主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 抗GSK3β的兔单克隆抗体[Y174] 适用于:ICC/IF、流式细胞仪(Intra)、WB、IHC-P、ELISA 敲除已验证 与以下物质反应:人类,重组片段
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y174]至GSK3β -
宿主 兔子 -
特异性 该抗体对人GSK3β具有特异性。 它还可以基于序列同源性检测剪接亚型2。 用于该抗体的免疫原是GSK3β-磷酸S9。 该抗体在一定条件下对磷酸化S9表现出部分磷酸化特异性,例如在ELISA检测中的低肽浓度下,它与磷酸化S8肽具有显性反应性。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人,重组片段 预测可用于: 鼠标 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 A431细胞裂解物。 当用于以下甲醛固定细胞系时,该抗体呈阳性结果:DU145。 IHC-P:人乳腺腺癌FFPE组织切片。 ICC/IF:HeLa全细胞裂解物( 约150035 )
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 174日元 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 参与Wnt信号通路。 参与了几个调节蛋白的激素控制,包括糖原合成酶、MYB和转录因子JUN。磷酸化物JUN位于其DNA结合域附近的位点,从而降低其对DNA的亲和力。 磷酸化乳腺癌细胞中的MUC1,并减少MUC1与CTNNB1/β-catenin的相互作用。 磷酸化物CTNNB1/β-catenin。 磷酸化物SNAI1。 在ERBB2依赖的细胞皮层微管稳定中发挥重要作用。 防止APC和CLASP2的磷酸化,使其与细胞膜结合。 反过来,膜结合APC允许MACF1定位到细胞膜,这是微管捕获和稳定所必需的。 磷酸化MACF1和这种磷酸化抑制MACF1与微管的结合,微管对其在隆起干细胞迁移和皮肤创伤修复中的作用至关重要。 -
组织特异性 在睾丸、胸腺、前列腺和卵巢中表达,在肺、脑和肾中弱表达。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 CMGC Ser/Thr蛋白激酶家族。 葛兰素史克-3亚家族。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
翻译后修饰 AKT1和ILK1磷酸化。 通过Tyr-216处的磷酸化激活。 -
细胞定位 细胞质。 核心。 细胞膜。 磷酸化形式定位于细胞质和细胞膜。 MEMO1-RHOA-DIAPH1信号通路控制磷酸化形式在细胞膜上的定位。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 糖原合成酶激酶3β抗体 糖原合成酶激酶-3β抗体 GSK 3β抗体
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图片
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车道1和3: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2和4: GSK3B敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 绿色-在46 kDa时观察到ab32391。 红色-装载控制, 约8245 ,在37 kDa下观察到。 ab32391可以识别野生型HAP1细胞中的GSK3B以及其他交叉反应带。 检测GSK3B敲除样品时未观察到条带。 对野生型和GSK3B敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab32391和 约8245 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别以1/2000稀释度和1/10000稀释度在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
HeLa细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用纯化的ab32391在1/500标记GSK3β。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%tritonX-100渗透。 Alexa Fluor®488-共轭山羊抗兔IgG( 约150077 )以1/1000稀释液作为二级抗体。 细胞与 约7291 ,一种小鼠抗微管蛋白抗体(1/1000),使用 约150120 ,Alexa Fluor®594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)作为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对于阴性对照1,使用兔一级抗体,然后使用抗鼠二级抗体( 约150120 ). 对于阴性对照2,小鼠一级抗体( 约7291 )和抗兔二级抗体( 约150077 )使用了。 -
GSK3β(磷酸S9)肽和GSK3非磷酸肽在10 ng/ml下的ELISA检测。ab32391在0~1000 ng/ml检测。碱性磷酸酶结合的亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)在1/2500时用作二级抗体。 -
GSK3β(磷酸S9)肽和GSK3非磷酸肽在1000 ng/ml下的ELISA检测。ab32391在0~1000 ng/ml检测。碱性磷酸酶结合亲和纯山羊抗狂犬病IgG(H+L)在1/2500时用作二级抗体。 -
重叠直方图显示用ab32391染色的HeLa细胞(红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS吐温透化20分钟。然后将细胞在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中孵育,以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32391,1/100稀释)孵育30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 -
1/10000稀释+A431细胞裂解液的抗-GSK3β抗体[Y174](ab32391)。 预测的带宽大小: 46千Da 观察到的波段大小: 46千Da -
人乳腺癌福尔马林固定石蜡包埋组织切片中GSK3染色的IHC图像,使用标准方案F在Leica-Bond系统上进行。使用柠檬酸钠缓冲液(pH 6,表位提取溶液1)使用热介导的抗原提取预处理切片20分钟。 然后在室温下用ab32391,1/200溶液培养切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab32391染色的DU145细胞的ICC/IF图像。 细胞经4%甲醛固定(10分钟),然后在1%BSA/10%正常山羊血清/0.3 M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中培养1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体ab32391以1/200的稀释度在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为DyLight ® 488山羊抗兔( 约96899 )以1/250稀释度使用IgG(H+L)1小时。 Alexa Fluor公司 ® 594 WGA用于标记1/200稀释1小时的质膜(红色)。 采用DAPI对浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)进行染色。 -
所有车道: 1/2500稀释度的抗-GSK3β抗体[Y174](ab32391) 车道1: MCF7(人乳腺癌细胞系)细胞裂解物 车道2: SW480(人大肠腺癌细胞系)细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 驴多克隆IRDye 800CW,1/15000稀释 预测的带宽大小: 46千Da 观察到的波段大小: 46千Da 其他波段位于: 37千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
数据表下载
文献 (184)
Astillero-Lopez V号 等。 阿尔茨海默病患者内嗅皮层的神经变性和星形胶质细胞增生:体视学分层特异性评估和蛋白质组分析。 老年痴呆症 18:2468-2480 (2022). 公共医学:35142030 裴X 等。 α-叶酸对PC12细胞中阿尔茨海默病实验模型的神经保护作用。 应用毒理学杂志 42:285-294 (2022). 公共医学:34133789 张Z 等。 异定向素通过对APP/PS1小鼠口腔和肠道微生物群的影响影响阿尔茨海默病标志物。 营养学杂志 152:140-152 (2022). 公共医学:34636875 刘JJ 等。 上调TRPM8可通过介导Akt/GSK-3信号通路促进结肠癌肝转移。 生物技术应用生物化学 69:230-239 (2022). 公共医学:33432591 太阳Y 等。 CDK14/β-catenin/TCF4/miR-26b正反馈调节体外胰腺癌细胞表型和体内肿瘤模型小鼠肿瘤生长。 据基因医学杂志 24:e3343(2022)。 公共医学:33871149