跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2003年8月；23(16):5780-9.
doi:10.128/MCB.23.16.5780-5789.2003。

肝X受体/共升压复合物在ABCA1和SREBP1基因表达调控中的启动子特异性作用

白兰地·L·瓦格纳 1, 安娜贝尔·F·瓦利多, 冈绍, 克里斯·戴奇, 埃里克·D·比肖夫, 玛丽·彼得罗夫斯基, 克里斯汀·杰普森, 宋熙白, 理查德·海曼, 迈克尔·罗森菲尔德, 伊拉·舒尔曼, 克里斯托弗·K·格拉斯
附属公司

肝X受体/共升压复合物在ABCA1和SREBP1基因表达调控中的启动子特异性作用

白兰地·L·瓦格纳等。 摩尔细胞生物学. 2003年8月.

摘要

肝脏X受体（LXR）调节胆固醇和脂肪酸稳态相关基因的表达，包括ATP-结合盒转运蛋白A1（ABCA1）和固醇反应元件结合蛋白1（SREBP1）的基因。LXR的缺失导致巨噬细胞和肠道中ABCA1基因的去表达，而SREBP1c基因保持转录沉默。在这里，我们报告了LXR缺陷小鼠的高密度脂蛋白（HDL）胆固醇水平升高，这表明ABCA1和可能其他LXR靶基因在选定组织中的去表达足以导致全身水平的HDL生物生成增强。我们提供了一些独立的证据表明，LXR的抑制作用依赖于与核受体辅升压因子（NCoR）和视黄酸和甲状腺激素受体（SMRT）沉默介质的相互作用。虽然NCoR和SMRT的分离导致巨噬细胞中ABCA1基因的去表达，但这不足以去表达SREBP1c基因。这些发现揭示了在胆固醇和脂肪酸稳态相关基因的调节中对辅抑制因子的不同需求，并增加了利用这些相互作用开发选择性调节体内LXR作用的合成配体的可能性。

