主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR2029Y]到LEF1-BSA和无叠氮化合物 适用于:IP、ICC/IF、IHC-P、WB、Flow Cyt(Intra) 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR2029Y]至LEF1-无BSA和叠氮化物 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:Jurkat细胞裂解物。 IHC-P:人类扁桃体组织。 流式细胞仪(内部):Jurkat细胞
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常规说明 ab215999是无载波版本的 公元137872年 . 我们的 无载体 抗体通常以仅PBS的制剂提供,经纯化且不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高了灵敏度和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.2 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR2029Y公司 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 参与Wnt信号通路。 在存在CTNNB1和EP300的情况下激活目标基因的转录。 可能在毛细胞分化和毛囊形态发生中起作用。 TLE1、TLE2、TLE3和TLE4抑制LEF1和CTNNB1介导的反式激活。 调节T细胞受体α增强子功能。 以序列特定的方式结合DNA。 PIAG通过LEF1拮抗Wnt依赖性和Wnt非依赖性激活(通过相似性)。 异构体3缺乏CTNNB1相互作用结构域,可能是Wnt信号传导的拮抗剂。 异构体5转录激活纤维连接蛋白启动子,以CTNNB1诱导的依赖方式结合并抑制E-cadherin启动子的转录,并参与减少胰腺癌细胞的细胞聚集和增加细胞迁移。 Isoform 1转录激活MYC和CCND1的表达,并增强胰腺癌细胞的增殖。 -
组织特异性 在胸腺中检测到。 在正常结肠中未检测到,但在结肠癌活检和结肠癌细胞系中高度表达。 在几种胰腺肿瘤中表达,在正常胰腺组织中弱表达。 在几个胰腺细胞系中检测到等位基因1和5。 -
序列相似性 属于TCF/LEF家族。 包含1个HMG盒DNA-绑定域。 -
结构域 富含脯氨酸和酸性区域与RNA聚合酶II转录因子的激活功能有关。 -
细胞定位 核心。 PIASG结合后在核内发现。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 51176 人类 Entrez基因: 16842 鼠标 Entrez基因: 161452 老鼠 Omim公司: 153245 人类 瑞士保护银行: Q9UJU2号机组 人类 瑞士保护银行: 第27782页 鼠标 瑞士保护银行: 问题9QXN1 老鼠 尤尼金: 726506 人类
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别名 DKFZp586H0919抗体 FLJ46390抗体 LEF 1抗体
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图片
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该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元137872年 ). 流式细胞术重叠直方图显示左Jurkat阳性细胞和右阴性HeLa染色 公元137872年 (红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后再接种抗体( 公元137872年 )(1个10 6 在22°C下,以0.2μg/ml(1/11500)的浓度在100μl中放置30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体(黑线)为重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照,使用的浓度和条件与主要抗体相同。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 该抗体在使用4%甲醛(10分钟)/在相同条件下使用0.1% PBS-Triton X-100渗透15分钟的Jurkat Fixed中发出阳性信号。 -
所有车道: 抗-LEF1抗体[EPR2029Y]( 公元137872年 )稀释度为1/1000 车道1: 40µg的野生型Jurkat细胞裂解物 车道2: 40µg Lef1敲除Jurkat细胞裂解液 3号车道: 20µg的Jurkat细胞裂解液 在还原条件下进行。 预测波段大小: 44千帕 观察到的频带大小: 40千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-LEF1抗体[EPR2029Y]在1/1000稀释度下染色,以黑色显示; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 公元137872年 显示与LEF1特异结合。 在野生型Jurkat细胞裂解液中观察到40/53 kDa的条带,在Lef1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约274898 (敲除细胞裂解物 约274956 ). 为了生成此图像,对野生型和Lef1敲除Jurkat细胞裂解物进行了分析。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 斑点在TBS-T中清洗四次,在室温下与二级抗体孵育1小时,在用Optiblot(ECL试剂)显影之前再次清洗四次 约133456 )用4分钟曝光时间成像。 使用的二级抗体是HRP结合的山羊抗兔(H+L)和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元137872年 ). -
纯化Jurkat(人外周血T细胞白血病细胞系)细胞的免疫荧光染色 公元137872年 以1/500的工作稀释度,用DAPI进行反染色。 微管蛋白用小鼠抗微管蛋白以1/1000的稀释度染色( 约7291 )和Alexa Fluor ® 594羊用1/500稀释液抗鼠( ab150120型 ) . 二级抗体是 约150077 Alexa Fluor公司 ® 488羊抗兔药,稀释比例为1/500。 细胞固定在4%PFA中,并使用0.1%Triton X 100进行渗透。 阴性对照显示在底部中间和右侧面板中-对于第一个阴性对照,纯化 公元137872年 以1/200的稀释度使用,然后使用Alexa Fluor ® 555羊抗鼠抗体,稀释度为1/500,用于第二阴性对照鼠一级抗体( 约7291 )和抗兔二级抗体( 约15007 )使用了。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元137872年 ). -
车道1(输入): Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物,10μg 车道2(+): Jurkat全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )而不是 公元137872年 在Jurkat全细胞裂解液中 公元137872年 Jurkat全细胞裂解液中的免疫沉淀LEF1。 对于western blotting,使用的主要抗体是 公元137872年 稀释度为1:1000。 阿布131366 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 ),在1/10000稀释度下用于检测。 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 曝光时间:3分钟 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元137872年 ). -
该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 公元137872年 ). 使用组织芯片对抗-LEF1抗体[EPR2029Y]进行染色 公元137872年 免疫组化分析。 本表详细概述了每种测试样品类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色。 这些切片是用 公元137872年 在室温下以1:2000稀释度(1.05μg/ml)使用30分钟,然后使用现成的兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB二级抗体( 约209101 ). 反染色为苏木精。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。
数据表及文件
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数据表下载
合格证书
文献 (3)
李杰 等。 Wnt10a通过激活经典Wnt/ß-catenin信号传导在结直肠癌中的致癌作用。 Oncol Lett公司 17:3657-3664 (2019). 公共医学:30881490 斯科科娃J 等。 HCLS1、HAX1和LEF-1蛋白之间的相互作用对于G-CSF触发的粒细胞生成至关重要。 自然·医学 18:1550-9 (2012). 公共医学:23001182 坦登B 等。 淋巴增强结合因子1的核过度表达可识别小B细胞淋巴瘤中的慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤。 病态 24:1433-43 (2011). 国际控股公司 ; 人类 . 公共医学:21685909