主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗IGF1受体-BSA和无氮化物的兔单克隆[EPR19322] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、ICC/IF、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR19322]对IGF1受体-BSA和无氮化物 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 -
阳性对照 WB:C2C12、HeLa、293、MCF7、C6和NIH/3T3全细胞裂解物; 小鼠脑和脾裂解物; 大鼠脑裂解物。 ICC/IF:C2C12和C6细胞。 流式细胞仪(内部):C2C12细胞。 IP:C2C12全细胞裂解物。
-
常规说明 ab232380是无载波版本的 约182408 . 我们的 无承运人 抗体通常以只含PBS的配方提供,纯化后不含BSA、叠氮化钠和甘油。 无载体缓冲液和高浓度可提高共轭效率。 这种共轭-成熟格式设计用于荧光色素、金属同位素、寡核苷酸和酶,使其成为抗体标记、功能和基于细胞的分析、基于流的分析(例如,质谱仪)和多重成像应用的理想选择。 使用我们的 接合试剂盒 抗体结合物在20分钟内即可使用,动手时间<1分钟,抗体回收率100%:可用于荧光染料、HRP、生物素和金。 此产品与Maxpar兼容 ® Fluidigm的抗体标记试剂盒,无需抗体制备。 Maxpar公司 ® 是Fluidigm Canada Inc.的商标。 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次间一致性和再现性 -提高敏感性和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 .
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 储存于+4°C。 请勿冻结。 -
存储溶液 pH值:7.2 成分:PBS -
无载体 是 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR19322 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
偶联试剂盒 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 调节胰岛素样生长因子1(IGF1)作用的受体酪氨酸激酶。 高亲和力结合IGF1,低亲和力结合胰岛素(INS)和IGF2。 激活的IGF1R参与细胞生长和生存控制。 IGF1R对肿瘤转化和恶性细胞存活至关重要。 配体结合激活受体激酶,导致受体自身磷酸化和多种底物的酪氨酸磷酸化,这些底物作为信号衔接蛋白发挥作用,包括胰岛素受体底物(IRS1/2)、Shc和14-3-3蛋白。 IRS蛋白的磷酸化导致两条主要信号通路的激活:PI3K-AKT/PKB通路和Ras-MAPK通路。 激活MAPK通路的结果是增加细胞增殖,而激活PI3K通路则抑制细胞凋亡并刺激蛋白质合成。 磷酸化IRS1可以激活PI3K(PIK3R1)的85kDa调节亚单位,从而激活包括蛋白AKT/PKB在内的几个下游底物。 AKT磷酸化反过来通过mTOR激活促进蛋白质合成,并通过BAD的磷酸化和失活触发IGFIR的抗凋亡作用。与PI3K驱动的信号传递类似,磷酸化IRS1或Shc对Grb2/SOS的招募导致Ras的招募和Ras-MAPK通路的激活。 除了这两条主要的信号通路外,IGF1R信号也通过Janus激酶/信号转导子和转录激活子途径(JAK/STAT)传递。 JAK蛋白的磷酸化可导致信号转导物和转录激活物(STAT)蛋白的磷酸盐化/活化。 特别是STAT3的激活,可能对IGF1R的转化活性至关重要。 JAK/STAT通路激活基因转录,可能与转化活性有关。 JNK激酶也可以被IGF1R激活。 IGF1通过磷酸化和抑制MAP3K5/ASK1对JNK活化发挥抑制作用,这与IGF1R直接相关。 当存在于带有INSR的杂交受体中时,与IGF1结合。 PubMed:12138094表明,由IGF1R和INSR亚型Long组成的杂交受体被IGF1高亲和力激活,而IGF2低亲和力,胰岛素不显著激活,由IGF1、IGF2和胰岛素激活由IGF1R和INSR-亚型Short组成的杂交接受器。 相比之下,PubMed:16831875显示,由IGF1R和INSR亚型Long组成的杂交受体以及由IGF1R和INSR-亚型Short组成的混合受体具有相似的结合特性,两者都与IGF1结合,对胰岛素的亲和力较低。 -
组织特异性 在肌肉、心脏、肾脏、脂肪组织、骨骼肌、肝癌、成纤维细胞、脾脏和胎盘(蛋白质水平)中发现INSR的杂交受体。 在多种组织中表达。 在肿瘤中过度表达,包括黑色素瘤、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌和肾癌。 -
疾病相关 胰岛素样生长因子1抵抗 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 酪氨酸蛋白激酶家族。 胰岛素受体亚家族。 包含4个纤维连接蛋白III型结构域。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 酪氨酸残基上的自磷酸化对配体结合的反应。 自身磷酸化发生在反式中,即二聚体受体的一个亚基磷酸化另一个亚单位上的酪氨酸残基。 自动磷酸化以连续的方式发生; Tyr-1165首先主要被磷酸化,然后是Tyr-1161和Tyr-1166的磷酸化。 虽然每一次磷酸化都会增加激酶活性,但激酶激活环中的所有三个酪氨酸残基(Tyr-1165、Tyr-161和Tyr-1186)都必须磷酸化才能获得最佳活性。 可在额外的酪氨酸残基处进行自磷酸化(体外)。 自磷酸化之后是膜旁酪氨酸和C末端丝氨酸的磷酸化。 IRS1-和SHC1-结合需要Tyr-980的磷酸化。 GSK-3β对Ser-1278的磷酸化抑制激酶活性并促进细胞表面表达,这需要在Ser-1282处启动磷酸化。 通过PTPN1脱磷。 在Lys-1168和Lys-1171处通过“Lys-48”和“Lys-29”链接进行多泛素化,促进受体内吞并随后被蛋白酶体降解。 泛素化由预先存在的磷酸化促进。 用SUMO1进行Sumoylated。 受调节膜内蛋白水解(RIP)控制。 经历金属蛋白酶依赖的构成性外结构域脱落,产生一个膜锚定的52 kDa C末端片段,该片段被早老蛋白γ-分泌酶进一步处理,产生细胞内50 kDa片段。 -
细胞定位 细胞膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3480 人类 Entrez基因: 16001 鼠标 Entrez基因: 25718 老鼠 Omim公司: 147370 人类 瑞士保护银行: P08069号 人类 瑞士保护银行: 问题60751 鼠标 瑞士保护银行: 第24062页 老鼠 尤尼金: 643120 人类
查看所有内容 -