PubMed免责声明

数字

图1。
图1。
LXRs作为ABCA1表达和胆固醇流出的激活剂和抑制剂发挥作用。（a） LXR表达对血脂的影响。LXR血浆样本+/+和LXR−/−对小鼠进行高密度脂蛋白和甘油三酯含量分析。星号表示LXR−/−值有显著差异(P（P）<0.001）与LXR相比+/+.血浆浓度。，血浆浓度；TG、甘油三酯。（b和c）LXR是腹腔巨噬细胞ABCA1 mRNA和蛋白表达的激活剂和抑制剂。从LXR中分离出腹腔巨噬细胞+/+和LXR−/−如文中所示的鼠标。在用1μM T1317或载体培养细胞18 h后，用RT-PCR（b）和Western blotting（c）分析ABCA1 mRNA和ABCA1蛋白。通过RT-PCR测定的b组ABCA1 mRNA水平归一化为亲环素水平。（d） 在骨髓源性巨噬细胞中，无连锁LXR作为ABCA1和ABCG1表达的抑制剂发挥作用。在分离总RNA和使用所示探针进行Northern印迹分析之前，按照面板b所述处理细胞。（e） 未激活的LXR抑制腹腔巨噬细胞胆固醇流出。在测量ApoAI依赖性胆固醇流出量之前，按照b组所述对细胞进行处理。
图2。
图2。
LXR介导的抑制具有基因和组织特异性。（a） LXR靶基因在LXR中的表达+/+和LXR−/−腹腔巨噬细胞经溶媒或1μM T091317处理。通过RT-PCR分析SREBP1c、SCD-1、LPL和ApoE水平，并将其归一化为亲环素水平。（b） LXR以组织特异性方式抑制ABCA1。LXR公司+/+和LXR−/−每天给小鼠灌胃给予赋形剂或10mg T1317/kg体重，持续7天。在本研究中，每组使用四只小鼠。分离MEF并用载体或1μM T1317培养处理。RT-PCR分析用于测定肠粘膜、肝脏、股四头肌和MEF中ABCA1 mRNA相对于亲环素的水平。
图3。
图3。
LXR抑制基础转录并与辅抑制因子相互作用。（a） 在GAL4反应元件（4×UAS）的四个拷贝和空pCMX载体、单独含有GAL4 DNA结合域（DBD）的质粒或GAL4 DBD与全长LXRα或LXRβ融合的构建物的控制下，用荧光素酶报告子瞬时共转染CV-1细胞。然后用载体或1μM T1317处理细胞过夜。TK，胸苷激酶最小启动子；Luc，荧光素酶。（b） LXRα和LXRβ与NCoR和SMRT的核受体ID相互作用。通过将LXRα或LXRβ配体结合域的VP16融合物与NCoR和SMRT的受体ID1和ID2的GAL4融合物以及荧光素酶报告子在GAL4反应元件的四个拷贝的控制下瞬时共转染CV-1细胞，建立了哺乳动物双杂交系统。在测定报告活性之前，用激动剂处理细胞过夜。L.U.，荧光素酶单位。（c） LXR抑制需要NCoR表达。与NCoR隔离的MEF+/+和NCoR−/−将胚胎与GAL4反应元件-脱落酶报告子和面板a所述的全长LXRα-或LXRβ-GAL4融合构建物瞬时共转染。在无配体的情况下培养过夜后，对细胞进行裂解并分析启动子活性。（d） 用GAL4单杂交系统转染的MEF分析配体的作用。不符合项报告+/+和NCoR−/−MEF转染了与c组相同的结构，然后添加载体或T1317（1μM）。（e） 外源性NCoR的过度表达拯救了NCoR中基础转录的抑制−/−MEF公司。将细胞与面板c所述的构建物以及空载体（pCMX）或全长NCoR（pCMX-NCoR）共同转染。对于面板a至面板e，所有细胞均与巨细胞病毒-β-Gal表达载体共转染，荧光素酶值归一化为β-Gal活性值。在面板e中，每个对照样品（GAL4-DBD转染的细胞）的荧光素酶活性被指定为100%。GAL4-LXRs转染细胞的荧光素酶活性表示为相应对照活性的百分比。
图4。
图4。
RXR以LXR依赖的方式被招募到ABCA1和SREBP1c启动子。骨髓源性巨噬细胞取自LXR+/+和LXR−/−老鼠。每个基因型的对照巨噬细胞均用载体处理。在LXR中评估LXR配体的作用+/+用T1317（1μM）刺激细胞90分钟。用RXRα特异性抗体和对照兔免疫前血清进行ChIP分析。使用ABCA1和SREBP1c启动子的LXRE区和RARβ2启动子的控制RAR反应元件区的特异性引物进行PCR分析。通过密度计对条带进行定量。首先将获得的免疫沉淀产物的强度值归一化为其各自的输入控制。所示比率表示从每个标准化值得出的商以及从未刺激野生型细胞获得的值。
图5：。
图5：。
ABCA1和SREBP1c启动子的ChIP分析。来自LXR的骨髓源巨噬细胞+/+和LXR−/−在ChIP分析之前，用载体或1μM T1317对小鼠进行不同时间长度的治疗（0至240分钟）。如本文所示，使用兔免疫前血清或对NCoR（a和c）或acH3和acH4（b和d）特异的抗体来免疫沉淀ABCA1、SREBP1c、hsf2和RARβ2启动子。通过密度测定法对条带进行定量。首先将获得的免疫沉淀产物的强度值归一化为其各自输入控制的强度值。所示比率表示从每个标准化值得出的商以及从未刺激野生型细胞获得的值。
图6。
图6。
LXR中ABCA1和SREBP1c基因差异去表达模型−/−巨噬细胞。（a） EMSA检测从骨髓源巨噬细胞制备的核提取物中的DNA结合活性，该核提取物识别ABCA1启动子中的E-box。这种活性被针对USF1或USF2的抗体超转移，而不是针对LXRα的抗体。（b） 使用针对USF1或USF2的抗体对ABCA1和SREBP1c启动子进行ChIP分析。这两种抗体免疫沉淀ABCA1启动子，但不沉淀SREBP1c启动子。（c） LXR中ABCA1基因的去抑制作用−/−巨噬细胞被认为是由于其他序列特异性激活物的结合，如USF1和USF2，能够招募含HAT的复合物。这些因子在缺乏LXR/NCoR复合物的情况下被释放，足以驱动ABCA1表达。相反，含有HAT的辅激活子似乎也被招募到SREBP1c基因中，但在缺乏激动剂结合的LXR的情况下，这些因子无法刺激转录。辅酶A，辅活化因子。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

