主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR3507]对HMGB1-BSA和无叠氮化合物 适用于:ICC/IF、WB、IHC-P、Flow Cyt(Intra) 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克次克 [EPR3507]至HMGB1-无BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 以下内容: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HAP1、SK-BR-3、HeLa和HepG2细胞裂解物和大鼠脑组织裂解物。 IHC-P:人体肾脏和扁桃体组织。 ICC/IF:DU145和HeLa细胞。 流式细胞周期(内部):HeLa和HAP1细胞。
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常规说明 ab216986是无载波版本的 约79823 . 我们的 无载体 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.20 成分:PBS -
无障碍 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR3507型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 Alexa Fluor®488抗-HMGB1抗体[EPR3507]( ab195010年 ) Alexa Fluor®647抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 大约195011年 ) HRP抗-HMGB1抗体[EPR3507]( ab195012年 ) Alexa Fluor®594抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约206894 ) Alexa Fluor®405抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约206895 ) Alexa Fluor®555抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约206896 ) APC抗HMGB1抗体[EPR3507]( 约225041 ) PE抗-HMGB1抗体[EPR3507]( ab225042号 ) APC抗HMGB1抗体[EPR3507]( 约316300 ) 抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约79823 )
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兼容的辅助设备 -
偶联试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 多功能氧化还原敏感蛋白,在不同的细胞隔室中具有不同的作用。 细胞核中是主要的染色质相关非组蛋白之一,作为DNA伴侣参与复制、转录、染色质重塑、V(D)J重组、DNA修复和基因组稳定性。 建议成为一种通用的核酸生物传感器。 促进宿主对无菌和感染信号的炎症反应,并参与先天和适应性免疫反应的协调和整合。 细胞质中作为免疫原核酸的传感器和/或伴侣,涉及TLR9介导的免疫反应的激活,并介导自噬。 作为危险相关分子模式(DAMP)分子,在组织损伤期间增强免疫反应。 释放到细胞外环境可以结合DNA、核小体、IL-1β、CXCL12、AGER亚型2/sRAGE、脂多糖(LPS)和脂磷壁酸(LTA),并通过多种表面受体的参与激活细胞。 在细胞外室中,完全减少的HMGB1(由坏死释放)作为趋化因子,二硫键HMGB1作为细胞因子(积极分泌),磺酰HMGB1则(由凋亡细胞释放)促进免疫耐受(PubMed:23519706,PubMed:33446148,PubMet:23994764,PubMer:25048472)。 具有促血管生成活性(根据相似性)。 可能参与血小板活化(根据相似性)。 与磷脂酰丝氨酸和磷脂酰乙醇酰胺结合(通过相似性)。 与RAGE结合介导神经元生长信号(通过相似性)。 可能在扩大聚谷氨酰胺(polyQ)蛋白质的积累中起作用,例如亨廷顿蛋白(HTT)或TBP(PubMed:23303669,PubMed:25549101)。 核功能归因于HGMB1的完全降低。 与染色质结合并结合DNA,优先选择非标准DNA结构,如单链DNA、含DNA的十字形或弯曲结构、超螺旋DNA和ZDNA。 可以弯曲DNA并通过环化增强DNA的灵活性,从而通过增强转录因子结合和/或使远程调控序列接近,提供一种机制来促进各种基因启动子的活性(PubMed:20123072)。 可能在核苷酸切除修复(NER)中起增强作用(通过相似性)。 然而,使用体外系统在NER中的效果却有矛盾的报道(PubMed:19446504,PubMed:19360789)。 可能参与错配修复(MMR)和碱基切除修复(BER)途径(PubMed:15014079,PubMed:16143102,PubMed:17803946)。 可能参与双绞线断裂修复,如非同源端接(NHEJ)(通过相似性)。 作为RAG复合体的辅因子参与V(D)J重组:通过刺激保守重组信号序列(RSS)23 bp间隔区的裂解和RAG蛋白结合发挥作用(通过相似性)。 体外可以从高度弯曲的DNA中置换组蛋白H1(根据相似性)。 可以重组标准核小体,导致转录因子结合的结构约束放松(通过相似性)。 增强固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)如SREBF1与其同源DNA序列的结合,并增加其转录活性(通过相似性)。 