抗Ki67(ab15580)
主要功能和细节
兔多克隆至Ki67 适用人群:IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:老鼠、人类 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 至Ki67 -
宿主 兔子 -
特异性 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持人员,他们很乐意提供帮助。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠,人类 预测可用于: 鼠、羊、兔、马、牛、狗、猪、猴、中国仓鼠、普通狨猴、叙利亚仓鼠 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 约15581 ) -
常规说明 Ab15580在ICC/IHC中进行批量测试。 这种抗体可能会导致IHC-Fr性能的变异,但我们可以保证IHC-P的一致性。一些客户已在Western Blot中成功使用ab15580。 像Ki67这样的高分子量蛋白质在WB中可能更难检测。 我们建议几个潜在的优化步骤:加载更多的蛋白质(20µg及以上),使用百分比较低的凝胶和/或三醋酸三钠凝胶,增加抗氧化剂以保持蛋白质减少,减少转移缓冲液中的甲醇和增加十二烷基硫酸钠,以及增加转移时间和电压。 较大的蛋白质比较小的蛋白质更容易降解,因此可能存在较低的分子量条带。 如需更多信息或支持,请联系我们的科学支持团队。 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:98.98%PBS,1%BSA 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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共轭试剂盒 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 核膜解体后,需要维持分散在细胞质中的单个有丝分裂染色体(PubMed:27362226)。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖染色体表面的大部分(PubMed:27362226)。 通过形成空间电荷和静电电荷屏障,防止染色体塌陷成单个染色质团:蛋白质具有高净电荷,充当表面活性剂,分散染色体并实现独立的染色体运动(PubMed:27362226)。 结合DNA,优先选择超螺旋DNA和富含AT-的DNA(PubMed:10878551)。 对有丝分裂染色体的内部结构没有贡献(根据相似性)。 可能在染色质组织中起作用(PubMed:24867636)。 然而,尚不清楚它是在染色质组织中起直接作用,还是维持有丝分裂染色体分散功能的间接结果。 -
序列相似性 包含1个FHA域。 包含16个K167R重复。 包含1个PP1-绑定域。 -
发展阶段 表达优先发生在细胞周期的晚期G1、S、G2和M期,而在G0期细胞中无法检测到抗原(在蛋白水平)(PubMed:6206131)。 在G2期和有丝分裂期间(蛋白质水平)出现最高水平。 在间期,在核仁周围的纤维蛋白缺乏区域形成纤维状结构(PubMed:2674163,PubMed:8799815)。 -
翻译后修饰 磷酸化。 有丝分裂中的高磷酸化(PubMed:10502411,PubMed:10653604)。 高磷酸化形式不结合DNA。 -
细胞定位 染色体。 核心。 细胞核,核仁。 与有丝分裂染色体的表面、染色体周层相关,并覆盖有丝分裂的染色体表面的很大一部分(PubMed:27362226)。 与G1期卫星DNA相关(PubMed:9510506)。 在间期与染色质紧密结合,当染色质结合在浓缩染色体表面时,有丝分裂中染色质结合减少(PubMed:15896774,PubMed:22002106)。 主要定位于核周区的G1期,在后期,也可在整个核内部检测到,主要定位于细胞核基质(PubMed:22002106)。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 4288 人类 Entrez基因: 17345 鼠标 Entrez基因: 246042 老鼠 Omim公司: 176741 人类 瑞士保护银行: 第46013页 人类 瑞士保护银行: E9PVX6型 鼠标 瑞士保护银行: Q61769问题 鼠标 单基因: 689823 人类
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别名 单克隆抗体Ki 67抗体鉴定的抗原 单克隆抗体Ki-67抗体鉴定的抗原 抗原KI-67抗体
