Enhancing Therapeutic Efficacy of Oncolytic Herpes Simplex Virus with MEK Inhibitor Trametinib in Some BRAF or KRAS-Mutated Colorectal or Lung Carcinoma Models

doi:10.3390/v13091758

.2021年9月3日；13(9):1758.

doi:10.3390/v13091758。

MEK抑制剂曲美替尼对BRAF或KRAS突变的大肠癌或肺癌模型提高溶瘤性单纯疱疹病毒的疗效

徐沙洲¹, 赵静（音译）¹, 简五章², 吴英林^三, 王磊（Lei Wang）^三, 陈晓青（Xiaoqing Chen）¹, 东美记⁴, 周国英（Grace Guoying Zhou）¹

附属机构

¹深圳国际生物医学研究所，深圳518110，中国。
²中国科学院深圳高新技术研究院生物医学与生物技术研究所能量代谢与生殖中心，深圳518055，中国。
^三广州医科大学基础医学院免疫学系，广州511436。
⁴复旦大学上海肿瘤中心和上海医学院肿瘤内科，上海200032，中国。

PMID： 34578339
预防性维修识别码： PMC8473197号
内政部： 10.3390/v13091758

MEK抑制剂曲美替尼对BRAF或KRAS突变的大肠癌或肺癌模型提高溶瘤性单纯疱疹病毒的疗效

徐沙洲等。病毒. 2021.

.2021年9月3日；13(9):1758.

doi:10.3390/v13091758。

作者

徐沙洲¹, 赵静（音译）¹, 简五章², 吴英林^三, 王磊（Lei Wang）^三, 陈晓青（Xiaoqing Chen）¹, 东美记⁴, 周国英（Grace Guoying Zhou）¹

附属机构

¹深圳国际生物医学研究所，深圳518110，中国。
²中国科学院深圳高级技术研究院生物医学与生物技术研究所能量代谢与繁殖中心，中国深圳518055。
^三广州医科大学基础医学院免疫学系，广州511436。
⁴复旦大学上海肿瘤中心和上海医学院肿瘤内科，上海200032，中国。

PMID： 34578339
预防性维修识别码： PMC8473197号
内政部： 10.3390/v13091758

摘要

溶瘤病毒（OV）作为一种有前途的治疗药物，可以选择性地感染和杀伤具有天然遗传或工程特性的肿瘤细胞。考虑到OVs单一治疗的局限性，联合治疗已被广泛探索。MEK抑制剂（MEKi）曲美替尼是FDA批准的激酶抑制剂，适用于治疗BRAF V600E或V600K突变的肿瘤。在本研究中，研究了oHSV和MEKi-Trametinib联合应用时的体外溶瘤活性和体内抗肿瘤治疗效果。我们发现：（1）MEKi曲美替尼治疗增强了BRAF V600E突变肿瘤细胞的oHSV溶瘤活性。（2） oHSV和MEKi曲美替尼联合治疗可通过下调BRAF V600E突变肿瘤细胞以及BRAF wt/KRAS突变肿瘤细胞中STAT1和PKR的表达或磷酸化来增强病毒复制。（3）当oHSV联合PD-1阻断和MEK抑制时，BRAF-wt/KRAS突变肿瘤模型在体内显示出显著的协同治疗效果。总之，这些数据为溶瘤病毒、MEK抑制和BRAF或KRAS突变肿瘤检查点阻断联合治疗的临床开发提供了一些新的见解。

关键词：布拉夫；KRAS；MEKi曲美替尼；抗肿瘤；oHSV公司。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明，该研究是在没有任何可能被解释为潜在利益冲突的商业或金融关系的情况下进行的。

数字

图1
MEK抑制剂（MEKi）曲美替尼治疗促进了BRAF V600E突变肿瘤细胞中oHSV的复制和肿瘤细胞的杀伤。(A类)用15 nM的曲美替尼（MEKi）预处理Caco-2、Widr和HT29细胞2 h，然后用0.01 PFU/cell的T1012G感染。分别在感染后48小时和72小时采集受感染的细胞颗粒。在三次冷冻-解冻循环后，通过常规的Vero细胞斑块试验测定滴定值。(B类)使用CCK8分析评估肿瘤细胞杀伤活性。对Caco-2、Widr和HT29细胞进行模拟处理或用15 nM的曲美替尼（MEKi）预处理2 h，然后在指定的MOI或仅用MEKi处理的情况下用T1012G感染。感染后48 h，用CCK8法（平均值±SD）测定感染细胞的细胞活力。试验一式三份。N.S.（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05.

