主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 Ki67兔单克隆抗体[EPR3610] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR3610]至Ki67 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,老鼠 -
免疫原 人Ki67 aa 1050-1150内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: 第46013-1页 -
阳性对照 WB:野生型A549、HeLa和ramos细胞裂解物。 IHC-P:人类扁桃体、结肠、卵巢癌、宫颈鳞癌和结肠腺癌组织。 ICC/IF:HeLa、HT-29细胞、HAP1细胞。 流式细胞术(内):Ramos细胞,HAP1细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
解离常数 (K) D类 ) -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR3610型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 Alexa Fluor®647抗Ki67抗体[EPR3610]( 公元196907年 ) Alexa Fluor®488抗Ki67抗体[EPR3610]( 约197234 ) 抗Ki67抗体[EPR3610]-BSA和无叠氮化合物( ab209897年 ) Alexa Fluor®568抗Ki67抗体[EPR3610]( 公元211968年 ) HRP抗Ki67抗体[EPR3610]( 约212215 ) Alexa Fluor®555抗Ki67抗体[EPR3610]( ab215226号 ) Alexa Fluor®594抗Ki67抗体[EPR3610]( 约216709 ) Alexa Fluor®750抗Ki67抗体[EPR3610]( 约321771 )
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兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 核膜解体后,需要维持分散在细胞质中的单个有丝分裂染色体(PubMed:27362226)。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖染色体表面的大部分(PubMed:27362226)。 通过形成空间电荷和静电电荷屏障,防止染色体塌陷成单个染色质团:蛋白质具有高净电荷,充当表面活性剂,分散染色体并实现独立的染色体运动(PubMed:27362226)。 结合DNA,优先选择超螺旋DNA和富含AT的DNA(PubMed:1087851)。 对有丝分裂染色体的内部结构没有贡献(根据相似性)。 可能在染色质组织中起作用(PubMed:24867636)。 然而,尚不清楚它是在染色质组织中起直接作用,还是维持有丝分裂染色体分散功能的间接结果。 -
序列相似性 包含1个FHA域。 包含16个K167R重复。 包含1个PP1-绑定域。 -
发展阶段 表达优先发生在细胞周期的晚期G1、S、G2和M期,而在G0期细胞中无法检测到抗原(在蛋白水平)(PubMed:6206131)。 在G2期和有丝分裂期间(蛋白质水平)出现最高水平。 在间期,在核仁周围的纤维蛋白缺乏区域形成纤维状结构(PubMed:2674163,PubMed:8799815)。 -
翻译后修饰 磷酸化。 有丝分裂中的高磷酸化(PubMed:10502411,PubMed:10653604)。 高磷酸化形式不结合DNA。 -
细胞定位 染色体。 核心。 细胞核,核仁。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖有丝分裂的染色体表面的很大一部分(PubMed:27362226)。 与G1期卫星DNA相关(PubMed:9510506)。 在间期与染色质紧密结合,当染色质结合在浓缩染色体表面时,有丝分裂中染色质结合减少(PubMed:15896774,PubMed:22002106)。 主要定位于核周区的G1期,在后期,也可在整个核内部检测到,主要定位于细胞核基质(PubMed:22002106)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 单克隆抗体Ki 67抗体鉴定的抗原 单克隆抗体Ki-67抗体鉴定的抗原 抗原KI-67抗体
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图片
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所有车道: 1/5000稀释度下的抗Ki67抗体[EPR3610](ab92742) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: MKI67敲除A549细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 359千帕 观察到的频带大小: 359千帕 Western blot:抗MKI67抗体[EPR3610](ab92742)在1/5000稀释度下染色,以绿色显示; 鼠抗CANX[CANX/1543]( ab238078型 )以1/20000稀释度加载控制染色,以洋红色显示。 在Western blot中,ab92742被证明与MKI67特异结合。 在野生型A549细胞裂解液中在359 kDa处观察到一条带,在MKI67敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和MKI67敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
流式细胞术重叠直方图显示野生型Hap1(绿线)和MKI67敲除Hap1用ab92742染色(红线)。 将细胞用80%甲醇固定(5分钟),然后用0.1%PBS Triton X-100透化15分钟。然后将细胞在含有10%正常山羊血清的1x PBS中孵育,以阻断非特异性蛋白-蛋白相互作用,然后用抗体(ab92742)(1x 10 6 100μl,0.04μg/ml(1/57000)),22°C下30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体重组兔IgG,单克隆[EPR25A]-同位素对照在与一级抗体相同的浓度和条件下使用(野生型Hap1-黑线,MKI67敲除Hap1-灰线)。 未标记样本也用作对照(为了简单起见,未显示此行)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 在相同条件下,该抗体在4%甲醛固定/0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟的Hap1中发出阳性信号。 -
