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图2。

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PRMT5表观遗传调节AXIN2型WIF1系列,并且它的抑制激活了两个靶基因。 A、,使用抗H3(Me)抗体免疫沉淀Pfeiffer细胞的交联染色质2)R8抗体,并由ChIP-Seq按照“实验程序”进行分析。H3(Me)的富集2)R8开启AXIN1型AXIN2型、和WIF1系列使用两个生物复制品(H3(Me2)R8-1和H3(Me2)R8-2)。H3(Me的峰值检测2)报告R8富集蓝色与控制输入相比,后者在灰色。B中,使用预免疫对Pfeiffer细胞的交联染色质进行ChIP分析(圆周率)、抗PRMT5、抗H3(Me2)R8或抗H4(Me2)R3抗体。ChIP实验使用两个生物复制品和三个技术复制品进行AXIN1型AXIN2型、和WIF1系列实时PCR检测启动子序列。相对于PI样品计算每个抗体的折叠富集。每个中的数据图表表示平均值±S.D。C、,的级别AXIN1型AXIN2型、和WIF1系列使用基因特异性引物和探针集,通过实时RT-PCR在正常B细胞(静止和激活)和指示的转化B细胞中测量mRNA。本实验采用三个生物重复和三个技术重复进行18秒rRNA作为对照。所示数据代表平均值±S.D。D、,使用所示抗体通过Western blotting分析正常(静止和激活)和转化B细胞的RIPA提取物(20μg)。抗β-肌动蛋白用于显示等负荷。β-肌动蛋白负荷控制B类D类是相同的,因为这些数据来自同一个实验。E、,的级别PRMT5项目AXIN1型AXIN2型、和WIF1系列用两个对照组的总RNA测量mRNA(Ctrl键)未感染的JeKo、Pfeiffer和SUDHL-2细胞或感染shGFP或shPRMT5慢病毒的淋巴瘤细胞C类.**表示第页值<10−3.F、,使用从感染后72 h的对照未感染和感染(shGFP或shPRMT5)JeKo、Pfeiffer和SUDHL-2淋巴瘤细胞系制备的RIPA提取物(20μg),通过Western blotting分析AXIN1、AXIN2和WIF1蛋白水平。抗β-肌动蛋白用于显示等负荷。G中,使用来自对照shGFP或shPRMT5感染淋巴瘤细胞系的交联染色质进行ChIP分析。使用指示的抗体测定PRMT5及其诱导的表观遗传标记的富集,并使用PI抗体作为对照。使用三个生物复制品重复该实验,每个生物复制品有三个技术复制品,数据如B类.

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