主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 PML蛋白兔单克隆抗体[EPR16792] 适用人群:IP、ICC/IF、IHC-P、WB 敲除已验证 反应对象:人类
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相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR16792]至PML -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:293T、K562、HeLa和A549全细胞裂解物; 人胎脑、胎心和胎肾裂解物; HAP1。 IHC-P:人类乳腺和乳腺癌组织。 ICC/IF:K562细胞。 ICC/IF KO:Hap1细胞(Hap1-PML KO用作阴性细胞系)。 IP:K562全细胞提取物。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR16792 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 PML核小体的关键组成部分,通过促进目标蛋白的翻译后修饰、促进蛋白-蛋白接触或隔离蛋白来调节大量细胞过程。 具有肿瘤抑制功能。 在DNA损伤、FAS、TNF或干扰素的反应中,需要正常的caspase依赖性凋亡。 在转录调节、DNA损伤反应、DNA修复和染色质组织中发挥作用。 在维甲酸调节的过程、细胞分裂的调节、髓系前体细胞的终末分化和神经祖细胞的分化中发挥作用。 对微生物感染的正常免疫力所必需的。 在抗病毒反应中发挥作用。 在细胞质中,在TGFB1依赖性过程中发挥作用。 通过抑制其泛素化和蛋白酶体降解来调节p53/TP53水平。 通过“Ser-20”的磷酸化调节p53/TP53的激活。 DNA损伤后,在细胞核中序列MDM2,从而抑制p53/TP53的泛素化和降解。 通过隔离MTOR调节HIF1A的翻译,从而在新生血管和肿瘤血管形成中发挥作用。 调节RB1磷酸化和活性。 胚胎发育期间大脑皮层正常发育所必需的。 可以在PML体内隔离疱疹病毒和水痘病毒蛋白,从而抑制感染性病毒颗粒的形成。 调节ITPR3的磷酸化,并在内质网钙稳态的调节中发挥作用(通过相似性)。 调节ELF4的转录活性。 特异性抑制PKM2四聚体形式的活性。 与SATB1一起参与MHC-I位点的局部染色质环重塑和基因表达调控。 通过抑制USP7介导的氘化作用调节PTEN的分区。 -
疾病相关 注:涉及PML的染色体畸变可能是急性早幼粒细胞白血病(APL)的病因。 带有RARA的易位t(15;17)(q21;q21)。 PML断点(A型和B型)位于交替剪接外显子的两侧。 -
序列相似性 包含2个B箱式锌指。 包含1个环形锌指。 -
结构域 通过其线圈域与PKM2相互作用。 通过RING型锌指结合砷。 -
翻译后修饰 泛素化; 由RNF4、SIAH1或SIAH2介导,导致随后的蛋白酶体降解。” RNF4的Lys-6'-、Lys-11'-、'Lys-48'-和'Lys-63'连接的多泛素化是多氨酰化依赖性的。 经历与“Lys-11”相关的sumoylation。 所有三个位点上的氨酰化反应都是核体形成所必需的。 Lys-160上的氨酰化是Lys-65上氨酰化的先决条件。 PML-RARA融合蛋白需要螺旋-螺旋结构域进行酰化。 通过SENP2和SENP6进行脱氨。 砷诱导PML和PML-RARA致癌融合蛋白多肿瘤化及其随后的RNF4依赖性泛素化和蛋白酶体降解,并用于治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)。 可能是通过ATR对DNA损伤进行磷酸化反应。 乙酰化可促进琥珀酰化并增强凋亡诱导。 -
细胞定位 细胞核>核质。 细胞质。 细胞核>PML体。 核仁>核仁。 内质网膜。 早期内体膜。 Sumoylated形式定位于PML核体。 B1盒和环形指也需要用于核定位。 缺乏核定位信号的异构体是细胞质。 DNA损伤后在细胞核中检测到。 通过与狂犬病病毒磷酸蛋白的相互作用而在细胞质中固定。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 急性早幼粒细胞白血病,抗体诱导剂 MYL抗体 Pml抗体
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图片
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ab179466染色野生型Hap1细胞中的PML(顶部面板)和PML敲除Hap1的细胞(底部面板)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab179466以1/500的稀释度培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在+4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-PML蛋白抗体[EPR16792](ab179466) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: PML敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 98千帕 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在110 kDa下观察到ab179466。 红色-加载控制 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A])在55kDa时观察到。 western blot显示ab179466与A549野生型细胞中的PML反应,在PML敲除细胞系中观察到信号丢失 约266980 (PML敲除细胞裂解物 ab257082号 ). 对野生型和PML敲除A549细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在用ab179466和 约7291 (小鼠抗α-微管蛋白[DM1A])在4°C下过夜,稀释度分别为1/1000和1/2000。 将印迹与山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-PML蛋白抗体[EPR16792](ab179466) 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: PML敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: 293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 98千帕 观察到的频带大小: 110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50-110 kDa下观察到ab179466。 红色-装载控制, 约8245 在37 kDa时观察到。 