图2
在BRAF突变癌细胞中结合oHSV和MEKi时下调STAT1和PKR磷酸化。(A类)用0.25μM曲美替尼（MEKi）预处理Caco-2、Widr和HT29细胞2 h，然后用0.1 PFU/cell T1012G模拟感染或感染。分别在感染后24小时收集细胞颗粒，并通过Western blotting分析裂解产物中的指示蛋白质。(B类–**G公司**). 定量pERK、ERK、pSTAT1、STAT1，pPKR和PKR的蛋白质水平。N.S.（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05, **第页< 0.01.

图3
siRNA对Caco-2、Widr和HT29细胞STAT1的敲除(A类)用100 nM STAT1 siRNA或非靶siRNA（siNT）转染Caco-2、Widr和HT29细胞。转染后72小时收集细胞。蛋白质在10%变性凝胶中电泳分离，并与指示抗体反应。面板(B类–F类)当siRNA.N.S.敲除STAT1时，定量Caco-2、Widr和HT29细胞中STAT1、pSTAT1，ERK、pERK和PKR的蛋白水平（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05, **第页< 0.01.

图4
MEKi治疗增加了KRAS突变癌细胞中oHSV病毒的产量。4T1型(A类)，盘02(B类)，有限责任公司(C类)和CT26(D类)用0.25μM的曲美替尼（MEKi）预处理细胞2小时，然后用0.1PFU/细胞T3855感染。分别在感染后24小时和48小时采集含病毒样本。此外，在三次冷冻-解冻循环后，通过常规的Vero细胞斑块试验测量滴定。N.S.（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05, ***第页< 0.001.

图5
MEKi处理的KRAS突变癌细胞中STAT1和PKR表达降低。将4T1和CT26细胞模拟处理或用0.25μM曲美替尼（MEKi）预处理2 h，然后模拟感染或用0.1 PFU/细胞T1012G或T3855感染。分别在感染后24小时采集细胞颗粒。提取总RNA，并将0.5μg RNA反向转录到cDNA，如材料和方法中所述。PKR和STAT1 mRNA相对于18S rRNA进行定量和标准化，并显示为与模拟治疗和感染细胞的mRNA相比的倍数变化（面板(A类–D类)). 采用相同的处理方法，收集细胞颗粒，在10%变性凝胶中电泳分离蛋白质，并与指示的抗体反应（面板(E类)). 4T1和CT26细胞中pERK蛋白水平的定量（面板(F类)). N.S.（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05, **第页< 0.01.

图6
MEKi-Trametinib和oHSV T3855联合治疗增强了LLC和CT26肿瘤模型的抗肿瘤治疗活性。4T1（面板(A类))或CT26（面板(C类))将肿瘤细胞分别注入Balb/c小鼠的右侧。LLC（小组(B类))将肿瘤细胞皮下注射到C57BL/6小鼠的右侧。不同肿瘤模型平均80 mm^三(n个=每组8个）通过肿瘤内注射PBS或T3855（1×10⁷4T1或LLC的PFU/动物；5 × 10⁶第1天、第8天、第15天和第22天服用PFU/用于CT26的动物，从第1天到第14天口服MEKi（曲美替尼；1 mg/kg）或媒剂。每组8只动物的肿瘤体积显示为平均值±SEM。彻底根除肿瘤（小组(D类))在实验结束时进行了总结。N.S.（不显著）；第页> 0.05, *第页< 0.05, **第页< 0.01.

