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.1998年11月18日;252(2):440-4.
doi:10.1006/bbrc.1998.9671。

mTOR免疫沉淀物中磷酸蛋白和蛋白激酶活性的表征

附属公司

mTOR免疫沉淀物中磷酸蛋白和蛋白激酶活性的表征

T西沼等。 生物化学-生物物理研究委员会. .

摘要

雷帕霉素的哺乳动物靶点mTOR被证明是翻译效应器的上游调节器。在本研究中,为了检测参与mTOR信号传导的潜在分子,使用来自HEK293细胞的mTOR免疫沉淀物进行了体外磷酸化检测。除了mTOR的自磷酸化外,在mTOR免疫沉淀物中还观察到32P并入80-kDa(pp80)和175-kDa(pp175)条带。如前所述,还检测到针对重组eIF-4E结合蛋白1(4E-BP1)的蛋白激酶活性。当在洗涤剂Nonide P-40存在下制备HEK293细胞的mTOR免疫沉淀物时,4E-BP1激酶活性和32P并入pp175的量显著降低,而mTOR和32P融入pp80的磷酸化没有改变。这些结果提出了mTOR可能与蛋白辅因子相关的可能性,其中一些可能参与调节与mTOR相关的激酶活性。

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