主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 雌激素受体α-ChIP级单克隆兔[E115] 适用于:ICC/IF、ChIC/CUT&RUN-seq、ChIP、WB、Flow Cyt(Intra)、IHC-P 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [E115]至雌激素受体α-ChIP等级 -
宿主 兔子 -
特异性 ERα蛋白的表达水平因样本类型而异。 这种抗体不适合在western blot中检测卵巢和肾、肺、脑等雌激素受体α低表达组织。 在我们的IHC检测条件下,在小鼠和大鼠组织切片上没有显示出良好的IHC-信号。 在我们的内部测试中,我们在小鼠组织阵列(乳房、脾脏、肺、胃、肌肉、胰腺、肝脏、结肠、大脑、肾脏)上测试了抗体。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 ab203371年 ) -
阳性对照 WB:MCF-7和T47-D细胞裂解物; 人子宫和卵巢癌组织裂解物; 小鼠和大鼠子宫裂解物; 大鼠和小鼠垂体全组织溶解。 IHC-P:人乳腺癌和子宫内膜癌组织; 人类子宫内膜和乳腺组织。 ICC/IF:MCF-7细胞、4T1细胞和GH3细胞。 流式细胞仪(内部):MCF-7细胞。 ChIP:由MCF-7+雌二醇30分钟细胞制备的染色质。 ChIC/CUT&RUN:MCF7单元。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 E115号机组 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
检测试剂盒 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
共轭试剂盒 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 核激素受体。 类固醇激素及其受体参与真核基因表达的调节,并影响靶组织中的细胞增殖和分化。 可以激活TFF1的转录活性。 -
序列相似性 属于核激素受体家族。 NR3亚家族。 包含1个核受体DNA结合域。 -
结构域 由三个结构域组成:一个调制N端结构域、一个DNA结合结构域和一个C端配体结合结构域。 -
翻译后修饰 细胞周期蛋白A/CDK2磷酸化。 磷酸化可能增强转录活性。 糖基化; 含有N-乙酰氨基葡萄糖,可能是O-连接的。 无所不在。 OTUB1脱去泛素。 在Arg-260处由PRMT1二甲基化。 甲基化可能有利于细胞质定位。 棕榈酰化(亚型3)。 未生物素化(异构体3)。 -
细胞定位 核心。 细胞质。 细胞膜。 一小部分与内膜和细胞核有关。 细胞质。 细胞膜。 通过棕榈酰化与内膜相关。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 2099 人类 Entrez基因: 13982 鼠标 Entrez基因: 24890 老鼠 Omim公司: 133430 人类 瑞士保护银行: P03372号 人类 瑞士保护银行: 第19785页 鼠标 瑞士保护银行: P06211号 老鼠 尤尼金: 208124 人类
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别名 7*/654亚型抗体 7*/819 2亚型抗体 7*/822亚型抗体
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图片
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4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100透性4T1(小鼠乳腺癌上皮细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/200稀释度下用抗雌激素受体α一级抗体(ab32063)标记雌激素受体α,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )二级抗体,稀释度为1/1000(2.0µg/mL)。 共聚焦图像显示4T1细胞的细胞质和细胞核染色。 抗α-管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor ® 594) ( 约195889年 )用于在1/200稀释度(2.5µg/mL)下对微管蛋白进行复染。 核反染为DAPI(蓝色)。 二级抗体唯一控制为:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/1000(2.0µg/mL)。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透性GH3(大鼠垂体上皮细胞系)细胞的免疫荧光分析,在1/200稀释度下用抗雌激素受体α一级抗体(ab32063)标记雌激素受体α,然后用山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )二级抗体,稀释度为1/1000(2.0µg/mL)。 共聚焦图像显示GH3细胞的细胞质和细胞核染色。 抗α-管蛋白小鼠单克隆抗体-微管标记(Alexa Fluor ® 594) ( 约195889年 )用于在1/200稀释度(2.5µg/mL)下对微管蛋白进行复染。 核反染为DAPI(蓝色)。 二级抗体唯一控制为:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor ® 488),稀释度为1/1000(2.0µg/mL)。 -
