主要功能和细节
重组生产(无动物),具有高批次一致性和长期供应安全性 兔单克隆抗体[Y124]到PKCα 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IHC-P、IP、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类、猪
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [Y124]至PKCα -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人、猪 预测可用于: 金鱼 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HEK293、K562、HeLa、C6细胞裂解物和猪骨骼肌组织裂解物。 IHC-P:人肺癌和人子宫内膜癌组织。 ICC/IF:PMA处理和未处理的野生型HAP1和HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 纯化蛋白A -
克隆 单克隆 -
克隆编号 124日元 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 这是一种钙激活的磷脂依赖性丝氨酸和苏氨酸特异性酶。 可能通过磷酸化CSPG4在细胞运动中发挥作用。 PKC被二酰甘油激活,二酰甘油反过来磷酸化一系列细胞蛋白。 PKC也是一类肿瘤促进剂佛波酯的受体。 -
序列相似性 属于蛋白激酶超家族。 AGC Ser/Thr蛋白激酶家族。 PKC亚家族。 包含1个AGC-激酶C末端结构域。 包含1个C2域。 包含2个佛波酯/DAG型锌指。 包含1个蛋白激酶结构域。 -
细胞定位 细胞质。 细胞膜。 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 5578 人类 Entrez基因: 18750 鼠标 Entrez基因: 397184 清管器 Entrez基因: 24680 老鼠 Omim公司: 176960 人类 瑞士保护银行: 第17252页 人类 瑞士保护银行: 第20444页 鼠标 瑞士保护银行: P05696号 老鼠
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别名 AAG6抗体 衰老相关基因6抗体 aPKC抗体
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图片
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所有车道: 1/2000稀释度的抗PKCα抗体[Y124](ab32376) 车道1: 重组人PKCα蛋白(活性)( 约55672 ) 车道2: 重组人PKCβ1蛋白( 约60840 ) 3号车道: 重组人PKCβ2蛋白( 约60841 ) 车道4: 重组人PKCγ蛋白( ab60842型 ) 车道5: 重组人PKCδ蛋白( ab60844型 ) 车道6: 重组人PKCε蛋白( 约60847 ) 7号车道: 重组人PKC zeta蛋白( 约60848 ) 第8车道: 重组人PKC-eta蛋白( ab60849型 ) 9号车道: 重组人PKCθ/PRKCQ蛋白( 约56641 ) 10号车道: 重组人PKC iota蛋白( 约60850 ) 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 77千Da 观察到的频带大小: 105千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 20秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :PKCα敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :K562细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HEK293细胞裂解物(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在77 kDa下观察到ab32376。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 ab32376在野生型HAP1细胞中与PKCα特异性反应。 检测PKCα基因敲除样品时未观察到条带。 对野生型和PKCα基因敲除样品进行SDS-PAGE分析。 ab32376和 约8245 (GAPDH的负荷控制)分别稀释1/5000和1/1000,并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1小时。 -
200nM PMA处理的野生型HAP1细胞中未经纯化的ab32376染色PKCα(顶面板)和200nM PM A处理的敲除HAP1的细胞中PKCα的染色(底面板)。 用200nM PMA处理细胞30分钟,诱导PKCα向细胞膜移位。 然后用100%甲醇固定细胞(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab32376以1/200的稀释度培养细胞 约7291 以1ug/ml浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150117号 )2ug/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在4%甲醛固定的HAP1细胞(10分钟)中,在相同的测试条件下,该产品也发出阳性信号。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
在Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解液中以1:20稀释度(0.5ug)纯化的ab32376免疫沉淀PKCα。
车道1(输入): Jurkat(人T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物10ug 车道2(+): ab32376和Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解物 车道3(-): 兔单克隆IgG( 约172730 )代替Jurkat(人类T细胞白血病T淋巴细胞)全细胞裂解液中的ab32376 用于蛋白质印迹,用于IP检测试剂(HRP)的VeriBlot( 阿布131366 )用于1:1000稀释度的检测。 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 37kDa和50kDa之间的带可能是C末端片段。 (PMID:10381525) -
未经纯化的ab32376染色野生型HAP1细胞中的PKCα(顶面板)和敲除HAP1的细胞中的PKCα(底面板)。 在未经治疗的情况下,PKCα在细胞的细胞质中表达。 然后用100%甲醇固定细胞(5分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab32376以1/200的稀释度培养细胞 约7291 以1ug/ml浓度在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )以2μg/ml(绿色显示)和山羊对小鼠IgG的二级抗体(Alexa Fluor®594)( ab150117号 )2ug/ml(以伪红色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 在4%甲醛固定的HAP1细胞(10分钟)中,在相同的测试条件下,该产品也发出阳性信号。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
