主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 Ezrin质膜标记的兔单克隆抗体[EP886Y] 适用于:ICC/IF、Flow Cyt(Intra)、WB、IP、IHC-P 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 〔EP886Y〕到Ezrin-血浆膜标记 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 人Ezrin aa 450-550(C末端)内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1全细胞裂解物; HeLa和HCT116全细胞裂解物。 IHC-P:人类结肠癌、乳腺癌和膀胱癌。 ICC/IF:HeLa细胞流周期(内部):HeLa电池IP:HeLa-电池
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP886Y型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
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靶标
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功能 可能参与主要细胞骨架结构与质膜的连接。 在上皮细胞中,需要在顶端形成微绒毛和膜皱褶。 与PLEKHG6一起,是正常大胞饮症所必需的。 -
组织特异性 表达于大脑皮层、基底神经节、海马、垂体和视神经。 在脑干和间脑中弱表达。 额叶灰质比白质(蛋白质水平)表达更强。 肠上皮细胞微绒毛的成分。 在海马、额叶皮层、丘脑、海马旁皮层、杏仁核、脑岛和胼胝体的星形胶质细胞中优先表达。 在大多数研究组织的神经元中未检测到。 -
序列相似性 包含1个FERM域。 -
发展阶段 与成人大脑相比,婴儿大脑的浦肯野细胞层和部分分子层中检测到非常强的染色。 -
翻译后修饰 酪氨酸蛋白激酶磷酸化。 -
细胞定位 顶端细胞膜。 细胞投影。 细胞投射>微绒毛膜。 细胞投射>皱褶膜。 细胞质>细胞皮层。 细胞质>细胞骨架。 顶叶细胞顶膜的定位取决于与MPP5的相互作用。 定位于星形胶质细胞的细胞延伸和外周过程(通过相似性)。 Microvillar外周膜蛋白。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 Villin 2 ezrin抗体 CVIL抗体 CVL抗体
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图片
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车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: Ezrin敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(20µg) 车道4: HCT116全细胞裂解液(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在75kDa下观察到ab40839。 红色-装载控制, 约18058 ,在130 kDa下观察到。 ab40839在野生型HAP1细胞中与Ezrin特异性反应,因为Ezrin-敲除细胞中信号丢失。 对野生型和Ezrin基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab40839和 约18058 (小鼠抗Vinculin负荷控制)分别在4°C、1/5000稀释度和1/20000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
用1:250稀释度(3.28µg/ml)的纯化ab40839标记Ezrin的人乳腺癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 进行热介导抗原检索,使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 使用免疫组织探针一步HRP聚合物(即用即用)作为第二抗体。 阴性对照:PBS代替初级抗体。 苏木精用作副染色。 -
以1:500稀释度(1.6µg/ml)用纯化ab40839标记Ezrin的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 将细胞固定在4%的聚甲醛中,并用0.1%的tritonX-100渗透。 用Ab195889抗α-管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor®594)1:200(2.5µg/ml)对细胞进行复染。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 )以1:1000(2µg/ml)稀释度作为二级抗体。 DAPI核复染。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
所有车道: 抗-Ezrin抗体[EP886Y]-血浆膜标记物(ab40839),1/20000稀释(纯化) 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: HCT 116(人结直肠癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG(HRP)与人IgG在1/2000稀释度下具有最小交叉反应性 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
用1:250稀释度(3.28µg/ml)的纯化ab40839标记Ezrin的人膀胱癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 进行热介导抗原检索,使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)用作二级抗体。 阴性对照:PBS代替一抗。 苏木精用作副染色。 -
以1/800稀释度(1µg/ml)(红色)用纯化ab40839标记Ezrin的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488, 约150077 )2000年1月使用二级抗体。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与第一抗体和第二抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
叠加直方图显示用upurifiedab40839染色的SH-SY5Y细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab40839,1/1000稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H&L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器收集>5000个事件的采集。 该抗体在用4%多聚甲醛固定(10分钟)/用0.1%PBS-Tween渗透20分钟的SH-SY5Y细胞中发出阳性信号。 -
未纯化ab40839染色HeLa细胞的ICC/IF图像。 细胞被100%甲醇固定(5分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中培养1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体ab40839以1/100的稀释度在+4°C下孵育过夜。 第二抗体(绿色)为DyLight®488山羊抗兔抗体( 约96899 )以1/250稀释度使用IgG(H+L)1小时。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
抗-Ezrin抗体[EP886Y]-1/50000稀释(未净化)的质膜标记物(ab40839)+10µg的Hela细胞裂解物 预测的带宽大小: 69千帕 观察到的频带大小: 72千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
人类结肠癌组织中未纯化的ab40839,1:100稀释染色Ezrin。 -
使用未纯化ab40839对石蜡包埋的人肾癌组织进行荧光免疫组织化学分析。 绿色-锌红色-PI -
未纯化的ab40839在乳腺癌组织中呈阳性染色。 -
未纯化的ab40839在前列腺癌组织中呈阳性染色。 -
未纯化的ab40839在肝细胞癌组织中呈阳性染色。 -
未纯化的ab40839在正常肾组织中呈阳性染色。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (16)
李F 等。 聚ADP-核糖聚合酶1(PARP1)抑制通过增强ezrin磷酸化促进骨肉瘤的肺转移。 国际生物科学杂志 18:1238-1253 (2022). 公共医学:35173550 里根JL 等。 结肠癌干细胞中神经发育基因表达特征的鉴定揭示了EGR2在肿瘤发生中的作用。 i科学 25:104498 (2022). 公共医学:35720265 Clos-Sansalvador M公司 等。 永生间充质基质细胞衍生的细胞外囊泡中的N-聚糖对EV-细胞相互作用和内皮细胞的功能激活至关重要。 国际分子科学杂志 23:不适用(2022年)。 公共医学:36076936 金·J 等。 用于视网膜色素上皮细胞成熟的3D打印Bruch膜模拟物的开发。 国际分子科学杂志 22:不适用(2021年)。 公共医学:33499245 张C 等。 靶向POLE2通过调节Stanniocanc 1在肾细胞癌中产生新的易损性。 前电池开发生物 9:622344 (2021). 公共医学:33644060