主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[E26]至p53 适用人群:WB、IHC-P、Flow Cyt、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E26]至p53 -
宿主 兔子 -
特异性 抗体应能识别人类野生型和突变型p53。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,大鼠 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:野生型HAP1、HEK293、A431、野生型A549和野生型Jurkat全细胞裂解物。 ICC/IF:野生型HAP1和A431细胞
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 交付后,将等分样品储存在-20°C下。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克康宁 (伊拉克) -
克隆编号 E26系列 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白
美国
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靶标
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功能 在多种肿瘤类型中起抑癌作用; 根据生理环境和细胞类型诱导生长停滞或凋亡。 作为一种反式激活剂参与细胞周期调节,通过控制这一过程所需的一组基因来负向调节细胞分裂。 其中一个激活的基因是周期素依赖性激酶的抑制剂。 凋亡诱导似乎是通过刺激BAX和FAS抗原表达或抑制Bcl-2表达介导的。 包含在Notch信号交叉中。 异构体2增强来自一些但不是所有TP53诱导启动子的亚型1的反式激活活性。 异构体4抑制反式激活活性并损害由异构体1介导的生长抑制。 异构体7抑制异构体1介导的凋亡。 -
组织特异性 无处不在。 等位基因在广泛的正常组织中表达,但以组织依赖的方式表达。 异构体2在大多数正常组织中表达,但在大脑、肺、前列腺、肌肉、胎儿大脑、脊髓和胎儿肝脏中未检测到。 同工酶3在大多数正常组织中表达,但在肺、脾、睾丸、胎脑、脊髓和胎肝中未检测到。 同工酶7在大多数正常组织中表达,但在前列腺、子宫、骨骼肌和乳腺中未检测到。 8型异构体仅在结肠、骨髓、睾丸、胎儿大脑和肠道中检测到。 同工酶9在大多数正常组织中表达,但在大脑、心脏、肺、胎肝、唾液腺、乳腺或肠中未检测到。 -
疾病相关 注=TP53在多种转化细胞中含量增加。 大约60%的癌症中TP53经常发生突变或失活。 在Barrett化生中发现TP53缺陷,即食管下部正常复层鳞状上皮被化生柱状上皮取代。 在大约10%的慢性胃食管反流病患者中,这种情况是一种并发症,容易发展为食管腺癌。 TP53缺陷是食管癌(ESCR)的原因[MIM:133239]。 TP53缺陷是Li-Fraumen综合征(LFS)的原因[MIM:151623]。 LFS是一种常染色体显性家族性癌症综合征,其经典形式是指先证者在45岁之前患有肉瘤,一级亲属在45岁以前患有任何肿瘤,另一级亲属则在45岁前患有任何肿瘤或任何年龄的肉瘤。 已经提出了LFS的其他临床定义(PubMed:8118819和PubMed:8718514),称为Li-Fraumeni-like综合征(LFL)。 在这些受影响的家庭中,亲属在异常的早期发展出一系列不同的恶性肿瘤。 TP53种系突变携带者中80%的肿瘤发生于四种类型的癌症:乳腺癌、软组织和骨肉瘤、脑肿瘤(星形细胞瘤)和肾上腺皮质癌。 较少见的肿瘤包括15岁之前的脉络丛癌或乳头状瘤、5岁之前的横纹肌肉瘤、白血病、Wilms肿瘤、恶性叶状瘤、结直肠癌和胃癌。 TP53缺陷涉及头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)[MIM:275355]; 也称为头颈部鳞状细胞癌。 TP53缺陷是肺癌(LNCR)的原因[MIM:211980]。 TP53的缺陷是脉络丛乳头状瘤(CPLPA)的原因[MIM:260500]。 脉络丛乳头状瘤是一种生长缓慢的脉络丛良性肿瘤,常侵犯软脑膜。 儿童通常位于侧脑室,而成年人则多位于第四脑室。 脑积水很常见,可能是由于梗阻或脑脊液肿瘤分泌物所致。 如果发生恶性转化,则称为脉络丛癌。 原发性脉络丛肿瘤很少见,通常发生在儿童早期。 TP53缺陷是肾上腺皮质癌(ADCC)的原因[MIM:202300]。 ADCC是一种罕见的儿童肾上腺皮质肿瘤。 在Beckwith-Weedemann综合征患者中发生频率增加,是Li-Fraumen综合征的组成肿瘤。 -
序列相似性 属于p53家族。 -
结构域 核输出信号起转录抑制域的作用。 TADI和TADII基序(残基17至25和48至56)对应于9aaTAD基序,它们是存在于大量酵母和动物转录因子中的反式激活域。 -
翻译后修饰 乙酰化。 CREBBP对Lys-382的乙酰化增强了转录活性。 SIRT1对Lys-382的去乙酰化损伤其诱导促凋亡程序和调节细胞衰老的能力。 Ser残基上的磷酸化介导转录激活。 通过HIPK1进行磷酸化(根据相似性)。 HIPK4对Ser-9的磷酸化增加了对BIRC5启动子的抑制活性。 VRK1对Thr-18进行磷酸化。 通过CHEK2对Ser-20进行磷酸化以响应DNA损伤,从而阻止MDM2的泛素化。 TAF1对Thr-55进行磷酸化,促进MDM2介导的降解。 紫外线照射下,HIPK2在Ser-46上磷酸化。 CREBBP的乙酰化需要Ser-46上的磷酸化。 在紫外线照射下,Ser-392被磷化,而不是γ射线照射。 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 紫外线照射下Ser-15的磷酸化; 通过与BANP的交互增强。 在Thr-55处用PP2A-PPP2R5C全酶脱磷。 SV40小T抗原通过PP2A的AC形式抑制去磷酸化。 可能在C-末端碱性区发生O-糖基化。 在EB-1细胞系中研究。 MDM2和SYVN1泛素化,导致蛋白酶体降解。 RFWD3泛素化,与MDM2协同工作,可能催化p53/TP53上非蛋白酶体靶向的短聚泛素链的形成。 MKRN1在Lys-291和Lys-292处泛素化,导致蛋白酶体降解。 USP10脱去泛素,使其稳定。 TRIM24泛素化,导致蛋白酶体降解。 TOPORS的泛素化导致降解。 USP7脱除泛素,实现稳定。 异构体4以MDM2诱导的依赖方式单泛素化。 SETD7在Lys-372处单甲基化,导致稳定并增加转录激活。 SMYD2在Lys-370处单甲基化,导致DNA结合活性和随后的转录调控活性降低。 Lys-372单甲基化阻止了与SMYD2的相互作用以及随后Lys-370的单甲基化。 通过EHMT1和EHMT2在Lys-373处二甲基化。 SETD8在Lys-382处单甲基化,促进与L3MBTL1的相互作用并导致抑制转录活性。 KDM1A对二甲基化Lys-370的去甲基化阻止了与TP53BP1的相互作用,并抑制了TP53介导的转录激活。 SUMO1进行酰化。 -