促进TP53与DNA的结合(PubMed:23063560)。 建议以与HSPB1相关的转录依赖方式参与线粒体质量控制和自噬; 然而,这一功能受到了质疑(通过相似性)。 可以调节端粒酶复合体的活性,并可能参与端粒的维持。 在细胞质中,建议通过与BECN1的竞争性相互作用分离BECN1:BCL2复合物,导致自噬激活(PubMed:20819940)。 参与氧化应激介导的自噬(PubMed:21395369)。 可以保护BECN1和ATG5免受钙蛋白酶介导的分裂,从而控制其促自噬和促凋亡功能,并调节炎症相关细胞损伤的程度和严重程度(通过相似性)。 在髓系细胞中,通过促进自噬对内毒素血症和细菌感染具有保护作用(通过相似性)。 参与巨噬细胞对CpG-DNA的反应中TLR9的内体移位和激活。 细胞外室(主动分泌或被动释放后)参与炎症反应的调节。 完全降低的HGMB1(释放后会被氧化)与CXCL12相关,在组织损伤的初始阶段介导炎症细胞的募集; CXCL12:HMGB1复合物触发CXCR4同二聚化(PubMed:22370717)。 诱导单核细胞衍生的未成熟树突状细胞的迁移,并似乎调节与AGER/RAGE和ITGAM相关的中性粒细胞的粘附和迁移功能(通过相似性)。 可结合各种类型的DNA和RNA,包括微生物非甲基化CpG-DNA,以增强对核酸的先天免疫反应。 建议在混杂的DNA/RNA传感中发挥作用,该传感与特定模式识别受体随后的区分传感相配合(通过相似性)。 促进与AGER/RAGE相关的细胞外DNA诱导的AIM2炎症小体激活(PubMed:24971542)。 二硫HMGB1与跨膜受体结合,如AGER/RAGE、TLR2、TLR4和可能的TREM1,从而激活其信号转导途径。 介导细胞因子/趋化因子的释放,如TNF、IL-1、IL-6、IL-8、CCL2、CCL3、CCL4和CXCL10(PubMed:122765338,PubMed:18354232,PubMed:19264983,PubMed:20547845,PubMed:224474694)。 促进巨噬细胞刺激的自然杀伤(NK)细胞与其他细胞因子如IL-2或IL-12协同分泌干扰素-γ(PubMed:15607795)。 TLR4被认为是促进巨噬细胞活化的主要受体,通过TLR4进行信号传递似乎与LY96/MD-2有关(PubMed:20547845)。 在细菌LPS或LTA介导的炎症反应中,炎症反应与内毒素结合,并将其转移到CD14,以向相应的TLR4:LY96和TLR2复合物发出信号(PubMed:18354232,PubMed:21660935,PubMet:25660311)。 通过与ACER/RAGE的关联促进肿瘤增殖(通过相似性)。 可通过IL1R1:IL1RAP受体复合物结合IL1-beta和信号(PubMed:18250463)。 与A类CpG结合可激活与TLR9、MYD88和AGER/RAGE相关的浆细胞样树突状细胞中的细胞因子生成,并可激活自身反应性B细胞。 通过含HMGB1的染色质免疫复合物,还可以通过B细胞受体(BCR)依赖性和ACER/RAGE依赖性机制(通过相似性)促进B细胞对内源性TLR9配体的反应。 抑制巨噬细胞吞噬凋亡细胞; 该功能依赖于多聚腺苷二磷酸核糖化,并与凋亡细胞细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合(根据相似性)。 适应性免疫可能通过激活效应T细胞和抑制调节性T(TReg)细胞来增强免疫(PubMed:15944249,PubMed:22473704)。 相反,在不涉及效应或调节性T细胞的情况下,表达淋巴毒素LTA:LTB异源三聚体的T细胞需要肿瘤浸润和激活,从而促进肿瘤恶性进展(通过相似性)。 也有报道限制T细胞增殖(根据相似性)。 释放HMGB1:凋亡过程中形成的核小体复合体可以通过TLR2发出信号,诱导细胞因子产生(PubMed:19064698)。 参与凋亡细胞诱导免疫耐受; 当其由凋亡细胞释放时,其促炎活性被特异性针对Cys-106的活性氧(ROS)依赖性氧化所中和(PubMed:18631454)。 在巨噬细胞活化过程中,活化的淋巴细胞衍生的自凋亡DNA(ALD-DNA)促进ALD-DNA向内体的募集。 -
组织特异性 无处不在。 以血小板表达(PubMed:11154118)。 -
序列相似性 属于HMGB家族。 包含2个HMG盒DNA结合结构域。 -
结构域 HMG盒2介导促炎细胞因子刺激活性并与TLR4结合(PubMed:12765338,PubMed:20547845)。 然而,在凋亡诱导免疫耐受的背景下,不参与介导免疫原活性(PubMed:24474694)。 酸性C末端结构域形成一个柔性结构,可以与HMG盒在分子内可逆地相互作用,并调节与DNA和其他蛋白质的结合(PubMed:23063560)。 -
翻译后修饰 丝氨酸残基磷酸化。 NLS两个区域的磷酸化是细胞质易位和分泌所必需的(PubMed:17114460)。 LPS刺激后在多个部位乙酰化(PubMed:22801494)。 核定位信号(NLS1和NLS2)中赖氨酸残基的乙酰化导致细胞质定位和随后的分泌(通过相似性)。 Lys-3上的乙酰化导致优先结合DNA末端并削弱DNA弯曲活性。 半胱氨酸残基Cys-23、Cys-45和Cys-106的还原/氧化,以及可能的分子内二硫键,包括Cys-23和Cys-46,在不同的细胞隔室中产生具有特定功能活性的不同氧化还原形式:1-完全还原HMGB1(HMGB1C23hC45hC106h),2-二硫基HMGB1 和3-磺酰基HMGB1(HMGB1C23soC45soC106so)。 LPS刺激后分泌的PARP1可使多聚ADP-核糖化。 CASP1的体外裂解释放出一种含有HMG盒1的肽,该肽可能介导免疫原性活性; 该肽拮抗凋亡诱导的免疫耐受(PubMed:24474694)。 可被凝血酶水解:血栓调节蛋白复合物; 减少与肝素的结合和促炎活性。 -