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图片
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用免疫组织化学方法(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)对含有副甲醛的人腭扁桃体组织进行分析。 在1/500稀释度下用ab15580染色。 使用的二级抗体为生物素化山羊抗狂犬病IgG抗体BA-100,稀释度为1/200。 用5%血清在21°C下封闭1小时。 将样品与初级抗体和5%正常山羊血清在4°C下孵育19小时。 抗原回收方法为热介导,柠檬酸盐。 -
ab15580染色Mef1细胞中的Ki67。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下以0.5µg/ml的ab15580和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,显示单个共焦截面。 -
HeLa细胞中Ki67的ab15580染色。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下以0.5µg/ml的ab15580和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用4%多聚甲醛固定的细胞(10分钟)。 用高含量分析仪(Operetta CLS,Perkin Elmer)获取图像,并显示共焦切片的最大强度投影。 -
小鼠脾脏福尔马林固定石蜡包埋组织切片ab15580染色的IHC图像,在Leica Bond上进行 TM(TM) 系统使用标准方案B。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6)进行热介导抗原回收预处理20分钟。 然后在室温下用ab15580(5µg/ml)培养该切片15分钟。 用山羊抗兔生物素化二级抗体检测初级抗体,并用HRP偶联ABC系统进行可视化。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 -
用浓度为0.5µg/ml的ab15580对福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体标记Ki67进行免疫组织化学分析。免疫染色是在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上使用OptiView DAB IHC检测试剂盒进行的。 使用ULTRA细胞调节液(CC1 pH8.5)进行热介导抗原回收32分钟。 ab15580抗Ki67抗体在37°C下孵育16分钟。 切片用苏木精II复染。 图像插图显示仅二级抗体对照组无染色 -
在ICC分析中,使用稀释度为1/200的ab15580和驴抗兔Alexa Fluor®568二级抗体标记Ki67(绿色)的副甲醛固定兔细胞(视网膜)。 使用正常驴血清作为阻断剂,在4℃下持续15小时。 将组织浸泡在4%多聚甲醛中,在4摄氏度下固定过夜。 然后将组织包埋在10%琼脂糖中,并在100微米处切片。 切片在2N HCL中放置1小时,然后开始免疫细胞化学。 Ki-67(分裂细胞为红色)。 -
在Leica Bond上进行的人脾脏福尔马林固定石蜡包埋组织切片中Ki67染色的IHC图像 TM(TM) 系统使用标准方案F。使用柠檬酸钠缓冲液(pH6)进行热介导抗原回收预处理20分钟。 然后在室温下用ab15580(1µg/ml)孵育该切片15分钟,并使用HRP共轭紧凑聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 对于其他IHC染色系统(自动化和非自动化),客户应优化可变参数,如抗原回收条件、初级抗体浓度和抗体孵育时间。 -
ab15580染色野生型HAP1细胞中的Ki67(顶部面板)和Ki67敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用1μg/ml浓度的ab15580培养细胞,并 公元195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用 山羊抗兔IgG Alexa Fluor ® 488 ( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 -
SO后24和48小时在稳定状态下收集的小鼠气管上皮共聚焦图像 2 受伤。 组织切片用UHRF1和Ki67(增殖标记物)联合染色。 使用ab15580以1:1000的稀释度对Ki67进行染色 -