ab179466抗-PML蛋白抗体[EPR16792]被证明与野生型HeLa细胞中的PML蛋白特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约261811 (敲除细胞裂解物 ab257081号 )已使用。 对野生型和PML蛋白敲除样品进行SDS-PAGE。 ab179466和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以万分之一的比例稀释1小时。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-PML蛋白抗体[EPR16792](ab179466) 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: PML敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: HEK293全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 98千帕 观察到的频带大小: 50-110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50-110 kDa下观察到ab179466。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab179466被证明在野生型HAP1细胞中识别,因为在PML敲除细胞的预期MW时信号丢失。 在野生型和敲除型细胞中观察到额外的交叉反应带。 对野生型和PML敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab179466和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/1000和1/20000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性K562(人骨髓慢性粒细胞白血病细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/500稀释度下用ab179466标记PML蛋白,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )1/400稀释度的二级抗体(绿色)。 观察K562细胞系的细胞质和细胞核染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下:- -ve对照1-ab179466,稀释1/500,然后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500。 -ve控制2- 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/400。 -
所有车道: 1/20000稀释的抗-PML蛋白抗体[EPR16792](ab179466) 车道1: 293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: K562(人骨髓慢性粒细胞白血病细胞)全细胞裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: A549(人肺癌)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 98千帕 观察到的频带大小: 50-110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 ab179466识别12种亚型,显示为50kDa至110kDa的多条带。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗-PML蛋白抗体[EPR16792](ab179466) 车道1: 人胎脑裂解物 车道2: 人胎心裂解物 3号车道: 人胎肾裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 98千帕 观察到的频带大小: 50-110千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 ab179466识别12种亚型,显示为50kDa至110kDa的多条带。 -
石蜡包埋人乳腺组织标记PML蛋白的免疫组织化学分析,ab179466以1/2000稀释,然后用预先稀释的HRP聚合物标记兔/鼠IgG。 观察了人乳腺组织上皮细胞的细胞核染色。 苏木精反染。 阴性对照:用PBS代替原抗体,继发抗体是兔/小鼠IgG的HRP预稀释聚合物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
石蜡包埋人乳腺癌组织标记PML蛋白的免疫组织化学分析,ab179466以1/2000稀释,然后用预先稀释的HRP聚合物检测兔/鼠IgG。 苏木精反染。 乳腺癌细胞失去表达。 参考文献:Gurieri C等人。多种组织学来源的人类癌症中肿瘤抑制因子PML的丢失。 《国家癌症研究所杂志》96:269–279(2004)。 阴性对照:用PBS代替原抗体,继发抗体是兔/小鼠IgG的HRP预稀释聚合物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
用ab179466在1/70稀释液中从1mg K562(人骨髓慢性粒细胞白血病细胞)全细胞提取物中免疫沉淀PML蛋白。 用抗体179466以1/1000稀释度从免疫沉淀物中进行蛋白质印迹。 抗抗体IgG(HRP)是针对非还原型IgG的,以1/1500稀释度作为二级抗体。 通道1:K562全细胞提取物。 通道2:PBS代替K562全细胞提取物。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 ab179466识别12种亚型,显示为50kDa至110kDa的多条带。
数据表及文件
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合格证书
文献 (11)
Locatelli M公司 等。 HIRA支持感染肝细胞中乙型肝炎病毒微染色体的建立和转录活性。 细胞分子胃肠肝素 14:527-551 (2022). 公共医学:35643233 哈斯·德梅洛A 等。 硫化氢供体GYY4137在呼吸道合胞病毒感染中拯救NRF2激活。 抗氧化剂(巴塞尔) 11:不适用(2022年)。 公共医学:35883901 拉瓦特P 等。 应激诱导的NELF核浓缩导致转录下调。 分子电池 81:1013-1026.e11(2021)。 公共医学:33548202 赖斯(Lai S) 等。 病毒聚合酶加工因子的位点特异性SUMO化:一种定位ND10亚核结构域的方法,用于限制和自我控制疱疹病毒的繁殖。 毒力 12:2883-2901 (2021). 公共医学:34747321 张磊 等。 TiPARP形成核浓缩物以降解HIF-1a并抑制肿瘤发生。 美国国家科学院程序 117:13447-13456 (2020). 公共医学:32482854