主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 EHMT2/G9A-ChIP级兔单克隆抗体[EPR18894] 适用于:ChIP测序、WB、IHC-P、ICC/IF、IP、Flow Cyt(Intra)、ChIC/CUT和RUN序列 淘汰验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR18894]至EHMT2/G9A-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
完 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、HEK-293、Jurkat、HepG2、NCCIT、F9、Neuro-2a、LLC1、C6、RAW 264.7、PC-12和NIH/3T3全细胞裂解物。 人类胎儿心脏和胎儿肾脏裂解物。 IHC-P:人结肠、人胃腺癌、小鼠肝和大鼠肾组织。 国际商会/国际单项体育联合会:希拉。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。 IP:HeLa全细胞裂解物。 ChIP-seq:HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克康宁 单克隆 -
克隆编号 EPR18894标准 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 组蛋白甲基转移酶,特别是常染色质中组蛋白H3(分别为H3K9me1和H3K9 me2)的单酯和二甲酯“Lys-9”。 H3K9me通过向甲基化组蛋白招募HP1蛋白,代表表观遗传转录抑制的一个特定标记。 还介导组蛋白H3(H3K56me1)的“Lys-56”在G1期的单甲基化,从而促进组蛋白H4和PCNA之间的相互作用并调节DNA复制。 组蛋白H3(H3K27me)的弱甲基化物“Lys-27”。 DNA甲基化也需要组蛋白甲基转移酶活性,而DNA甲基化不需要组蛋白甲转移酶活性。这表明这两种活性独立发挥作用。 可能由不同的DNA结合蛋白如E2F6、MGA、MAX和/或DP1靶向组蛋白H3。 也可能甲基化组蛋白H1。 除了组蛋白甲基转移酶活性外,还甲基化非组蛋白:介导p53/TP53的“Lys-373”的二甲基化。 还甲基化CDYL、WIZ、ACIN1、DNMT1、HDAC1、ERCC6、KLF12及其本身。 -
组织特异性 在所有受检组织中均有表达,在胎肝、胸腺、淋巴结、脾脏和外周血白细胞中含量较高,而在骨髓中含量较低。 -
序列相似性 属于V类SAM结合甲基转移酶超家族。 组蛋白赖氨酸甲基转移酶家族。 Suvar3-9亚家族。 包含7个ANK重复。 包含1个postSET域。 包含1个预设置域。 包含1个SET域。 -
结构域 SET域调解与WIZ的交互。 ANK重复结合H3K9me1和H3K9 me2。 -
翻译后修饰 Lys-185甲基化; 自动甲基化。 -
细胞定位 核心。 染色体。 与常染色区域相关。 与异染色质无关。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 含锚蛋白重复序列的蛋白抗体 Bat 8抗体 Bat8抗体
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图片
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所有车道: 抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: EHMT2/G9A敲除HeLa细胞裂解物 3号车道: HEK-293细胞裂解物 车道4: HepG2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 132千帕 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在160 kDa时观察到ab185050。 红色-加载控制 约8245 在37kDa下观察到。 ab185050抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]在野生型HeLa细胞中与EHMT2/G9A特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265149 (敲除细胞裂解物 ab257080号 )已使用。 对野生型和EHMT2/G9A敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab185050和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,标记EHMT2/G9A,稀释度为1/1000,ab185050,然后是山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示HeLa细胞系上的核染色。 核染色为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释度为1/1000 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗小鼠二级),稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下:- -ve对照1:ab185050,稀释度为1/1000,然后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/1000。 -ve控制2: 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/1000。 -
从HeLa细胞制备染色质。 细胞用1%甲醛固定10分钟。 ChIP采用10 7 HeLa细胞和8µg ab185050[EPR18894]。 ChIP DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,深度为3000万读。 可以下载映射读取的其他屏幕截图 在这里 . -
所有车道: 抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: EHMT2/G9A敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: HEK293细胞裂解物 车道4: HepG2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 132千帕 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在160 kDa时观察到ab185050。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 当使用EHMT2/G9A敲除样品以及其他交叉反应带时,ab185050被证明能够识别EHMT2/G9A。 对野生型和EHMT2/G9A敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab185050和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/1000和1/10000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1h。 -
所有车道: 抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050),稀释度为1/1000 车道1: HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: Jurkat(来自外周血的人T细胞白血病细胞)全细胞裂解物 3号车道: HepG2(人肝癌)全细胞裂解物 车道4: NCCIT(人类多潜能胚胎癌)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 132千帕 观察到的频带大小: 160170千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 封闭/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID 16702210)。 -
抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050)(1/1000稀释)+人胎心裂解液(10µg) 次要 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/10000稀释度下的非还原型IgG 预测的带宽大小: 132千帕 观察到的频带大小: 160170千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID 16702210)。 -
抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050)(1/1000稀释)+人胎肾裂解物(10µg) 次要 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/10000稀释度下的非还原型IgG 预测的带宽大小: 132千帕 观察到的频带大小: 160170千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID 16702210)。 -
所有车道: 抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050),稀释度为1/1000 车道1: F9(小鼠胚胎-睾丸癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤细胞)全细胞裂解物 3号车道: LLC1(小鼠肺癌细胞系)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 132千帕 观察到的频带大小: 160170千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 5秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID 16702210)。 -
所有车道: 抗-EHMT2/G9A抗体[EPR18894]-ChIP等级(ab185050),稀释度为1/1000 车道1: C6(大鼠胶质瘤细胞)全细胞裂解物 车道2: RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞)全细胞裂解物 3号车道: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 车道4: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 预测的带宽大小: 132千Da 观察到的频带大小: 160170千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 8秒 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 观察到的表达谱/分子量与文献中描述的一致(PMID 16702210)。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性MCF7(人乳腺癌细胞系)细胞的免疫荧光分析,用ab185050在1/100稀释度下标记EHMT2/G9A,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )稀释度为1/1000的二级抗体(绿色)。 共聚焦图像显示MCF7细胞株上没有染色,因为MCF7的EHMT2/G9A表达水平很低。 核染色为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释度为1/1000 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/1000(红色)。 阴性对照如下:- -ve对照1:ab185050,1/70稀释,然后 ab150120型 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/1000。 -ve控制2: 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/1000,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/1000。 -
与兔单克隆IgG同型对照组相比,在1/150稀释度(红色)下用ab185050标记EHMT2/G9A的4%副甲醛固定HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析( 约172730 ; 黑色)和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞;蓝色)。 以羊抗兔IgG(FITC)为次级抗体,稀释度为1/150。
数据表及文件
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合格证书
文献 (26)
Claycombe-Larson KJ公司 等。 产后运动可保护C57Bl6/J小鼠的后代免受高脂肪饮食诱导的皮下脂肪细胞减少的影响。 坚果生物化学杂志 99:108853 (2022). 公共医学:34517093 Swaminathan J公司 等。 组蛋白甲基转移酶和脱甲基酶之间的交叉对话调节神经发生过程中的REST转录。 前Oncol 12:855167 (2022). 公共医学:35600406 邹杰 等。 乙醇通过G9a/GLP-表观遗传信号抑制成年海马神经发生,从而诱导炎症前细胞外囊泡的分泌。 前部免疫 13:866073 (2022). 公共医学:35634322 瓜提埃里岛A 等。 RNA解旋酶DDX5与EHMT2协同维持肺泡横纹肌肉瘤的生长。 单元格代表 40:111267 (2022). 公共医学:36044855 文森DA 等。 组蛋白H3K23通过甲基转移酶EHMT1/GLP和EHMT2/G9a的从头甲基化。 表观遗传学染色质 15:36 (2022). 公共医学:36411491