MCF-7细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析,用纯化的ab32063标记1/1000的雌激素受体α。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 用488-结合羊抗兔IgG(1/1000)作为二级抗体。 这些细胞与 约7291 ,小鼠抗微管蛋白(1/1000)使用 约150120 ,Alexa Fluor ® 594-结合羊抗鼠IgG(1/1000)作为二级抗体。 细胞核用DAPI(蓝色)复染。 对照1:一级抗体(1/1000)和二级抗体, 约150120 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/1000)。 -
稀释1/5000用ab32063对石蜡包埋的人子宫内膜组织进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP聚合物)。 用苏木精对样品进行反染色。 抗原检索通过热介导使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 人子宫内膜细胞核染色。 -
用ab32063对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学染色,稀释度为1/5000。 使用的二级抗体是山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP聚合物)。 用苏木精对样品进行反染色。 抗原检索通过热介导使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 人类乳腺癌细胞核染色。 -
稀释1/5000用ab32063对石蜡包埋的人类乳腺组织进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP聚合物)。 用苏木精对样品进行反染色。 抗原检索通过热介导使用 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 人类乳房上的核染色。 -
用纯化的ab32063以1/200的工作稀释度对石蜡包埋的人子宫内膜癌进行免疫组织化学染色。 使用的二级抗体是 ab97051型 ,HRP山羊抗兔IgG(H+L),1/500。 用苏木精对样品进行反染色。 使用pH 9.0的Tris-EDTA缓冲液进行抗原检索。 -
抗雌激素受体α(ab32063,未纯化)1:50稀释液对人乳腺癌的免疫组织化学分析 -
所有车道: 抗雌激素受体α抗体[E115]-ChIP等级(ab32063),1/200稀释 车道1: 人子宫组织裂解物 车道2: 人肾组织裂解物 3号车道: 人脑组织裂解物 车道4: 小鼠子宫组织裂解物 车道5: 小鼠卵巢组织裂解物 车道6: 小鼠肾组织裂解物 7号车道: 小鼠脑组织裂解物 第8车道: 大鼠子宫组织裂解物 9号车道: 大鼠卵巢组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG(HRP)与人IgG在1/2000稀释度下具有最小交叉反应性 预测的带宽大小: 67千帕 观察到的波段大小: 67千帕 暴露时间: 180秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 ER66在子宫中高表达,在卵巢中中等表达,在肾、肺、脑、肝、心脏中低表达(PMID:20861365、24977106、23675257、23940668、22070562),特别是在雄性或幼龄雌性动物的组织中表达较低(PMID:26384003、23940.68)。 ab32063不适合于在蛋白质印迹中检测卵巢和雌激素受体α表达水平低的组织。 -
所有车道: 抗雌激素受体α抗体[E115]-ChIP等级(ab32063),稀释度为1/1000 车道1: MCF7(人乳腺癌上皮细胞)。 全细胞裂解物 车道2: T-47D(人乳腺导管癌上皮细胞)。 全细胞裂解物 3号车道: MDA-MB231(人乳腺癌上皮细胞)全细胞裂解物(阴性对照) 车道4: HepG2(人肝癌上皮细胞)全细胞裂解物(阴性对照) 车道5: 人子宫全组织裂解物 车道6: 人卵巢全组织裂解物 7号车道: 人卵巢癌全组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 67千帕 观察到的波段大小: 68千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 50秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 MCF7(人乳腺癌上皮细胞)细胞,用无酚红培养基和5%木炭剥离的FBS处理3天,然后用β-雌二醇(10 nM 45 min)和5µg ab32063进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 MCF7(人乳腺癌上皮细胞)细胞,用无酚红培养基和5%木炭剥离的FBS处理3天,然后用β-雌二醇(10 nM 45 min)和5µg ab32063进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
