介绍
GeneCopoeia的Luc-Pair™雷尼利亚萤光素酶HT检测试剂盒是一种用于高通量检测雷尼利亚96或384孔板中的荧光素酶(RLuc)活性。Luc-Pair™雷尼利亚荧光素酶HT检测试剂可以直接添加到生长培养基中的细胞中,无需清洗或预处理,并且可以优化用于许多不同的含有血清的培养基(例如DMEM、RPMI1640等)
Luc-Pair™雷尼利亚荧光素酶HT检测试剂盒适用于许多不同的真核细胞类型(例如哺乳动物、无脊椎动物等),并与来自GeneCopoeia、Promega和其他来源的许多Rluc载体兼容。
优势
·增强稳定性–信号稳定性更强,半衰期约为一小时(图1)。适用于高通量分析。
·便利-直接裂解培养基中的细胞,同时测定荧光素酶活性。
·灵活性-在许多类型的培养基中都能很好地工作,即使存在血清(图2)。
·变通能力-使用微孔板发光读取器与许多不同的真核细胞(粘附或悬浮)很好地合作。
·低背景-背景发光非常有限。不需要从读数中减去。
·再现性-浓度范围超过几个数量级的可靠线性结果。
这个Luc-Pair™公司雷尼利亚荧光素酶HT检测试剂盒具有良好的RLuc信号稳定性,半衰期约为1小时(图1)。
图1.稳定性雷尼利亚荧光素酶信号。用Promega pGL4.75报告载体转染HEK 293细胞48小时。如程序所述,使用Luc-Pair Rluc HT检测试剂盒在不同时间点测量Rluc活性。
这个Luc-Pair™公司雷尼利亚荧光素酶HT检测试剂盒在许多不同类型的培养基中都具有良好的信号强度和稳定性,即使存在血清(图2)。
图2。雷尼利亚荧光素酶在各种介质中的活性。用Promega pGL4.75报告载体转染HEK 293细胞48小时。将5×10^4转染细胞悬浮在无血清的DMEM或含有10%血清的以下类型的培养基中:DMEM、RPMI1640、EMEM、IMDM、McCoy'S 5A、F-12K、MEBM、ACL-4、L15、Cho-S-SFMI、NCTC109。雷尼利亚如程序所述,使用Luc-Pair RLuc HT检测试剂盒在不同时间点测量荧光素酶活性。
材料安全数据表
常见问题解答
常见问题:荧光素酶分析
答案:“RLU”代表“相对光单位”。光度计并不能直接测量光输出的光子数量。
答案:所有GeneCopoeia荧光素酶试剂盒都与所有已知的光度计兼容。
答案:如果储存在-20°C下,所有GeneCopoeia荧光素酶试剂至少可以稳定6个月。
答案:为了防止失去活力,最好避免反复冷冻和解冻。我们建议将小份移液管移到新的、清洁的无菌试管中,并将这些小份置于-20°C。一旦你解冻了其中一份,丢弃它,而不是把它放回冰箱。
答案: The高斯(Gaussia)荧光素酶底物,柯来特拉嗪,也是雷尼利亚荧光素酶,所以它与雷尼利亚。但是,科伦特嗪不能与Firefly一起使用(萤火虫)荧光素酶,它使用荧光素作为底物。
答案:不幸的是,目前无法单独购买GeneCopoeia的荧光素酶试剂盒的单个组件。
答案:通常在12到24小时之间。