主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EP700Y]与E-Cadherin-细胞间连接标记 适用于:流式细胞周期(内部)、ICC/IF、mIHC、IHC-P、WB 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP700Y]至E Cadherin-细胞间连接标记 -
宿主 兔子 -
特异性 E-钙粘蛋白含有许多切割位点,这些切割位点可能在WB中产生复杂的断裂模式。 可以观察到~80-120kDa之间的多条谱带。 这种抗体已经在WB和IHC的人体样本上进行了测试。 客户反馈(参见Abreview)表明抗体在小鼠组织上的IHC中表现不佳。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 人类E Cadherin aa 600-700内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第12830页 -
阳性对照 IHC-P:人乳腺癌、肺腺癌和结肠腺癌组织。 甲状腺乳头状癌和肾组织移行细胞癌。 ICC/IF:MCF7、HT-29和野生型A431细胞。 流式细胞仪(内部):A431和MCF7细胞。 WB:MCF-7、HT-29、HepG2和PC-3全细胞裂解物。 mIHC:人类子宫内膜组织。
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.5%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EP700型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
-
替代版本 Alexa Fluor®488抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( ab185013年 ) Alexa Fluor®647抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( ab194982年 ) 抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-低内毒素,无氮( 大约201499 ) Alexa Fluor®555抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约206878 ) Alexa Fluor®594抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约206880 ) PE抗-E钙粘蛋白抗体[EP700Y]( 约224959 ) APC抗-E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记( 约224960 ) 抗E钙粘蛋白抗体[4A2]( ab231303号 ) 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-BSA和无叠氮化合物( 约256580 )
-
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
靶标
-
功能 钙粘蛋白是钙依赖的细胞粘附蛋白。 在连接细胞时,它们优先以亲同方式与自身相互作用; 因此,钙粘蛋白可能有助于异质细胞类型的分类。 CDH1参与调节上皮细胞的细胞间粘附、迁移和增殖的机制。 具有强大的侵袭抑制作用。 它是整合素α-E/β-7的配体。 E-Cad/CTF2促进Abeta前体的非淀粉样变性降解。 对APP C99和C83的生产有强烈的抑制作用。 -
组织特异性 非神经上皮组织。 -
疾病相关 CDH1缺陷是遗传性弥漫性胃癌(HDGC)的原因[MIM:137215]。 一种常染色体显性癌症易感综合征,对弥漫性胃癌的易感性增加。 弥漫性胃癌是一种恶性疾病,其特征是分化不良的浸润性病变导致胃壁增厚。 恶性肿瘤始于胃,可扩散至食道或小肠,并可穿过胃壁延伸至附近的淋巴结和器官。 它也可以转移到身体的其他部位。 注:杂合生殖系突变CDH1与弥漫性胃癌家族性病例有关。 在散发性弥漫性胃癌和小叶性乳腺癌患者中也发现了体细胞突变。 CDH1缺陷是子宫内膜癌(ENDMC)易感性的一个原因[MIM:608089]。 CDH1缺陷是卵巢癌(OC)易感性的一个原因[MIM:167000]。 卵巢癌起源于卵巢组织的常见恶性肿瘤。 尽管已经描述了许多卵巢肿瘤的组织学类型,但上皮性卵巢癌是最常见的形式。卵巢癌通常无症状,即使是晚期疾病,其公认的症状和体征也是模糊的。 因此,大多数患者被诊断患有晚期疾病。 -
序列相似性 包含5个钙粘蛋白域。 -
翻译后修饰 在细胞凋亡或钙内流期间,被膜结合金属蛋白酶(ADAM10)、PS1/gamma-分泌酶和caspase-3裂解,分别产生约38 kDa(E-CAD/CTF1)、33 kDa。 由钙内流诱导的金属蛋白酶处理导致细胞间粘附中断,随后β-catenin释放到细胞质中。 残余的膜系留裂解产物通过细胞内蛋白水解途径快速降解。 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解释放细胞质尾部,导致肌动蛋白微丝系统解体。 γ-分泌酶介导的分裂促进粘附连接的分解。 -
细胞定位 细胞连接。 细胞膜。 内体。 高尔基体>转高尔基体网络。在肠上皮细胞的细胞-细胞接触部位与DLGAP5进行结肠化。 通过与α-、β-和γ-连环蛋白结合而锚定在肌动蛋白微丝上。 凋亡或钙内流诱导的连续蛋白水解导致细胞与细胞接触部位向细胞质移位。 在从高尔基体运输到质膜的过程中,与RAB11A内体发生结肠化。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 Arc 1抗体 CADH1_人类抗体 钙粘蛋白1抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),稀释1/1000 车道1: 野生型A431细胞裂解物 车道2: CDH1敲除A431细胞裂解物 3号车道: Caco-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 110130,40,55,80千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot:抗CDH1抗体[EP700Y](ab40772)在1/1000稀释液中染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )1/2000稀释的负载对照染色,显示为红色。在蛋白质印迹中,ab40772显示与CDH1特异性结合。 在野生型A431细胞裂解液中在130、110、80、55、40 kDa处观察到一条带,在CDH1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约273747 (敲除细胞裂解物 约273781 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDH1敲除A431细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),1/10000稀释 车道1: 野生型Raji细胞裂解物 车道2: CDH1敲除Raji细胞裂解物 3号车道: MCF7细胞裂解物 车道4: MDA-MB-231细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 105130千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记物染色(1/10000稀释),以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab40772被显示为与E Cadherin特异结合。在野生型Raji细胞裂解液中在105/130 kDa处观察到一条带,在CDH1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约273747 (敲除细胞裂解物 约273781 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CDH1敲除Raji细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在TBS-0.1%吐温®20(TBS-T)中的3%牛奶中封闭膜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