细胞定位 核心。 染色体。 细胞质。 保密。 细胞膜。 内体。 内质网-高尔基体中间隔室。 基态主要为核。 穿梭于细胞质和细胞核之间(PubMed:12231511,PubMed:17114460)。 在自噬刺激下从细胞核转移到细胞质(PubMed:20819940)。 巨噬细胞在细胞外环境中的释放需要激活NLRC4或NLRP3炎性体(根据相似性)。 通过扩散将坏死细胞被动释放至细胞外环境,包括完全还原的HGMB1,随后被氧化(PubMed:19811284)。 也由凋亡细胞释放(PubMed:16855214,PubMed:18631454)。 各种免疫细胞和非免疫细胞(如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞)对各种刺激(如脂多糖和细胞因子)的主动分泌涉及通过分泌溶酶体的非常规分泌过程(PubMed:12231511,PubMed:14532127,PubMet:15944249)。 血浆细胞对LPS的反应而分泌(通过相似性)。 发现于活化血小板表面(PubMed:11154118)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3146 人类 Entrez基因: 100862258 鼠标 Entrez基因: 15289 鼠标 Entrez基因: 25459 老鼠 Omim公司: 163905 人类 瑞士保护银行: P09429号 人类 瑞士保护银行: 第63158页 鼠标 瑞士保护银行: 第63159页 老鼠
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别名 两性激素抗体 染色体蛋白、非组蛋白、HMG1抗体 DKFZp686A04236抗体
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(希腊语)
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该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约79823 ). 流式细胞术重叠直方图显示野生型Hap1(绿线)和HMGB1敲除Hap1染色 约79823 (红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体( 约79823 )(1个10 6 100μl,0.008μg/ml(1/260000)),22°C下30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照在与一级抗体相同的浓度和条件下使用(野生型Hap1-黑线,HMGB1敲除Hap1-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
所有车道: 抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约79823 )稀释度为1/10000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 25千Da 观察到的频带大小: 30千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约79823 ). 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约79823 在30kDa下观察到。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( ab8245 )在37 kDa时观察到。 约79823 western blot显示在野生型HeLa细胞中与HMGB1反应。 当CRISPR/Cas9编辑细胞系时,观察到预期大小的信号损失 约255395 (CRISPR/Cas9编辑的细胞裂解物 约263782 )已使用。 在25kDa以下的通道2中观察到的带可能代表截断形式和劈开碎片。 对野生型HeLa和HMGB1 CRISPR/Cas9编辑的HeLa细胞裂解液进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 约79823 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,分别以1比10000和1比20000稀释。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
克隆EPR3507(ab216986)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-HMGB1抗体[EPR3507](Alexa Fluor®647)生成的。 请参阅 大约195011年 了解协议详细信息。 大约195011年 HeLa细胞HMGB1染色。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),在0.1%Triton X-100中渗透5分钟,然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 大约195011年 稀释度为1/100(以红色显示) 约195887年 ,小鼠单克隆[DM1A]与α-Tubulin(Alexa Fluor®488,以绿色显示)在+4°C下以2µg/ml隔夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在相同的测试条件下,该产品在100%甲醇(5分钟)固定的HeLa电池中发出正信号。