细胞定位 细胞质; 细胞质。 核心。 细胞核>PML体。 内质网。 与BANP的互动促进了核本地化。 与CHEK2一起加入PML机构; 核心。 细胞质。 大多数细胞定位于细胞核和细胞质。 在一些细胞中,细胞核内形成不同于核仁的病灶; 核心。 细胞质。 大多数细胞定位于细胞核,但在一些细胞的细胞质中发现; 核心。 细胞质。 主要定位于细胞核,细胞质中有少量染色; 核心。 细胞质。 以细胞核为主,但与同型4和细胞核一起表达时定位于细胞质。 细胞质。 以核为主,但在细胞应激后转移到细胞质。 -
UniProt提供的信息 -
电子伏特 -
别名 抗原NY-CO-13抗体 BCC7抗体 细胞肿瘤抗原p53抗体
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图片
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ab32389染色野生型Hap1细胞中的p53(顶部面板)和p53敲除Hap1的细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1µg/ml浓度的ab32389培养细胞,并 约7291 (鼠抗α-管蛋白单克隆抗体)在+4°C下以1/1000稀释过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150120型 )浓度为2μg/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用高含量分析系统(Perkin Elmer,Operetta CLS™)拍摄图像。 -
车道1: 野生型HAP1全细胞裂解物(20µg) 车道2: p53敲除HAP1全细胞裂解物(20µg) 3号车道: HEK293全细胞裂解液(20µg) 车道4: A431全细胞裂解物(20µg) 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在50kDa下观察到ab32389。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab32389在野生型HAP1细胞中与p53特异性反应。 当使用p53敲除样品时,没有观察到条带。 野生型和p53基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32389和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C下以1/1000稀释度和1/20000稀释度孵育过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
人类子宫内膜癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,以1/5000稀释度(0.09µg/ml)的纯化ab32389标记p53。 使用Bond™表位检索溶液2(pH 9.0)进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 兔特异性IHC聚合物检测试剂盒HRP/DAB( 约209101 )二级抗体用1/0稀释。 以PBS代替一抗作为阴性对照。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗p53抗体[E26](ab32389) 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: TP53敲除A549细胞裂解物 3号车道: 野生型Jurkat细胞裂解物 车道4: TP53敲除Jurkat细胞裂解物 车道5: A431细胞裂解物 车道6: Saos-2细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 44千Da 观察到的波段大小: 49千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:稀释1/1000的抗p53抗体[E26]染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab32389显示与p53特异性结合。 在野生型A549和Jurkat细胞裂解液中观察到49 kDa的条带,在tp53敲除细胞系中未观察到该大小的信号 约276092 , 约276112 (敲除细胞裂解物 ab282999年 , 约283832 ). 为了生成此图像,分析野生型和tp53敲除A549和Jurkat细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收( 约216776 )稀释1/20000。 -
流式细胞术分析4%多聚甲醛固定90%甲醇渗透的HEK-293(人胚胎肾上皮细胞)细胞,在1/500稀释度(1µg/ml)下用ab32389标记p53,与兔单克隆IgG(黑色)进行比较 同型对照和未标记对照(未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞)(蓝色)。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488, 约150077 )2000年1月作为二级抗体。 -
1/10000稀释(纯化)的抗p53抗体[E26](ab32389)+15µg的HEK-293(人类胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解液 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 44千Da 观察到的波段大小: 46,53千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 文献(PMID:16131611、29235495和22647703)描述了由内含子9的选择性剪接产生的p53亚型。
实验方案
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文献 (83)
严Y 等。 环状RNA hsa_circ_0001394通过靶向miR-527/UBE2A轴促进肝细胞癌的进展。 细胞死亡发现 8:81 (2022). 工作分解结构 ; 人类 . 公共医学:35210429 沈娥 等。 含DEP结构域1B(DEPDC1B)通过驱动蛋白家族成员23(KIF23)激活p53信号通路发挥肝癌的肿瘤启动子作用。 生物工程 13:1103-1114 (2022). 公共医学:34983303 陈X 等。 4-(甲基亚硝胺)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮可引起慢性胰腺炎发展为胰腺上皮内瘤变。 i科学 25:103647 (2022). 公共医学:35028532 胡H 等。 GINS2通过PTP4A1调节结肠癌细胞的增殖和凋亡。 分子医学代表 25:不适用(2022年)。 公共医学:35137928 蒋Z 等。 用基因定义的因子将原代人肝细胞转化为肝细胞癌。 EMBO代表 23:e54275(2022)。 公共医学:35437924