免疫组织化学分析中使用ab40772对抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记进行组织芯片染色。 本表详细概述了每种测试样品类型的阳性(勾号)和阴性(交叉标记)染色。 将切片在室温下与ab40772孵育30分钟,然后使用兔专用IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 ). 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
使用ab40772对野生型A431细胞和CDH1敲除A431细胞中的E-Cadherin进行免疫荧光染色(上图)。 用4%甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab40772以1µg/mL和 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )(以绿色显示)和山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( 约150120 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 -
使用ab40772对野生型A431细胞和CDH1敲除A431细胞中的E-Cadherin进行免疫荧光染色(上图)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton-X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab40772以0.2µg/mL和 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488)预吸附层( 约150081 )(以绿色显示)和山羊抗鼠IgG H&L(Alexa Fluor ® 594)预吸附层( 约150120 )(以红色显示),均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面。 -
人类子宫内膜的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)。 A组:抗E Cadherin融合染色( 约256580 ,红色; Opal™690),抗SLC34A2( 约238793 ,绿色; Opal™520)和抗CD10( 约255609 ,青色; Opal™570)对人类子宫内膜的作用。 B组:基质细胞上的抗CD10染色。 C组:腺细胞上有抗E钙粘蛋白染色。 D组:腺细胞顶膜上有抗SLC34A2染色。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体。 切片经过三轮染色培养:按照 约256580 1/3000稀释(0.324μg/ml)30分钟, 约238793 稀释1/1000(2.26μg/ml)10分钟 约255609 在室温下以1/1000稀释(0.615μg/ml)30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® 带有Opal™4色套件的RX仪器。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 DAPI(蓝色)用作核反染剂。 该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约256580 ). -
所有车道: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),稀释1/1000 车道1: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: A375(人恶性黑色素瘤上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道5: HT-1080(人纤维肉瘤上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 80-125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 约181602 作为GAPDH加载控制。 曝光时间:1道:3秒; 2-5车道:40秒。 A375、HeLa和HT-1080被报告为E钙粘蛋白阴性或表达低水平(PMID:30393081,PMID:16980628,PMID:34715746),PMID:25411788)。 -
1/1000稀释的抗E钙粘蛋白抗体[EP700Y]-细胞间连接标记物(ab40772)+20µg MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 次要 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 80-125千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3.25秒。 封闭和稀释缓冲液: 5%NFDM/TBST。 全长E Cadherin的分子量约为125 kDa。 根据细胞类型或细胞条件,也可以观察到其他分子量在80-100 kDa之间。 PMID:27274359,PMID:26983597,PMID:18478055,PMID:22375065。 -
所有车道: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),1/10000稀释 车道1: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)。 全细胞裂解物 车道2: HT-29(人大肠腺癌上皮细胞)。 全细胞裂解物 3号车道: PC-3(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: MDA-MB-231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物(阴性对照) 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/100000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 97千帕 暴露时间: 23秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 多银行可参考PMID:112238; PMID:14695147和PMID:22659456 -