RNApII-S2P-/低细胞与Ki-67-细胞的比较 a: 在T98G胶质母细胞瘤细胞增殖和静止期间Ki-67和RNApII-S2P的调节。 在含有10%(v/v)胎牛血清(FBS)的培养基中培养T98G细胞,在添加0.5%(v/v)FBS的培养基上通过血清饥饿诱导其静止14天,然后将其以1:5的比例分裂到含有10%(v/v)FBS新培养基中再进行刺激,并培养3天。 用胰蛋白酶-EDTA溶液将细胞从培养皿中分离出来,固定在10%(v/v)中性缓冲福尔马林中,然后离心。 切下颗粒的石蜡切片,通过单一(棕色;a1,a2,a4,a5,a7,a8)或双重免疫染色(Ki-67,棕色;RNApII-S2P,红色;a3,a6,a9)检测Ki-67和RNApII-S2P的表达。 苏木精(蓝色)用作核染色剂。 Ki-67-RNApII-S2P-/低细胞(双染色切片中的蓝色细胞)仅在静止状态下出现(a6,箭头)。 比例尺,10μm。 b: 胶质母细胞瘤组织连续切片中Ki-67(b1)和RNApII-S2P(b2)的单色免疫染色。 Ki-67-肿瘤细胞常见,而坏死区周围仅观察到少量RNApII-S2P-/低细胞(箭头)。 N、 坏死区; 五、 血管。 比例尺,50μm。 使用ab92742检测到Ki67。 (来自石井等人的图S2) -
ab92742染色野生型HAP1细胞中的Ki67(上图)和Ki67敲除HAP1的细胞(下图)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab92742以1µg/ml和 公元195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor)进一步孵育1小时 ® 488) ( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 Alexa Fluor公司 ® 488 ( 约197234 )和Alexa Fluor ® 647 ( 公元196907年 )这个克隆有共轭版本。 -
1/5000稀释(纯化)的抗Ki67抗体[EPR3610](ab92742)+20µg的Ramos(人伯基特淋巴瘤细胞系)细胞裂解物 次要 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 359千帕 观察到的频带大小: 395千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 -
重叠直方图显示Ramos(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)细胞被未纯化的ab92742(红线)染色。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(未纯化的ab92742,1/100稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 Alexa荧光粉 ® 488 ( 约197234 )和Alexa Fluor ® 647 ( 公元196907年 )这个克隆有共轭版本。 -
免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析人宫颈鳞癌组织,用纯化的ab92742标记Ki67(1/250)。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 苏木精复染。 阴性对照使用PBS代替一抗(插图)。 -
乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PgR)和Ki-67的显色三联免疫染色,以验证三联免疫检测方法。 小组e: 急诊室 + PgR公司 - 基-67 - 细胞被染成红色(短箭头),ER - PgR公司 + 基-67 - 细胞被染成蓝色(黑色箭头),ER + PgR公司 + 基-67 - 细胞被染成紫色(长箭头),Ki-67 + 细胞呈棕色(白色箭头)。 这些颜色很容易辨别。 比例尺,25μm。 通过在pH为9的抗原回收溶液中煮沸,对脱蜡切片进行抗原回收预处理。 切片与兔抗Ki67ab92742单克隆抗体以1/1000的稀释度孵育。 与(HRP)结合的二级抗体反应后,用(DAB)显色,切片用苏木精复染。 -
用纯化的ab92742标记Ki67(1/250)的HT-29(人大肠腺癌细胞系)细胞的免疫细胞化学分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 ab150120型 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 控制1: 一级抗体(1/250)和二级抗体, ab150120型 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 对照2: 约7291 (1/1000)和第二抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/500)。 -
用未纯化ab92742标记Ki67的人正常结肠组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
用未纯化ab92742标记Ki67的人结肠腺癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原检索。 -
Ramos(人类Burkitt淋巴瘤细胞系)细胞的细胞内流式细胞术分析,用纯化的ab92742标记Ki67,比例为1/150(红色)。 细胞用2%多聚甲醛固定。 以FITC-偶联山羊抗兔IgG(1/150)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
未纯化ab92742标记Ki67的人卵巢癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
1/500稀释(未净化)的抗Ki67抗体[EPR3610](ab92742)+10µg的HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞裂解液 次要 HRP-结合山羊抗兔IgG(稀释度为1/2000) 预测的带宽大小: 359千帕 观察到的频带大小: 395千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
未纯化ab92742标记Ki67的人宫颈癌组织的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 在开始IHC染色方案之前,进行热介导抗原回收。 -
用免疫细胞化学方法对人腺癌细胞Ki67进行ab92742染色。 细胞用多聚甲醛固定,并用PBS中的0.1%Triton X-100透化,并在21°C下用5%血清封闭1小时。 样品与一级抗体(1/1000)在4°C下孵育12小时。 A Cy3细胞 ® 以驴抗兔结合IgG多克隆作为次级抗体,稀释度为1/200。 -
对HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞进行免疫细胞化学分析,以1/250的稀释度用未纯化的ab92742标记Ki67。
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文献 (370)
李明(Li M) 等。 双重HDAC和PI3K抑制剂CUDC‑907通过抑制神经母细胞瘤中的PTX3抑制肿瘤生长和干样特性。 国际癌症杂志 64:不适用(2024年)。 公共医学:38063204 周二 等。 I型胶原和纤维调节蛋白增强hASC的成腱表型及其肌腱再生潜力。 NPJ再生医学 8:67 (2023). 公共医学:38092758 太阳Z 等。 加味柴芍六君子汤抑制胆汁酸诱导的胃肠化生:从网络预测到实验验证。 老龄化(纽约州奥尔巴尼市) 15:13998-14018 (2023). 公共医学:38096029 谢L 等。 TTC13表达和STAT3激活可形成正反馈环,促进ccRCC进展。 同行J 11:e16316(2023)。 公共医学:37927783 李毅 等。 靶向TCF4的miRNA-369-3p调节结肠癌细胞恶性生物学行为的体外研究。 胃肠病学杂志 14:2124-2133 (2023). 公共医学:37969834