主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[E23]抗Caspase-9 适用于:WB、IHC-P、IP、流式细胞周期(内部)、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E23]至半胱氨酸蛋白酶-9 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体应能识别Caspase-9的前[40kDa]形式和p35裂解形式。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 -
常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E23型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白
应用
靶标
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功能 参与负责凋亡执行的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶的激活级联。 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9与Apaf-1的结合导致蛋白酶激活,蛋白酶随后裂解并激活半胱氨酸蛋白酶-3。 蛋白质水解裂解聚ADP-核糖聚合酶(PARP)。 同工酶2缺乏活性是半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9的主要负性抑制剂。 -
组织特异性 无处不在,心脏表达最高,肝脏、骨骼肌和胰腺表达中等。 所有其他组织中含量低。 在心脏内,特别在心肌细胞中表达。 -
序列相似性 属于肽酶C14A家族。 包含1个CARD域。 -
发展阶段 在胎儿心脏中低水平表达,在新生儿心脏中中等水平表达,在成人心脏中高水平表达。 -
翻译后修饰 颗粒酶B对Asp-315的切割和胱天蛋白酶-3对Asp-330的切割产生两个活性亚基。 Caspase-8和-10也可能参与这些处理事件。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 APAF-3抗体 APAF3抗体 凋亡相关半胱氨酸肽酶抗体
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图片
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所有车道: 抗天冬氨酸酶-9抗体[E23](ab32539),稀释度为1/1000 车道1: 野生型THP-1细胞裂解物 车道2: CASP9敲除THP-1细胞裂解物 3号车道: HeLa细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 46千Da 观察到的波段大小: 45千帕 为什么实际频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗天冬氨酸酶-9抗体[E23]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab32539显示与Caspase-9特异结合。 在野生型THP-1细胞裂解液中观察到45kDa的条带,在CASP9敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约276122 (敲除细胞裂解物 约284219 ). 为了生成此图像,分析了野生型和CASP9敲除THP-1细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 膜被封闭在3%的TBS-0.1%吐温牛奶中 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸收抗体( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye®680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道: 车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(40µg) 车道2: CASP9敲除HAP1全细胞裂解物(40µg) 3号车道: HeLa全细胞裂解物(40µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在45 kDa下观察到ab32539。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab32539被证明能在野生型HAP1细胞中特异性识别Caspase-9以及其他交叉反应带。 检测Caspase-9敲除样品时未观察到条带。 对野生型和Caspase-9敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab32539和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/500和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗小鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 在成像前在室温下以1/10000稀释1小时的二次抗体。 -
人类骨骼肌组织标记Caspase-9的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,纯化的ab32539为1/250。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
HepG2细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab32539标记Caspase-9(1/500)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 ab150120型 ,Alexa Fluor ® 还使用594个缀合的山羊抗小鼠IgG(1/1000)。 对照1:一级抗体(1/500)和二级抗体, ab150120型 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/1000)。 -
K562细胞的细胞内流式细胞术分析,用1/250(红色)纯化的ab32539标记Caspase-9。 细胞用100%甲醇固定。 以FITC-偶联山羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
在HeLa全细胞裂解液中以1/80免疫沉淀Caspase-9纯化ab32539。 通道1(输入):HeLa全细胞裂解物(10µg) 通道2(+):ab32539+HeLa全细胞裂解物。 通道3(-):兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解液中的ab32539。 对于western blotting,一种HRP-结合的抗兔IgG,特异于非还原型IgG被用作二级抗体(1/1500)。 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗天冬氨酸酶-9抗体[E23](ab32539),稀释度为1/1000(纯化) 车道1: 喜树碱处理的HeLa全细胞裂解物 车道2: HeLa全细胞裂解物-未经处理 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释度为1/1000 预测的带宽大小: 46千Da 观察到的波段大小: 35,46千Da 为什么实际频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
重叠直方图显示未纯化ab32539染色的K562细胞(红线)。 用甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab32539,1/100稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是抗兔DyLight ® 488 ( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用4%多聚甲醛(10分钟)固定/用0.1%PBS-Tween在相同条件下渗透的K562细胞中发出阳性信号。 -
用稀释度为1/50的未纯化ab32539标记Caspase 9的人宫颈癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,执行热介导抗原检索。 -
所有车道: 1/20000稀释(未净化)的抗天冬氨酸酶-9抗体[E23](ab32539) 车道1: Jurkat细胞裂解物-未经处理 车道2: Jurkat细胞裂解物-喜树碱处理 预测的带宽大小: 46千Da 观察到的波段大小: 48千Da 为什么实际频带大小与预测的不同? 其他波段位于: 28千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (247)
周毅(Zhou Y) 等人。 HOXA4激活的lncRNA HOTAIRM1通过与蛋白伴侣HSPA5的直接相互作用促进HUVEC增殖。 炎症 47:421-437 (2024). 公共医学:37898994 Sun SQ公司 等人。 天然产物虾青素对SK-N-SH细胞STAT3相关通路的预防作用。 BMC补体医学治疗 23:430 (2023). 公共医学:38031104 詹立 等人。 MiR-21-5p通过靶向IL-6R预防缺血性中风。 Ann Transl医学 11:101 (2023). 公共医学:36819547 萨阿德·谢赫里Z 等人。 蜂王酸(10-羟基-2-癸烯酸)的抗癌作用及其对人肝癌细胞的细胞机制。 分子 28:不适用(2023年)。 公共医学:36838959 侯T 等人。 β-碘酮通过激活LKB1/AMPK触发的自噬抑制肾癌进展。 生物化学分子毒物杂志 37:e23331(2023)。 公共医学:36843289