别名 CD221抗体 CD221抗原抗体 IGF 1受体抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗IGF1受体抗体[EPR19322]( 约182408 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HCT 116细胞裂解物 车道2: IGF1R敲除HCT 116细胞裂解物 3号车道: 野生型MCF7 约290784 细胞裂解产物 车道4: IGF1R淘汰赛MCF7 约287507 细胞裂解产物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 154千Da 观察到的频带大小: 82千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ). 抗IGF1R抗体[EPR19322]( 约182408 )以1/1000稀释度染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负荷控制染色,以红色显示。在Western blot中, 约182408 显示与IGF1R特异结合。 在野生型HCT 116细胞裂解液中在82 kDa处观察到一条带,在IGF1R敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和IGF1R敲除HCT 116细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 抗IGF1受体抗体[EPR19322]( 约182408 )稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: IGF1R敲除HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 154千Da 观察到的频带大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ). 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约182408 在100 kDa时观察到。 红色-抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在37 kDa时观察到。 约182408 western blot显示与野生型HeLa细胞中的IGF1受体反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约264801 (敲除细胞裂解物 约256951 )已使用。 对野生型HeLa和IGF1R敲除HeLa细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 将膜在室温下用3%脱脂奶粉在0.1%TBST中封闭1小时。 约182408 和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在4°C下过夜,稀释率分别为1/1000和1/20000。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
标记IGF1受体的4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性C2C12(小鼠成肌细胞系)细胞的免疫荧光分析 约182408 稀释1/1000,然后使用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示C2C12细胞系上的膜和细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]检测管蛋白-负载控制( 约7291 )稀释1/1000,羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594)预吸附( ab150120型 )稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: -ve控件1: 约182408 稀释1/1000,然后 ab150120型 以1/1000稀释。 -ve控制2: 约7291 稀释1/1000,然后 约150077 以1/1000稀释。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ). -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(40µg) 车道2: IGF1R敲除HAP1全细胞裂解物(40µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(40µg) 车道1-3 合并信号(红色和绿色)。 绿色- 约182408 在100 kDa时观察到。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 约182408 研究表明,在野生型HAP1细胞中特异性识别IGF1R以及其他交叉反应带。 检测IGF1R敲除样品时未观察到条带。 野生型和IGF1R基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab182408和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/2000稀释度和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ). -
标记IGF1受体的4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性C6(大鼠胶质瘤细胞系)细胞的免疫荧光分析 约182408 稀释1/1000,然后使用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488) ( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共焦图像显示C6细胞系上的膜和细胞质染色。 细胞核计数器染色为DAPI(蓝色)。 用抗α-管蛋白抗体[DM1A]检测管蛋白-负载控制( 约7291 )稀释1/1000,羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor®594)预吸附( ab150120型 )稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下: -ve控件1: 约182408 稀释1/1000,然后 ab150120型 稀释度为1/1000。 -ve控制2: 约7291 稀释1/1000,然后 约150077 以1/1000稀释。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ). -
从1mg C2C12(小鼠成肌细胞系)全细胞裂解液中免疫沉淀IGF1受体 约182408 1/50稀释。 使用 约182408 以1/1000稀释。 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 ),在1/10000稀释度下用于检测。 通道1:C2C12全细胞裂解液,10µg(输入)。 车道2: 约182408 IP在C2C12全细胞裂解液中。 通道3:兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照( 约172730 )而不是 约182408 在C2C12全细胞裂解液中。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:3秒。 该数据是在含有PBS、BSA、甘油和叠氮化钠的不同缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约182408 ).
实验方案
数据表及文件
-
数据表下载