Phosphorylation state-specific antibodies: applications in investigative and diagnostic pathology

doi:10.1016/S0002-9440(10)63525-0

审查

.2003年11月；163(5):1687-98.

doi:10.1016/S0002-9440（10）63525-0。

磷酸化状态特异性抗体：在研究和诊断病理学中的应用

詹姆斯·曼德尔¹

附属公司

PMID： 14578166
预防性维修识别码：项目经理1892416
内政部： 10.1016/S0002-9440（10）63525-0

审查

磷酸化状态特异性抗体：在研究和诊断病理学中的应用

詹姆斯·曼德尔. 美国病理学杂志. 2003年11月.

.2003年11月；163(5):1687-98.

doi:10.1016/S0002-9440（10）63525-0。

作者

詹姆斯·曼德尔¹

附属

¹弗吉尼亚大学病理学系（神经病理学）和神经科学研究生项目，弗吉尼亚州夏洛茨维尔，弗吉尼亚州22908，美国。Jwm2m@virginia.edu

PMID： 14578166
预防性维修识别码：第1892416页
内政部： 10.1016/S0002-9440（10）63525-0

摘要

直到最近，蛋白质磷酸化的研究还局限于均质组织中酶活性的生化研究。数百种磷酸化状态特异性抗体（PSSA）的可用性现在使得原位研究蛋白质磷酸化成为可能，并为研究和诊断病理学开辟了许多令人兴奋的机会。这篇综述阐明了PSSA的功效，特别是在人类疾病和动物模型的免疫组织化学应用中。包括抗体特异性和磷酸表位的不稳定性在内的技术考虑因素，以及潜在的缺陷，通过案例研究加以说明。在肿瘤学领域，PSSA可能被证明在直接证明针对蛋白激酶级联的化疗的疗效方面特别有价值。PSSA的新应用也开始揭示炎症、变性和毒素诱导疾病的分子机制。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
使用PSSA说明蛋白质磷酸化的潜在陷阱和意外时空复杂性。**A–D：**大组织标本中磷酸化-ERK免疫反应的人为损失。大于1厘米的胶质瘤标本有时在外围几毫米处显示出强烈的磷酸化ERK染色，但在核心处则没有(A类间变性星形细胞瘤；C类多形性胶质母细胞瘤）。磷酸化依赖性ERK抗体的免疫反应性在整个肿瘤标本中始终保持不变(B类和天)这表明，磷酸化表位可能会因固定缓慢而在大样本的核心中进行去磷酸化而丢失。酒吧在里面A类，1 cm，适用于**A–D**.E–F：磷酸化-MEK和磷酸化-ERK免疫组织化学的比较揭示了信号级联中成分激活的意外复杂性。磷酸化-MEK抗体（细胞信号技术）显示人类胶质母细胞瘤中有丝分裂细胞的强选择性染色(E类,箭头). 相反，相邻切片的磷酸化-ERK免疫染色显示非有丝分裂细胞中的细胞质和核染色(F类). 在人类和啮齿动物的几个非肿瘤组织中证实了这些模式（J.W.Mandell，未发表的数据）。Western blot和肽竞争对照均证实了抗体特异性（数据未显示）。最近发现，这种明显的悖论是由于MEK的有丝分裂特异性分裂导致其在有丝分裂中高度磷酸化，但与ERK激活不耦合。酒吧在里面E类，50μm，适用于**E–F**.

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