使用最终浓度为700 ng/mL的pAG-MNase、2.5 x 10^5 MCF7(人乳腺癌上皮细胞)细胞,用无酚红培养基和5%木炭剥离的FBS处理3天,然后用β-雌二醇(10 nM 45 min)和5µg ab32063进行ChIC/CUT&RUN。 所得DNA在Illumina NovaSeq 6000上测序,测序深度为1000万读。 阴性IgG对照 约172730 图中还显示了。 日内瓦大学拥有与ChIC(染色质免疫清洗)方法相关的专利。 -
使用人乳腺癌MCF7细胞中未纯化的ab32063结合雌激素受体α进行ChIP分析。 用1%甲醛交联细胞10分钟。 样品与未稀释的一级抗体在4°C下孵育16小时。 采用实时PCR检测蛋白质结合。 阳性对照:在PS2启动子处测试雌激素处理的MCF7细胞。 阴性对照:在PS2启动子检测IgG-ChIP和乙醇消除细胞。 -
重叠直方图显示未纯化ab32063染色的MCF7细胞(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32063,1/1000稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是Alexa Fluor ® 488山羊抗兔IgG(H+L)( 约150077 )在22°C下以1/2000稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 未标记样本(蓝线)也用作对照。 使用20mW氩离子激光器(488nm)和525/30带通滤波器收集>5000个事件的采集。 该抗体在80%甲醇(5分钟)固定/0.1%PBS-Tween渗透20分钟的MCF7细胞中呈阳性信号。 -
所有车道: 抗雌激素受体α抗体[E115]-ChIP等级(ab32063),稀释度为1/1000 车道1: 大鼠垂体全组织裂解物 车道2: 小鼠垂体全组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 67千帕 观察到的波段大小: 68千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 1 标准 车道:85秒 2 第 车道:32秒 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
用纯化的ab32063以1/250的稀释度对MCF7细胞(用4%PFA固定并用TritonX 100渗透)进行免疫荧光染色。 Alexa Fluor公司 ® 555羊抗兔抗体作为次级抗体,稀释度为1/200。 右侧面板显示DAPI反训练。 -
染色质由MCF-7+β-雌二醇和MCF-7细胞根据Abcam X-ChIP协议制备30分钟。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25μg染色质、4μg纯化ab32063(蓝色)和20μL抗兔IgG琼脂糖珠进行ChIP。 将兔正常IgG添加到珠子对照组(黄色)。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(SYBR方法)定量。 引物位于TFF1基因的第二内含子。 MCF7细胞处理如下: MCF-7饥饿过夜,然后在2%FBS培养基中用10 nMβ-雌二醇处理30分钟。 对照MCF-7饥饿过夜,然后在2%FBS培养基中饥饿30分钟。 底漆信息: 位于TFF1基因的2内含子。 顺序: 前进:5'-agtcctcccaacctt-3' 背面:5'-ttcggccatctct-3'
实验方案
数据表及文件
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数据表下载
文献 (167)
步J 等。 Dalpiclib部分消除了烟叶碱诱导的HER2+HR+乳腺癌ER信号激活。 埃利夫 12:不适用(2023年)。 公共医学:36602226 Namiki T公司 等。 子宫上皮Gp130调控激素反应和上皮重塑,以实现小鼠胚胎成功附着。 科学代表 13:854 (2023). 公共医学:36646738 卢·Y 等。 未分化胚胎细胞转录因子1在乳腺癌中的表达及临床意义。 Transl癌症研究 12:150-162 (2023). 公共医学:36760370 杜Z 等。 卵巢癌患者嘌呤摄入量和全因死亡率:一项前瞻性队列研究的结果。 营养物 15:不适用(2023年)。 公共医学:36839289 冈萨雷斯-加西亚一世 等。 雌二醇通过下丘脑Cited1调节瘦素敏感性以控制进食。 单元格元 35:438-455.e7(2023年)。 公共医学:36889283