主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR23101-103]至SQSTM1/p62 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR23101-103]至SQSTM1/p62 -
宿主 兔子 -
特异性 WB:这种抗体不适合用于大鼠组织。 我们建议在凝胶中每个通道加载40µg裂解物,以获得良好的信号。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:U-2 OS、HeLa、MEF、NIH/3T3、PC-12、C2C12和J774A.1裂解物。 ICC/IF:HeLa、U-2 OS和MEF细胞。 流式细胞术(内部):HeLa和MEF细胞。 IP:HeLa、U-2 OS和MEF细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR23101-103型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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备选版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 结合泛素并可能通过TNF-α、神经生长因子(NGF)和白细胞介素-1调节NFKB1活化的适配器蛋白。 可能在肌肉细胞的TIN/TTN下游信号传导中发挥作用。 可能通过泛素化调节信号级联。 调节TRAF6和CYLD之间相互作用的适配器(通过相似性)。 可能参与细胞分化、凋亡、免疫反应和K(+)通道的调节。 -
组织特异性 普遍表达。 -
疾病相关 SQSTM1的缺陷是骨Paget病(PDB)的原因[MIM:602080]。 PDB是一种影响轴向骨骼的代谢性骨病,其特征是由于破骨细胞激活而导致局部骨转换增加和紊乱。 该病的表现包括骨痛、畸形、病理性骨折、耳聋、神经并发症和骨肉瘤风险增加。 PDB是一种慢性病,影响2-3%的40岁以上人口。 -
序列相似性 包含1个OPR域。 包含1个UBA域。 包含1个ZZ型锌指。 -
结构域 UBA结构域特异性结合多泛素化底物的“Lys-63”连接的多泛素链。 调节与TRIM55的交互。 OPR结构域介导同齐聚反应以及与PRKCZ、PRKCI、MAP2K5和NBR1的相互作用。 ZZ型锌指介导与RIPK1的相互作用。 -
翻译后修饰 磷酸化。 可能被PRKCZ磷酸化(根据相似性)。 TTN体外磷酸化。 -
细胞定位 细胞质。 晚期内体。 核心。 沙科姆(根据相似性)。 在心肌中,位于肌节带(根据相似性)。 定位于晚期内体。 也可能局限于细胞核。 分别在阿尔茨海默病和帕金森病患者的神经纤维缠结和神经元路易体中积聚。 富含毛细胞星形细胞瘤的罗森塔尔纤维。 在肝细胞中,积聚在与酒精性肝炎、威尔逊病、印度儿童肝硬化相关的马洛里体和与肝细胞癌相关的透明体中。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8878 人类 Entrez基因: 18412 鼠标 Entrez基因: 113894 老鼠 Omim公司: 601530 人类 瑞士保护银行: 问题13501 人类 瑞士保护银行: 问题64337 鼠标 瑞士保护银行: O08623号 老鼠 尤尼金: 709030 人类
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别名 A170抗体 DMRV抗体 60kDa抗体EBI 3相关蛋白
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图片
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ab240635染色对照HeLa细胞(左侧)中的SQSTM1/p62(自噬体)和经100nM巴非霉素A1处理的HeLa电池中的SQRTM1/p62( ab120497型 )18小时(右侧面板)。 细胞用甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab240635以2 ug/ml和 约7291 (Tubulin)以1/1000稀释度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )2μg/ml(显示为绿色)和山羊抗小鼠IgG二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab240635染色用氯喹处理的野生型Hap1细胞和SQSTM1敲除Hap1细胞中的SQSTM1( 约142116 ,50μM,24小时)。 用100%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1μg/ml浓度的ab240635培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor ® 594) ( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-SQSTM1/p62抗体[EPR23101-103](ab240635) 车道1: 野生型U-2 OS细胞裂解物 车道2: SQSTM1敲除U-2 OS细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 47千Da Western blot显示ab240635与野生型U-2 OS细胞中的SQSTM1反应,在SQSTM2敲除细胞系中观察到信号丢失。 对野生型U-2OS和SQSTM1敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 将膜在TBST中的5%牛奶中封闭1小时,然后在4°C下以1/1000稀释度与ab240635孵育过夜。 在成像前,将斑点与山羊抗兔HRP二级抗体以0.2 ug/mL孵育。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
免疫细胞化学显示,ab240635在野生型U-2 OS细胞中与SQSTM1反应,在SQSTM2敲除细胞系中观察到信号丢失。 将野生型细胞和敲除细胞混合,并以1:1的比例在盖玻片上造粒。 用4%多聚甲醛固定细胞(15分钟),然后用0.1%Triton X-100渗透(10分钟),再用1/5000封闭。 然后用ab240635以1/500的稀释度在4°C下孵育细胞过夜,然后在室温下用山羊抗兔二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 555),0.5μg/ml。采集绿色(野生型)、红色(抗体染色)和远红外(敲除)通道。 显示了红色通道的典型灰度图像。 野生型和敲除型细胞分别用黄色和洋红色虚线勾勒。 所用镶嵌策略的示意图显示在右下面板上。 使用蔡司(LSM-880)获取图像。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
在U-2 OS细胞中免疫沉淀SQSTM1。 制备裂解液,并使用1.0μg预先偶联到prot的ab240635进行免疫沉淀。 A-琼脂糖珠。 样品经洗涤和处理后用于western blot 约56416 1/5000。 SM=10%原料; UB=10%未结合分数; IP=免疫沉淀。 这些数据由YCharOS Inc.提供,该公司是一家开放科学公司,其任务是对所有人类蛋白质的商用抗体试剂进行表征。 Abcam和YCharOS正在合作,通过使生命科学界能够更好地评估商用抗体,帮助解决再现性危机。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-SQSTM1/p62抗体[EPR23101-103](ab240635) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞),全细胞裂解物 车道2: MEF(小鼠胚胎成纤维细胞(永生化)),全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞),全细胞裂解物 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤),全细胞裂解物 车道5: C2C12(小鼠成肌细胞成肌细胞),全细胞裂解物 车道6: J774A.1(小鼠网状细胞肉瘤-单核-巨噬细胞),全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 47千Da 观察到的频带大小: 62千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 暴露时间。 车道1-4:3分钟; 车道5-6:92秒。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID:24086455)。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
合格证书
文献 (15)
耿X 等。 BDNF通过促进STAT3磷酸化和调节神经元自噬来缓解帕金森病。 细胞组织研究 393:455-470 (2023). 公共医学:37450039 沈东飞 等。 白藜芦醇通过调节SNHG1/miR-128-3p/SNCA轴促进自噬改善帕金森病神经元损伤。 脑科学 13:不适用(2023年)。 公共医学:37626481 Phadwal K公司 等。 二甲双胍通过促进自噬流量改善瓣膜间质细胞钙化。 科学代表 13:21435 (2023). 公共医学:38052777 贾姆 等。 在腹膜透析过程中抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活自噬并抑制腹膜纤维化。 前生理学 13:778479 (2022). 公共医学:35309056 周伟 等。 运动诱导的FNDC5/虹膜素通过激活自噬来保护髓核细胞对抗衰老和凋亡。 实验-分子-药物 54:1038-1048 (2022). 公共医学:35882943