主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 PKR单克隆兔[Y117] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y117]至PKR -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体不会与其他GCN2家族成员发生交叉反应。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 人PKR aa 500-600(C末端)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:MCF-7、HEK293和HeLa全细胞裂解物( 约150035 )和人肝癌组织裂解物。 ICC/IF:野生型HAP1、MCF-7和HeLa细胞。 IHC-P:人肝癌和结肠癌组织。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 第117页 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
产品
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替代版本 -
同种型对照 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 在ATP存在下被双链RNA激活后,激酶会自动磷酸化,并能催化翻译起始因子EIF2S1的磷酸化,从而抑制蛋白质合成的起始。 双标记RNA是在病毒感染过程中产生的。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 Ser/Thr蛋白激酶家族。 GCN2亚家族。 包含2个DRBM(双链RNA-binding)域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 在几个Ser和Thr残基上自动磷酸化。 Thr-451的自磷酸化依赖于Thr-446,并由dsRNA结合和二聚体刺激。 自磷酸化明显导致激酶活化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 双链RNA激活蛋白激酶; 抗体 E2AK2_人类抗体 eIF-2A蛋白激酶2抗体
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图片
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车道1、3和5: PKR敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 车道2、4和6: 野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 车道1和2: 在62 kDa时观察到来自目标的绿色信号-ab32506 车道3和车道4: 来自装载控制的红色信号- 约8245 在37 kDa时观察到 车道5和6: 合并(红色和绿色)信号 当使用PKR敲除样品时,ab32506显示出与PKR特异性反应。 对野生型和PKR基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32506和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/10000和1/2000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。 -
ab32506染色野生型HAP1细胞中的PKR(顶面板)和PKR敲除HAP1的细胞(底面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后将细胞与稀释度为1/400的ab32506一起孵育 ab7291型 以1ug/ml浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150117号 )2ug/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在4%甲醛固定的HAP1细胞(10分钟)中,在相同的测试条件下,该产品也发出阳性信号。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 1/20000稀释的抗-PKR抗体[Y117](ab32506) 车道1: MCF-7(人乳腺癌)全细胞裂解物 车道2: HEK293(人胚肾)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 62千帕 其他波段位于: 68千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 净化格式。 -
用免疫组织化学方法(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)对人肝癌组织切片中的PKR进行ab32506染色。 用多聚甲醛固定组织,在EDTA缓冲液中通过热介导回收抗原。 样品与一级抗体以1/100的稀释度孵育。 山羊抗兔IgG H&L(HRP) ab97051型 以1/500的稀释度作为二级抗体。 阴性对照1: PBS代替一级抗体。 -
用纯化的ab32506在1/20稀释度(10ug/ml)(红色)下标记PKR的MCF-7(人乳腺癌)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)(1/2000稀释)作为次级抗体。 使用兔单克隆IgG(黑色)作为同型对照,使用未与一级抗体和二级抗体(蓝色)孵育的细胞作为未标记对照。 -
使用未纯化的ab32506在1/100稀释度下对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。 -
使用未纯化的ab32506在1/250稀释度下对HeLa细胞进行免疫荧光染色。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (25)
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