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2007年3月28日在线发布。 数字对象标识:10.1093/nar/gkm175

图5。

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中的H3K4me3缺陷不是4Δ细胞独立于Set1p复合物的直接调节。(一个)Set1p复合物成分的mRNA水平。从指数增长的BY4741和不是4Δ,并使用所示探针进行northern blot分析。(B类)纯化的Set1p复合物的亚单位组成。含有或缺乏菌株编号4并表达TAP标记的Bre2p用于纯化Set1p复合物(上面板)。western blot分析检查Bre2-TAP蛋白的相等表达(下表)。使用LC-MS/MS对所示蛋白质进行鉴定不是4与WT相比,Δ纯化。质谱显示,这些条带包含非相关溶酶体蛋白。我们认为这是一种提纯的人工制品,可能是由于WT和不是4Δ单元。(C类)使用纯化的Set1p复合物进行组蛋白甲基转移酶分析。使用越来越多的Set1p复合物或模拟纯化对照物甲基化可溶性组蛋白(来自小牛胸腺)在体外样品在15%SDS-PAA凝胶上分离,用考马斯染色,干燥并暴露于X射线胶片。(D类)体外合成的预甲基化组蛋白H3-尾肽的甲基化。前甲基肽被用作在体外使用从WT或不是4Δ单元。样品在20%SDS-PAA凝胶上分离,干燥并暴露在X射线胶片上。使用ImageQuant软件量化信号,并在背景校正后表示为任意单位。

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  • 图5。
  • 图6。
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