AXIN2和/或WIF1的再表达通过AKT失活抑制WNT/β-CATENIN靶基因的表达。
A中，用任一对照转染Pfeiffer细胞(Ctrl键)载体（pCMV-entry）或pCMV-entry/AXIN2和/或pCMV entry/WIF1 72小时，以及AXIN2型,WIF1系列,循环蛋白D1，c-MYC公司、和苏维文通过实时RT-PCR进行分析。本实验使用三个生物重复，每个重复三个技术重复，以及β-肌动蛋白用作对照。所示数据代表平均值±S.D.，**表示第页值<10−3.B、，用所示抗体通过免疫印迹分析从对照未感染或转染Pfeiffer细胞制备的RIPA提取物（20μg）。检测到β-肌动蛋白显示等负荷。C、，使用RIPA提取物（20μg）通过免疫印迹法测定活性磷酸化AKT（Thr-450或Ser-473）和非活性AKT以及活性GSK3β或非活性磷酸化GSK3？（Ser-9）的水平由用表达对照shGFP或shPRMT5的慢病毒感染的Pfeiffer细胞和用对照DMSO或CMP-5处理的Pfeiffer细胞制备。未感染和CMP-6处理的Pfeiffer细胞均被用作内部对照。在感染后72小时或治疗后48小时制备RIPA细胞提取物。D、，用控制二甲基亚砜或增加AKT抑制剂IV浓度（0.2和2μ米)和mRNA水平循环蛋白D1，c-MYC公司、和苏维文使用基因特异性引物和探针集通过实时RT-PCR进行评估，如A.E、，Pfeiffer细胞按照D类和RIPA提取物（20μg）使用所示抗体进行Western blotting分析。检测到β-肌动蛋白显示等负荷。