车道1 :野生型HAP1细胞裂解物(20µg) 2号车道 :PKCα敲除HAP1细胞裂解物(20µg) 3号车道 :K562细胞裂解物(20µg) 4号车道 :HEK293细胞裂解物(20µg) 1-4车道 :合并信号(红色和绿色)。 绿色-在77kDa下观察到未净化的ab32376。 红色-装载控制, 约8245 ,在37kDa下观察到。 这个western blot图像是ab32376和竞争对手最常引用的兔多克隆抗体之间的比较。 -
用纯化的ab32376在1/20稀释度(5 ug/ml)(红色)下标记PKCα的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)二级抗体以1/2000稀释度使用。 同位素控制-90%甲醇。 未标记对照-兔单克隆IgG(黑色)。 未与一级抗体和二级抗体孵育的细胞(蓝色)。 -
以1:250稀释度(0.4μg/ml)纯化的ab32376标记PKCα的HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析。 将细胞固定在4%的聚甲醛中,并用0.1%的tritonX-100渗透。 用Ab195889抗α-微管蛋白抗体[DM1A]-微管标记物(Alexa Fluor ® 594)1:200(2.5μg/ml)。 约150077 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)作为二级抗体,稀释度为1:1000。 DAPI核复染。 用PBS代替一级抗体作为二级抗体对照。 -
大鼠肝组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA固定石蜡包埋切片)分析,用纯化的ab32376以1:100稀释(1.01μg/ml)标记PKCα。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
人类胶质瘤组织切片免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用1:100稀释(1.01μg/ml)的纯化ab32376标记PKCα。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
小鼠肝组织切片免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,用1:100稀释度(1.01μg/ml)的纯化ab32376标记PKCα。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
用1:100稀释(1.01μg/ml)的纯化ab32376标记PKCα的人子宫内膜癌组织切片的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用pH 9.0的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 组织用苏木精复染。 免疫组织探针一步法HRP聚合物(即用型)二级抗体以1:0的稀释度使用。 使用PBS代替初级抗体作为阴性对照。 -
所有车道: 1/5000稀释(纯化)的抗PKCα抗体[Y124](ab32376) 车道1: 293(人胚胎肾上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/50000 预测的带宽大小: 77千Da 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
所有车道: 1/5000稀释(纯化)的抗PKCα抗体[Y124](ab32376) 车道1: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解 车道2: 猪骨骼肌裂解物 每车道15µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/50000 预测的带宽大小: 77千Da 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST -
重叠直方图显示HeLa细胞用未纯化ab32376染色(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab32376,1/100稀释)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔单克隆IgG(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 该抗体在用甲醇固定(5分钟)/在相同条件下使用0.1%PBS-Tween渗透的HeLa细胞中发出阳性信号。 -
小鼠小肠组织的免疫组织化学分析,用未纯化的ab32376染色PKCα。 -
所有车道: 1/10000稀释(纯化)的抗PKCα抗体[Y124](ab32376) 车道1: K562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 车道2: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 77千Da 观察到的频带大小: 80千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 封闭和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST 37kDa和50kDa之间的带可能是C末端片段。 (PMID:10381525) -
用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)对HT1080细胞系中的PKC进行ab32376染色。 细胞用多聚甲醛固定,用0.1%Triton X-100渗透。 将样品与一级抗体(在PBS中的1/400)在22°C下孵育1小时。 Alexa Fluor®488-共轭山羊抗兔IgG多克隆用作二级抗体(1/1000)。
实验方案
数据表及文件
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文献 (119)
王X 等。 通过单细胞转录组学分析,在成人褶皱部中鉴定出SOX2阳性视网膜干细胞。 MedComm(2020) 4:e198(2023)。 公共医学:36582303 锂电池 等。 刚性基质诱导的srGAP2张力梯度控制三阴性乳腺癌的迁移方向。 治疗诊断科技 13:59-76 (2023). 公共医学:36593959 罗杰斯J 等。 晚期光感受器变性后视觉编码的功能完整性。 当前生物 33:474-486.e5(2023年)。 公共医学:36630957 李X 等。 肠上皮细胞中Runx2介导的蛋白激酶Cα和转化生长因子β信号转导之间的串扰。 生物化学杂志 299:103017 (2023). 公共医学:36791912 Perez-Hurtado M公司 等。 Syntaxin 3对小鼠视网膜中的长期感光细胞存活具有单倍体效应。 前眼科(洛桑) 3:不适用(2023年)。 公共医学:37609371