主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 AMPKα1单克隆兔[Y365] 适用于:ICC/IF、Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、IP 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y365]至AMPKα1 -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体对人类AMPKα1具有特异性。 该抗体对小鼠和大鼠样本的亲和力较低。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 预测可用于: 非洲绿猴 -
免疫原 人类AMPKα1 aa 500内的合成肽到达C末端(C末端)。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 问题13131 -
阳性对照 WB:HeLa、HepG2、C6、NIH/3T3和MCF-7细胞裂解物。 小鼠肝脏、大脑、视网膜和骨骼肌组织裂解物、RAW 264.7细胞裂解物、Neuro2A细胞裂解液。 IHC-P:人宫颈癌和肺癌组织。 ICC/IF:MCF-7细胞。 流动Cyt(内部):HeLa细胞。 IP:HeLa全细胞裂解物( 约150035 ).
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 365年 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
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应用
靶标
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功能 负责通过乙酰辅酶A羧化酶磷酸化调节脂肪酸合成。 它还通过激素敏感脂肪酶和羟甲基戊二酰辅酶A还原酶的磷酸化和失活调节胆固醇合成。 当细胞ATP水平耗尽,以及当燃料限制和/或缺氧导致5'-AMP升高时,似乎作为代谢应激敏感蛋白激酶关闭生物合成途径。 这是一个催化亚单位。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 CAMK Ser/Thr蛋白激酶家族。 SNF1亚家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5562 人类 Entrez基因: 105787 鼠标 Entrez基因: 65248 老鼠 Omim公司: 602739 人类 瑞士保护银行: 问题13131 人类 瑞士保护银行: Q5EG47问题 鼠标 瑞士保护银行: 第54645页 老鼠 尤尼金: 43322 人类
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别名 5 AMP活化蛋白激酶α1催化亚单位抗体 5 AMP活化蛋白激酶催化α1链抗体 5'AMP活化蛋白激酶催化亚单位α1抗体
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图片
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所有车道: 1/1000稀释的抗AMPKα1抗体[Y365](ab32047) 车道1: 野生型RAW 264.7细胞裂解物 车道2: PRKAA1敲除RAW 264.7细胞裂解物 3号车道: 小鼠肝细胞裂解物 车道4: Neuro2A细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 63千帕 观察到的频带大小: 64千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗AMPKα1抗体[Y365]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体[6C5]( 约8245 )以1/20000稀释度进行负荷对照染色,以红色显示。在Western blot中,ab32047显示与AMPKα1特异性结合。 在野生型RAW 264.7细胞裂解液中观察到64 kDa的条带,在PRKAA1敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约280055 (敲除细胞裂解物 ab280114号 ). 为了生成此图像,分析了野生型和PRKAA1敲除RAW 264.7细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :AMPKα敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :MCF7细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HeLa细胞裂解物(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在63 kDa下观察到ab32047。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 ab32047在野生型HAP1细胞中与AMPKα特异性反应。 当检测AMPKα敲除样品时,没有观察到条带。 对野生型和AMPKα基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32047和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/5000和1/2000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1hr。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人肺癌组织标记AMPKα1,纯化ab32047为1/100。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
用1/250纯化的ab32047标记AMPKα1的MCF7细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 约150120 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 对照1:一级抗体(1/250)和二级抗体, 约150120 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/500)。 -
HeLa细胞标记AMPKα1的细胞内流式细胞术分析,纯化的ab32047为1/150(红色)。 用2%多聚甲醛固定细胞。 以FITC-偶联山羊抗兔IgG(1/150)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
所有车道: 1/500稀释的抗AMPKα1抗体[Y365](ab32047) 车道1: HepG2(人肝癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: 小鼠肝组织裂解物 车道4: 小鼠脑组织裂解物 车道5: 小鼠肾组织裂解物 车道6: 小鼠视网膜组织裂解物 7号车道: 小鼠骨骼肌组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 63千帕 观察到的频带大小: 63千帕 其他波段位于: 40 kDa(可能的非特异性结合) 暴露时间: 3分钟 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 该抗体对小鼠样本的亲和力较低。 -
所有车道: 1/20000稀释的抗AMPKα1抗体[Y365](ab32047) 车道1: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: HepG2(人肝细胞癌上皮细胞)全细胞裂解物 3号车道: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: K-562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 车道5: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解物 车道6: Neuro-2a(小鼠神经母细胞瘤成神经细胞)全细胞裂解物 7号车道: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 63千帕 观察到的频带大小: 63千帕 暴露时间: 180秒 阻塞和稀释缓冲液和浓度: 5%NFDM/TBST。 该抗体对小鼠和大鼠样本的亲和力较低。 -
所有车道: 1/2000稀释(纯化)的抗AMPKα1抗体[Y365](ab32047) 车道1: C6细胞裂解物 车道2: NIH/3T3细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 63千帕 观察到的频带大小: 63千帕 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 该抗体对小鼠和大鼠样本的亲和力较低。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析用未纯化的ab32047在1/100稀释度下标记AMPKα1的人宫颈癌组织。在开始IHC染色方案之前,用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原检索。 -
重叠直方图显示HeLa细胞用未纯化ab32047染色(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS吐温透化20分钟。然后将细胞在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab32047,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器采集了超过5000个事件。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (192)
Ji P公司 等。 基因工程益生菌作为肿瘤饥饿治疗的催化葡萄糖剥夺剂。 今日母校简介 18:100515 (2023). 公共医学:36582449 Wang YL公司 等。 Sestrin2通过AMPK/YAP途径介导FOXM1表达以阻断非小细胞肺癌的EMT过程。 新血浆 70:46-57 (2023). 公共医学:36620877 黄S 等。 卡格列嗪通过FGF21-ERK1/2途径阻止NLRP3介导的细胞凋亡,从而改善NAFLD的发展。 肝素Commun 7:e0045(2023年)。 公共医学:36757426 王Z 等。 FOXA2在肝细胞癌进展和lenvatinib相关耐药性中起着关键作用。 Biosci趋势 17:136-147 (2023). 公共医学:36823043 张杰 等。 生酮饮食对小鼠运动耐力和腓肠肌转录组的影响。 开放式生命科学 18:20220570 (2023). 公共医学:36852401