查看所有类似文章

引用人

  • 非脂原性ABCA1诱导剂（NLAI）治疗阿尔茨海默病在表达人的小鼠模型中的验证APOE3/APOE4.
    Velma GR、Laham MS、Lewandowski C、Valencia-Olvera AC、Balu D、Moore A、Ackerman-Berrier M、Rychetsky P、Penton C、Musku SR、Annadurai A、Sulaiman MI、Ma N、J Thatcher GR。 Velma GR等人。 医学化学杂志。2024年9月12日；67(17):15061-15079. doi:10.1021/acs.jmedchem.4c00733。Epub 2024年8月27日。 医学化学杂志。2024 PMID：39191400
  • 核受体在食管癌中的功能作用。
    Jayaprakash S、Hegde M、Girisa S、Alqahtani MS、Abbas M、Lee EHC、Yap KC、Sethi G、Kumar AP、Kunnumakara AB。 Jayaprakash S等人。 国际分子科学杂志。2022年9月19日；23(18):10952. doi:10.3390/ijms231810952。 国际分子科学杂志。2022 PMID：36142861 免费PMC文章。 审查。
  • 记住你的A、B、C：阿尔茨海默病和ABCA1。
    Lewandowski CT、Laham MS、Thatcher GRJ。 Lewandowski CT等人。 《药物学报》B.2022年3月；12(3):995-1018. doi:10.1016/j.apsb.2022.01.11。Epub 2022年1月24日。 药物学报B.2022。 PMID：35530134 免费PMC文章。 审查。
  • 脂质代谢：系统性红斑狼疮的免疫调节和治疗前景。
    孙伟，李鹏，蔡杰，马杰，张X，宋毅，刘毅。 Sun W等人。 前免疫。2022年3月18日；13:860586. doi:10.3389/fimmu.2022.860586。eCollection 2022年。 前免疫。2022 PMID：35371016 免费PMC文章。 审查。
  • 靶向肝脏X受体的激动剂型PROTACs的开发。
    Xu H、Ohoka N、Yokoo H、Nemoto K、Ohtsuki T、Matsufuji H、Naito M、Inoue T、Tsuji G、Demizu Y。 徐浩等。 前部化学。2021年5月26日；9:674967. doi:10.3389/fchem.2021.674967。eCollection 2021年。 前部化学。2021 PMID：34124002 免费PMC文章。
查看所有“被引用”文章

工具书类

    1. Boisvert，W.A.、J.Spangenberg和L.K.Curtiss。1995年。通过骨髓移植治疗载脂蛋白E缺乏小鼠的严重高胆固醇血症。临床杂志。投资。92:1118-1124.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Brown，M.S.和J.L.Goldstein。控制膜、细胞和血液中胆固醇含量的蛋白水解途径。程序。国家。阿卡德。科学。美国96:11041-11048。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Celada，A.、P.W.Gray、E.Rinderknecht和R.D.Schreiber。1984年γ-干扰素受体调节巨噬细胞杀瘤活性的证据。《实验医学杂志》160:55-74。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Chen，J.D.和R.M.Evans。一种与核激素受体相互作用的转录辅阻遏物。自然377:454-457。-公共医学
    1. Claudel，T.、M.D.Leibowitz、C.Fievet、A.Tailleux、B.Wagner、J.J.Repa、G.Torpier、J.M.Lobaccaro、J.R.Paterniti、D.J.Mangelsdorf、R.A.Heyman和J.Auwerx。通过激活维甲酸X受体减少载脂蛋白E基因敲除小鼠的动脉粥样硬化。程序。国家。阿卡德。科学。美国98:2610-2615。-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型

MeSH术语