当4αPMA不活跃时,PMA诱导BeWo细胞融合、DYSF表达和PKC激活 用0.25%二甲基亚砜(对照)、10 nM PMA或10 nM 4αPMA处理72 h的BeWo细胞的免疫荧光分析。然后固定细胞,随后进行双重标记,以检测DYSF(红色)和E-cadherin(绿色)。 细胞核用DAPI标记。 虽然在对照细胞中可能存在低水平的自发融合(在我们手中,这一范围约为4%至9%),但大多数细胞并没有融合,其边界处的E-cadherin标记完整。 此外,在非融合BeWo细胞中未检测到DYSF标记。 然而,用10 nM PMA处理BeWo细胞72小时后,E-cadherin标记的破坏和融合细胞中DYSF的表达表明,细胞融合水平增加。 当用10 nM 4αPMA处理BeWo细胞72小时时,细胞融合或DYSF表达没有明显增加。 箭头表示放大并放置在插图中的区域。 棒材=50µm。 -
间充质癌细胞显示转移增加,而实体瘤形成不需要MET。 ICI-mice转移瘤的ZEB1或E-cadherin染色。 注意,表达OVOL1或ZEB1-shRNA(sh4)的转移细胞中E-cad表达较高,ZEB1表达较低。 比例尺代表100µm。 -
用纯化的ab40772在1/30稀释度(10µg/ml)(红色)下标记E Cadherin的MCF7(人乳腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 10 6 细胞用4%多聚甲醛固定。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)二级抗体以1/2000稀释度使用。 同位素对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未标记对照-未与第一抗体和第二抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
使用未纯化的ab40772对石蜡包埋的人类乳腺癌组织进行荧光免疫组织化学分析。 绿色E钙粘蛋白红-PI。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
重叠直方图显示A431(人类表皮样癌细胞系)细胞被未纯化的40772(红线)染色。10 6 细胞用80%甲醇固定(5分钟),并在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab40772,1/1000稀释)在22°C下孵育30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下以1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(0.1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
免疫组化分析中,福尔马林/PFA固定石蜡包埋的人类结肠腺癌组织用1/500稀释的未纯化ab40772进行E Cadherin染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
车道1: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),稀释1/5000 车道2: 抗E钙粘蛋白抗体[EPR699]( 约133597 )稀释1/2000 3号车道: 抗GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 ) 所有车道: PC-3(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千帕 暴露时间: ab40772和 约133597 GAPDH为32秒。 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 多银行可参考PMID:112238; PMID:14695147和PMID:22659456 -
免疫组织化学分析中,用未纯化的ab40772以1/500稀释度对福尔马林固定、石蜡包埋的人肺腺癌组织进行E-Cadherin染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
车道1: 抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记(ab40772),稀释1/5000 车道2: 抗E钙粘蛋白抗体[EPR699]( 约133597 )稀释1/2000 3号车道: 抗GAPDH抗体[EPR16891]-负荷控制( 约181602 ) 所有车道: HT-29(人大肠腺癌上皮细胞)。 全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 80千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: ab40772为1秒,3分钟 约133597 ,GAPDH为32秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 多银行可参考PMID:112238; PMID:14695147和PMID:22659456 -
免疫组织化学分析中,用未纯化的ab40772以1/500稀释度对福尔马林固定、石蜡包埋的人类乳腺癌组织进行E-Cadherin染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
抗-E Cadherin抗体[EP700Y]-细胞间连接标记物(ab40772),稀释度为1/200000(未纯化)+MCF7(人乳腺癌)全细胞裂解液,浓度为20µg 次要 羊抗狂犬病IgG H&L(HRP),稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 97千帕 观察到的波段大小: 100120,80,97千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1分钟 封闭和稀释缓冲液,浓度为5%NFDM/TBST。 E-cadherin全长为120kDa。 其他条带是由于不同Cadherin结构域中的蛋白水解裂解所致。 (参考:PMID:14695147) -
免疫组化分析中,用未纯化的ab40772以1/500稀释度对甲状腺组织中福尔马林固定石蜡包埋的人乳头状癌进行E-Cadherin染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
免疫组化分析中,用未纯化的ab40772以1/500稀释度对福尔马林固定、石蜡包埋的人肾组织移行细胞癌进行E-Cadherin染色。 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
1μg/ml ab40772对乳腺癌E-Cadherin染色的免疫组织化学研究 在开始IHC染色方案之前,用pH为6的柠檬酸缓冲液进行热介导抗原回收。 -
使用未净化ab40772生产 平衡解离常数(K D类 ) 了解有关K的更多信息 D类 单击此处了解有关K的更多信息 D类
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (750)
张伟 等。 单细胞测序显示SATB2/NOTCH1信号传导促进甲状腺乳头状癌上皮细胞恶性进展。 摩尔癌 63:22-33 (2024). 公共医学:37877736 田平 等。 CBX7通过ITGβ3/TGFβ1/AKT通路参与宫颈癌的进展。 Oncol Lett公司 27:14 (2024). 公共医学:38028179 Tan G(切线G) 等。 脾酪氨酸激酶促进由hsa_circ_0006417/miR-377-3p轴调节的甲状腺乳头状癌的进展。 环境毒物 39:421-434 (2024). 公共医学:37792549 杨斯(Yang S) 等。 CPT1A/蜗牛轴通过激活糖酵解途径促进胰腺癌的进展和转移。 i科学 26:107869 (2023). 公共医学:37736047 张Y 等。 Friend白血病整合1过度表达通过促进子宫内膜上皮细胞中PART1转录降低子宫内膜容受性并诱导胚胎植入失败。 同行J 11:e16105(2023)。 公共医学:37780395