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

溶瘤HSV治疗增加了曲美替尼对脑肿瘤的接触，并使其在体内致敏。
Yoo JY、Swanner J、Otani Y、Nair M、Park F、Banasavadi-Siddegowda Y、Liu J、Jaime-Ramirez AC、Hong B、Gen F、Guo D、Bystry D、Phelphs M、Quadri H、Lee TJ、Kaur B。 Yoo JY等人。神经肿瘤学。2019年9月6日；21(9):1131-1140. doi:10.1093/neuonc/noz079。神经肿瘤学。2019. PMID：31063549 免费PMC文章。
BRAF/MEK联合阻断在BRAF-野生型临床前肿瘤模型中的治疗潜力。
Del Curatolo A、Conciatori F、Cesta Incani U、Bazzicheto C、Falcone I、Corbo V、D’Agosto S、Eramo A、Sette G、Sperduti I、De Luca T、Marabese M、Shirasawa S、De Maria R、Scarpa A、Broggini M、Del Bufalo D、Cognetti F、Milella M、Ciuffreda L。 Del Curatolo A等人。《实验临床癌症研究杂志》2018年7月9日；37(1):140. doi:10.1186/s13046-018-0820-5。 2018年实验临床癌症研究杂志。 PMID：29986755 免费PMC文章。
BRAF公司^V600E型突变：结肠神经内分泌癌的一个有希望的靶点。
Dizdar L、Werner TA、Drusenheimer JC、Möhlendick B、Raba K、Boeck I、Anlauf M、Schott M、Göring W、Esposito I、Stoecklein NH、Knoefel WT、Krieg A。 Dizdar L等人。国际癌症杂志。2019年3月15日；144(6):1379-1390. doi:10.1002/ijc.31828。Epub 2018年10月30日。国际癌症杂志。2019. PMID：30144031
曲美替尼通过灭活蛋白激酶途径抑制非小细胞肺癌突变的治疗潜力。
Jeanson A、Boyer A、Greillier L、Tomasini P、Barlesi F。 Jeanson A等人。抗癌治疗专家评审。2019年1月；19(1):11-17. doi:10.1080/14737140.2019.1554440。Epub 2018年12月4日。抗癌治疗专家评审。2019. PMID：30513023 审查。
Dabrafenib和Trametinib对一例pD594G突变的鳞癌患者的疗效BRAF公司和p.R461*英寸NF1型基因-病例报告及文献复习。
Grenda A、Krawczyk P、Targowska-Duda KM、Kieszko R、Pa she nik I、Milanowski J。格伦达A等人。国际分子科学杂志。2023年1月7日；24(2):1195. doi:10.3390/ijms24021195。国际分子科学杂志。2023 PMID：36674722 免费PMC文章。审查。

查看所有类似文章

引用人

复制能力强和复制缺陷型单纯疱疹病毒溶瘤活性的比较。
Lindner G、Walter A、Magnus CL、Rosenhammer K、Holobrodko B、Koch V、Hirsch S、Grossmann L、Li S、Knipe DM、DeLuca N、Schuler Thurner B、Gross S、Schwertner B、Toelge M、Rohrhofer A、Stöckl S、Bauer RJ、Knoll G、Ehrenschwender M、Haferkamp S、Schmidt B、Schuster P。 Lindner G等人。免疫学。2024年6月；172(2):279-294. doi:10.1111/imm.13775。Epub 2024年3月5日。免疫学。2024 PMID：38444199
联合免疫治疗方法在胃肠道肿瘤中的临床应用：基于病例的综述。
Eralp Y，Ates U。 Eralp Y等人。疫苗（巴塞尔）。2023年9月29日；11(10):1545. doi:10.3390/疫苗11101545。疫苗（巴塞尔）。2023 PMID：37896948 免费PMC文章。审查。
塞内卡谷病毒及其生物标记物TEM8/ANTXR1在癌症治疗中的进化作用。
Corbett V、Hallenbeck P、Rychahou P、Chauhan A。 Corbett V等人。前Mol Biosci。2022年8月26日；9:930207. doi:10.3389/fmolb.2022.930207。eCollection 2022年。前Mol Biosci。2022 PMID：36090051 免费PMC文章。审查。
溶瘤病毒：胃肠道恶性肿瘤的免疫治疗药物。
李Q，奥杜罗PK，郭R，李R，冷L，孔X，王Q，杨L。李强等。前细胞感染微生物。2022年6月3日；12:921534. doi:10.3389/fcimb2022.921534。eCollection 2022年。前细胞感染微生物。2022 PMID：35719333 免费PMC文章。审查。
黑素瘤靶向激酶抑制剂的未来。
Caksa S、Baqai U、Aplin AE。 Caksa S等人。药物治疗学。2022年11月；239:108200. doi:10.1016/j.pharmthera.2022.108200。Epub 2022年5月2日。药物治疗学。2022 PMID：35513054 免费PMC文章。审查。

