主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆[EP1710Y]至HSF1-ChIP级 适用于:Flow Cyt(Intra)、ChIP、WB、IP、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1710Y]至HSF1-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 -
免疫原 人HSF1 aa 450内的合成肽到C末端(C末端)。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:K562 HAP1和HeLa全细胞裂解物( 约150035 ). ICC/IF:MCF-7细胞。 流动Cyt(内部):HeLa细胞。 IHC-P:人类卵巢癌组织; 小鼠睾丸和结肠组织。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.21%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP1710Y系列 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 特异性结合热休克启动子元件(HSE)并激活转录的DNA结合蛋白。 在高等真核生物中,HSF不能与HSE结合,除非细胞受到热休克。 -
序列相似性 属于HSF家族。 -
结构域 9aaTAD基序是存在于大量酵母和动物转录因子中的反式激活域。 -
翻译后修饰 在多个丝氨酸残基上磷酸化,其中一个子集参与转录激活的应激相关调节。 组分磷酸化在常温下抑制转录活性。 特定残渣热冲击水平增加,HSF1反式激活活性增强。 Ser-307上的磷酸化解除了热应激时的活化,与Ser-303磷酸化结合似乎参与了热应激后的恢复。 CAMK2在体外对Ser-230进行磷酸化。 镉也增强了这个部位的磷酸化。 Ser-303上的磷酸化是HSF1 sumoylation的先决条件。 Ser-121上的磷酸化抑制反式激活并促进HSP90结合。 Thr-142上的磷酸化也介导热诱导的转录活性。 Ser-326上的磷酸化在HSF1转录活性的热激活中起着重要作用。 在热冲击下与SUMO1和SUMO2进行酰化反应。 热休克15分钟后发生热诱导的酰化反应,之后水平下降,4小时后水平恢复到对照水平。 氨酰化对HSE结合和转录活性均无影响。 Ser-303上的磷酸化是sumoylation的先决条件。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 正常生长期间的细胞质。 激活后,转移到核应激颗粒。 在核应激颗粒中用SUMO1进行结肠酸化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 热休克因子1抗体 热休克因子蛋白1抗体 热休克转录因子1抗体
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图片
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所有车道: 抗-HSF1抗体[EP1710Y]-ChIP等级(ab52757),稀释度为1/100000 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物 车道2: Hsf1敲除HAP1全细胞裂解物 3号车道: HeLa全细胞裂解物 车道4: K562全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 57千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在57 kDa下观察到ab52757。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab52757被证明与野生型HAP1细胞特异性反应,因为Hsf1敲除细胞中的信号丢失。 对野生型和Hsf1基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab52757和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/100000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
用1:250稀释(1.06μg/ml)纯化ab52757标记HSF1的人卵巢癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 热介导抗原检索使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
从热休克的HeLa细胞(42 o个 C 30分钟)。 细胞用EGS固定30分钟,然后用甲醛固定10分钟。 使用25µg染色质、5µg ab52757(红色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 将5µg兔正常IgG添加到珠子对照(灰色)中。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(sybr green方法)定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 * http://www.abcam.com/resources?keywords=X%20ChIP%20协议 -
用纯化ab52757在1:100稀释度下标记HSF1的MCF7(人乳腺癌上皮细胞)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 将细胞固定在4%的聚甲醛中,并用0.1%的tritonX-100渗透。 用Ab195889抗α-微管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594) 1:200. 约150077 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)作为二级抗体,稀释度为1:1000。 DAPI核复染。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
用纯化的ab52757在1/20稀释度(10µg/ml)(红色)下标记HSF1的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用80%甲醇固定,并用0.1%吐温-20渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)二级抗体以1/2000稀释度使用。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与第一抗体和第二抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
1/50000稀释(纯化)的抗-HSF1抗体[EP1710Y]-ChIP等级(ab52757)+15µg的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 80千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
抗-HSF1抗体[EP1710Y]-ChIP等级(ab52757),稀释度为1/100000(未净化)+HeLa细胞裂解液,浓度为10µg 次要 HRP-结合山羊抗兔IgG(稀释度为1/2000) 预测的带宽大小: 57千帕 观察到的频带大小: 85千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
ab52757染色野生型Hap1细胞中的HSF1(顶部面板)和HSF1敲除Hap1的细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab52757以1/250的稀释度培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在+4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
用1/1000的未纯化ab52757标记HSF1的MCF-7细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 控制:仅PBS。 核反染:DAPI。 -
重叠直方图显示未纯化ab52757染色的HeLa细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab52757,1/1000稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器收集>5000个事件的采集。 该抗体在用4%多聚甲醛(10分钟)固定/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的HeLa细胞中发出阳性信号。 -
使用1:100稀释度的未纯化ab52757对石蜡包埋的人类卵巢癌进行免疫组织化学染色。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (34)
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