主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR25160-22]至PLOD2/LH2 适用于:Flow Cyt(Intra)、IHC-P、ICC/IF、WB、IP、斑点印迹 敲除已验证 反应对象:人类
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR25160-22]至PLOD2/LH2 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 不与反应: 老鼠,老鼠 -
免疫原 重组片段。 这些信息是Abcam和/或其供应商的专有信息。 -
阳性对照 WB:野生型HEK293T、HeLa、A431、HeLa、DU 145、Caco-2、人类睾丸、人类结肠癌和人类肝癌裂解物。 IHC-P:人肝癌及癌旁组织,人透明肾癌及癌旁及组织。 ICC/IF:HeLa细胞。 流式细胞仪(内部):HEK293T细胞。 IP:HeLa电池。 Dot:纯化人PLOD2/LH2重组蛋白。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存温度为-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),59%PBS,0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR25160-22型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
相关产品
应用
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靶
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功能 在胶原蛋白的-Xaa-Lys-Gly-序列中形成羟基赖氨酸残基。 这些羟基赖氨酸作为碳水化合物单元的附着位点,对分子间胶原交联的稳定性至关重要。 -
组织特异性 在胰腺和肌肉中高度表达。 异构体1和异构体2在大多数被检测的细胞类型中表达。 异构体2在皮肤、肺、硬脑膜和主动脉中特异性表达。 -
疾病相关 PLOD2缺陷是2型布鲁克综合征(BRKS2)的病因[MIM:609220]。 布鲁克综合征(Bruck syndrome)也称为先天性关节挛缩性成骨不全,是一种常染色体隐性疾病,以全身性骨质减少、出生时关节挛缩、骨骼脆弱和身材矮小为特征。 它与成骨不全的区别在于没有听力损失和牙本质形成不全,以及马蹄内翻足和先天性关节局限性。 分子缺陷是骨胶原的异常交联,这是由于I型胶原末端肽中赖氨酸残基的羟化不足,而三螺旋中的赖氨酸残留物是正常的。 -
序列相似性 包含1个Fe2OG双加氧酶结构域。 -
细胞定位 粗糙的内质网膜。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 -
别名 2-氧戊二酸-5-双加氧酶2抗体 LH2抗体 赖氨酸羟化酶2抗体
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图片
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所有车道: 稀释1/1000的抗-PLOD2/LH2抗体[EPR25160-22](ab314640) 车道1: 野生型HEK293T(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: PLOD2敲除HEK293T全细胞裂解物 车道3: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: A431(人表皮样癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(800CW)和山羊抗小鼠IgG H&L(680RD),稀释度为1/20000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 每车道20µg的裂解液。 Western blot:稀释1/1000的抗-PLOD2/LH2抗体(ab314640)染色,以绿色显示; 小鼠抗GAPDH抗体6C5( 约8245 )以1/20000稀释度加载控制染色,以红色显示。 在Western blot中,ab314640被证明与PLOD2/LH2特异结合。 在野生型HEK293T细胞裂解物(1区)中观察到95 kDa的靶点,而在PLOD2敲除细胞系中未观察到该大小的信号 ab266279 (敲除细胞裂解物 约258591 )(ane 2)。 为了生成此图像,首先将样品置于SDS-PAGE凝胶上,然后转移到固定化-FL PVDF膜上。 在4°C下与一级抗体孵育过夜之前,在荧光蛋白印迹(基于TBS)封闭溶液中封闭膜。 斑点在TBS-T中清洗,与二级抗体山羊抗兔IgG H&L 800CW和山羊抗鼠IgG H&L 680RD在室温下以1/20000稀释培养1小时,然后再次清洗,然后成像。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-PLOD2/LH2抗体[EPR25160-22](ab314640) 车道1: 干扰siRNA对照全细胞裂解物转染HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞) 车道2: 用特异性靶向PLOD2全细胞裂解物的siRNA转染Hela 车道3: DU145(人前列腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道4: Caco-2(人大肠腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 曝光时间:1-3车道:70秒; 4号车道:180秒 -
所有车道: 稀释1/1000的抗-PLOD2/LH2抗体[EPR25160-22](ab314640) 车道1: 人睾丸组织裂解物 车道2: 人结肠癌组织裂解物 车道3: 人肝癌组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗兔IgG(HRP)与人IgG在1/2000稀释度下具有最小交叉反应性 预测的带宽大小: 85千帕 观察到的频带大小: 95千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 81秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST 37kDa左右的带的身份尚不清楚。 在Western blot中,抗-GAPDH抗体[EPR16891]-负载控制( 约181602 )1/200000稀释液染色。 -
对石蜡包埋的人肝细胞癌和邻近组织进行免疫组织化学分析,用ab314640在1/2000(0.257 ug/ml)的浓度下标记PLOD2/LH2,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 (A)人肝癌组织的细胞质染色和(B)相邻组织的极弱染色(PMID:33014843)。 该切片在室温下与ab314640孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
石蜡包埋人透明细胞肾细胞癌和邻近组织组织标记PLOD2/LH2的免疫组织化学分析,在1/2000(0.257 ug/ml)时使用ab314640,然后使用现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 (A)人透明细胞肾癌组织的细胞质染色和(B)相邻组织的极弱染色(PMID:33287763)。 该切片在室温下与ab314640孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
石蜡包埋的免疫组织化学分析(A)野生型HEK293T(人胚胎肾上皮细胞)细胞颗粒(B)PLOD2敲除HEK293T细胞颗粒组织,以1/2000(0.257 ug/ml)的ab314640标记PLOD2/LH2,然后进行即用LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 (A)野生型HEK293T细胞颗粒上的细胞质染色,(B)PLOD2敲除的KEK293T细胞颗粒上没有染色。 该切片在室温下与ab314640孵育30分钟。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 苏木精复染。 仅二级抗体对照:二级抗体是现成的LeicaDS9800(Bond™Polymer Refine Detection)。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 -
用ab314640以1/50(10.28 ug/ml)稀释标记PLOD2/LH2的4%对甲醛固定的0.1%TritonX-100透化HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,随后 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附抗体,稀释度为1/1000(2ug/ml)(绿色)。 共聚焦图像显示Hela细胞系中细胞质染色与内质网标记共定位。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 使用抗KDEL小鼠单克隆抗体在1/100(1 ug/ml)稀释度(红色)下进行复染。 核染色为DAPI(蓝色)。 仅二级抗体对照:二级抗体为 约150081 山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)以1/1000(2ug/ml)稀释度预先吸附。 -
PLOD2/LH2从0.35 mg HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液中以1/30稀释度(0.35 mg裂解液中2 ug)用ab314640免疫沉淀。 使用ab314640在1/1000稀释度下对免疫沉淀进行Western blot。 用于IP二级抗体(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )以1/5000的稀释度使用。 车道1:HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 通道2:HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液中的ab314640 IP 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解液中的ab314640 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:180秒 -
采用1:1000(0.503 ug/ml)的ab314640和山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合物对PLOD2/LH2进行斑点杂交分析( ab97051型 )稀释度为1:100000。 通道1:His-tagged人PLOD1/LH1重组蛋白 通道2:纯化人PLOD2/LH2重组蛋白 曝光时间:180秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST
实验方案
数据表及文件
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SDS下载 -
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