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 抗-HMGB1抗体[EPR3507]( 约79823 )稀释度为1/10000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: HMGB1敲除HAP1全细胞裂解物 车道3: Jurkat全细胞裂解物 车道4: HeLa全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 25千Da 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约79823 ). 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约79823 在30 kDa时观察到。 红色负载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab79823 在野生型HAP1细胞中显示与HMGB1特异性反应,因为HMGB1敲除细胞中信号丢失。 对野生型和HMGB1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab79823 和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/10000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
克隆EPR3507(ab216986)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-HMGB1抗体[EPR3507](Alexa Fluor®488)生成的。 请参阅 ab195010年 了解协议详细信息。 ab195010年 HeLa细胞HMGB1染色。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),在0.1%Triton X-100中渗透5分钟,然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与 ab195010年 工作稀释度为1/100(以绿色显示) 约195889年 ,小鼠单克隆[DM1A]与α-管蛋白(Alexa Fluor®594,以红色显示)在+4°C下以2µg/ml隔夜。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在相同的测试条件下,该产品在100%甲醇(5分钟)固定的HeLa电池中发出正信号。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
克隆EPR3507(ab216986)已被Abcam成功偶联。 该图像是使用抗-HMGB1抗体[EPR3507](PE)生成的。 请参阅 ab225042号 了解协议详细信息。 重叠直方图显示HeLa细胞染色 ab225042号 (红线)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清中培养细胞,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体( ab225042号 ,1/1000稀释)在22°C下保持30分钟。 同种型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)藻红蛋白( 约209478 )在与第一抗体相同的浓度和条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW黄/绿激光(561nm)和586/15带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
重叠直方图显示未纯化HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞染色 ab79823 (红线)。 将细胞用甲醇固定(5分钟),然后用0.1%PBS吐温透化20分钟。然后将细胞在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后用抗体( 约79823 ,1/20稀释)在22°C下保持30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下以1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(0.5µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 在相同条件下使用4%多聚甲醛/0.1%PBS-Tween 20渗透固定的HeLa细胞中,该抗体发出的信号减弱。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约79823 ). -
未净化的ICC/IF图像 约79823 DU145(人前列腺癌细胞系)细胞染色。 细胞经4%甲醛固定(10分钟),然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后用抗体培养细胞 约79823 在+4°C下,以1/1000稀释过夜。 二级抗体(绿色)为DyLight ® 488山羊抗兔( 约96899 )以1/1000稀释度使用IgG(H+L)1小时。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记1/200稀释1h的质膜(红色)。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约79823 ).
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (15)
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