
未净化 约32034 NS 398处理的MCF7细胞中p27 KIP1的染色( 约120295 )如文献所述,p27 KIP1表达增加与NS 398浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养6小时,培养基中含有不同浓度的 约120295 (NS 398)在DMSO中,室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下使用含有10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用 约32034 (1/100稀释)在含1%BSA和0.1%吐温的PBS中于4°C下过夜。 DyLight 488羊抗兔多克隆抗体( 约96899 )以1/250稀释液作为二级抗体。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约32034 ).
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (11)
陈毅 等。 O-GlcNAcylated c-Jun通过抑制肝癌中谷胱甘肽的合成对抗铁下垂。 细胞信号 63:109384 (2019). 公共医学:31394193 辛哈PK 等。 TGF-诱导的TMEPAI/PMEPA1通过R-Smad隔离抑制标准Smad信号,并通过减少三阴性乳腺癌中PTEN的表达促进非标准PI3K/Akt信号。 基因癌症 5:320-36 (2014). 公共医学:25352949 阿布N 等。 Flavokawain A在体外诱导MCF-7和MDA-MB231细胞凋亡并抑制转移过程。 公共科学图书馆一号 9:e105244(2014)。 世界银行 ; 人类 . 公共医学:25286005 范德恩特W 等。 斑马鱼异种胚胎中人类葡萄膜黑色素瘤的建模。 投资眼科视觉科学 55:6612-22 (2014). 世界银行 . 公共医学:25249605 张伟 等。 ELL通过组蛋白脱乙酰酶1的募集来增强E2F1脱乙酰化,从而抑制E2F1转录活性。 分子细胞生物学 34:765-75 (2014). 公共医学:24344198