工具书类

1. Chiu M.、Armstrong E.J.L.、Jennings V.、Foo S.、Crespo Rodriguez E.、Bozhanova G.、Patin E.C.、McLaughlin M.、Mansfield D.、Baker G.等人。溶瘤病毒和免疫检查点抑制剂的联合治疗。专家操作。生物疗法。2020;20:635–652. doi:10.1080/14712598.2020.1729351。-内政部-公共医学
1. 郑明，黄杰，童安，杨华。肿瘤治疗中的溶瘤病毒：障碍和最新进展。摩尔-热。Oncolytics公司。2019;15:234–247. doi:10.1016/j.omto.2019.10.007。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. 蓝琦，夏S.，王琦，徐伟，黄H.，江S.，卢L.溶瘤病毒治疗的发展：从基因改造到联合治疗。前面。Med.2020；14:160–184. doi:10.1007/s11684-020-0750-4。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学
1. Gilchrist V.H.，Jémus-Gonzalez E.，Said A.，Alain T.激酶抑制剂与病毒溶瘤：揭开药物病毒治疗癌症的方法。细胞因子生长因子修订版2020；第56:83–93页。doi:10.1016/j.cytogfr.2020.07.008。-内政部-公共医学
1. 郭瑜，潘伟，刘珊，沈姿，徐瑜，胡丽萍ERK/MAPK信号通路与肿瘤发生（综述）Exp-Ther。2020年地中海；19:1997–2007. doi:10.3892/etm.2020.8454。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Chiu M.、Armstrong E.J.L.、Jennings V.、Foo S.、Crespo Rodriguez E.、Bozhanova G.、Patin E.C.、McLaughlin M.、Mansfield D.、Baker G.等人。溶瘤病毒和免疫检查点抑制剂的联合治疗。专家操作。生物疗法。2020;20:635–652. doi:10.1080/14712598.2020.1729351。-内政部-公共医学

[2] Chiu M.、Armstrong E.J.L.、Jennings V.、Foo S.、Crespo Rodriguez E.、Bozhanova G.、Patin E.C.、McLaughlin M.、Mansfield D.、Baker G.等人。溶瘤病毒和免疫检查点抑制剂的联合治疗。专家操作。生物疗法。2020;20:635–652. doi:10.1080/14712598.2020.1729351。-内政部-公共医学

[3] 郑明，黄杰，童安，杨华。肿瘤治疗中的溶瘤病毒：障碍和最新进展。摩尔-热。Oncolytics公司。2019;15:234–247. doi:10.1016/j.omto.2019.10.007。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[4] 郑明，黄杰，童安，杨华。肿瘤治疗中的溶瘤病毒：障碍和最新进展。摩尔-热。Oncolytics公司。2019;15:234–247. doi:10.1016/j.omto.2019.10.007。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[5] 蓝琦，夏S.，王琦，徐伟，黄H.，江S.，卢L.溶瘤病毒治疗的发展：从基因改造到联合治疗。前面。Med.2020；14:160–184. doi:10.1007/s11684-020-0750-4。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[6] 蓝琦，夏S.，王琦，徐伟，黄H.，江S.，卢L.溶瘤病毒治疗的发展：从基因改造到联合治疗。前面。Med.2020；14:160–184. doi:10.1007/s11684-020-0750-4。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[7] Gilchrist V.H.，Jémus-Gonzalez E.，Said A.，Alain T.激酶抑制剂与病毒溶瘤：揭开药物病毒治疗癌症的方法。细胞因子生长因子修订版2020；第56:83–93页。doi:10.1016/j.cytogfr.2020.07.008。-内政部-公共医学

[8] Gilchrist V.H.，Jémus-Gonzalez E.，Said A.，Alain T.激酶抑制剂与病毒溶瘤：揭开药物病毒治疗癌症的方法。细胞因子生长因子修订版2020；第56:83–93页。doi:10.1016/j.cytogfr.2020.07.008。-内政部-公共医学

[9] 郭瑜，潘伟，刘珊，沈姿，徐瑜，胡丽萍ERK/MAPK信号通路与肿瘤发生（综述）Exp-Ther。2020年地中海；19:1997–2007. doi:10.3892/etm.2020.8454。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

[10] 郭瑜，潘伟，刘珊，沈姿，徐瑜，胡丽萍ERK/MAPK信号通路与肿瘤发生（综述）Exp-Ther。2020年地中海；19:1997–2007. doi:10.3892/etm.2020.8454。-内政部-项目管理咨询公司-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

MEK抑制剂曲美替尼对BRAF或KRAS突变的大肠癌或肺癌模型提高溶瘤性单纯疱疹病毒的疗效

附属机构

MEK抑制剂曲美替尼对BRAF或KRAS突变的大肠癌或肺癌模型提高溶瘤性单纯疱疹病毒的疗效

作者

附属机构

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

医疗

研究材料

其他

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

医疗

研究材料

其他