NADA(N-花生四烯酸多巴胺)处理的SK-N-SH细胞中Ki67的ab15580染色( ab120099年 )国际商会。 如文献所述,Ki67表达减少与NADA(N-花生四烯酸多巴胺)浓度增加相关。 细胞在37°C的培养基中培养10分钟,培养基中含有不同浓度的 ab120099年 (NADA(N-花生四烯醇多巴胺)),室温下用4%甲醛固定10分钟,室温下再用含10%山羊血清、0.3M甘氨酸、1%牛血清白蛋白和0.1%吐温的PBS封闭2小时。 用ab15580(1µg/ml)对处理过的细胞进行染色,在4°C的含1%BSA和0.1%吐温的PBS中过夜。 A类 山羊抗兔DyLight 488 secondary 抗体( 约96899 )以1/250稀释液作为二级抗体。 细胞核用DAPI复染,显示为蓝色。 -
小鼠(P0)嗅球、肾小球外层的荧光共聚焦显微镜(20x)显示Ki67免疫反应性(ab15580;1/1000;RT过夜,0.25%TX-100无阻断步骤),使用次级山羊抗兔荧光抗体(Alexa Fluor 488;RT 1/300 2h)。 -
用IHC-P(甲醛固定石蜡包埋切片)在人结肠组织切片中对Ki67-Proliferation Maker进行ab15580染色。 用甲醛固定组织样品,并在25°C下用10%山羊血清封闭30分钟。 抗原检索是通过目标检索解决方案中的热调解进行的。 将样品与一级抗体1/5000(TBST)在25°C下孵育1小时。 -
用免疫组织化学方法(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)对人皮肤组织切片中Ki67-增殖标记物进行ab15580染色。 用多聚甲醛固定组织,并在25°C下用4%血清封闭30分钟; 抗原回收是在柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)中通过热调解进行的。 将样品与一级抗体(封闭缓冲液中的5µg/ml)在4°C下孵育16小时。 使用德克萨斯州红山羊抗兔IgG多克隆(1/100)作为二级抗体。 -
SK-N-SH细胞被允许生长到融合状态,然后血清饥饿48小时并主要进入G0。 然后将细胞固定在多聚甲醛上,并以1/1000的稀释度用抗Ki67(ab15580)进行免疫荧光标记。 大多数细胞很少或没有Ki67染色,表明它们处于G0期(红细胞)。 然而,两个细胞显示出强烈的核仁Ki67染色,表明它们仍在循环(绿色细胞)。 DNA用DAPI染色,显示为红色。Ki67染色显示为绿色。 x 63倍放大。 在HeLa细胞的非同步群体中也观察到了类似的结果。 Ki67染色定位于核仁周围和增殖细胞的整个核质。 (此数据未显示,但可根据要求提供)。 -
ab15580 at 1/50染色人脐动脉内皮细胞。 组织被多聚甲醛固定并封闭,然后用皂苷渗透并与抗体孵育16小时。 以FITC结合的山羊抗兔IgG作为次级抗体。 合并后的图像显示了指数细胞总数中表达Ki67的细胞。 -
ab15580染色的人皮肤癌FFPE切片的IHC图像。 在125°C下,使用压力锅热介导抗原回收和柠檬酸钠缓冲液(pH6)预处理切片30秒。 切片在室温下与ab15580以1:200的稀释度孵育1h,并使用HRP缀合的聚合物系统进行检测。 DAB被用作显色剂。 然后用苏木精对切片进行复染,并用DPX固定。 -
2000年1月用ab15580标记Ki67的甲醛固定石蜡包埋小鼠肿瘤组织切片的免疫组织化学分析。 二级抗体为生物素结合山羊多克隆载体,稀释度为1/250。
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文献 (4218)
Tan G(切线G) 等人。 脾酪氨酸激酶促进由hsa_circ_0006417/miR-377-3p轴调节的甲状腺乳头状癌的进展。 环境毒物 39:421-434 (2024). 公共医学:37792549 夏Y 等人。 炎症因子IL1α通过Grin2c/Ca2+/CaMK2b途径诱导脊髓损伤星形胶质细胞异常增殖。 神经科学公牛 40:421-438 (2024). 公共医学:37864744 Chong ACN公司 等人。 检查点激酶2控制胰岛素分泌和葡萄糖稳态。 自然化学生物 20:566-576 (2024). 公共医学:37945898 徐Y 等人。 DOCK1不足通过DUSP4-ERK途径干扰滋养层功能和妊娠结局。 生命科学联盟 7:N/A(2024年)。 公共医学:37967942 卡斯维尔DR 等人。 APOBEC3B在肺癌演变和靶向肿瘤治疗耐药中的作用。 自然基因 56:60-73 (2024). 公共医学:38049664