主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPR4207(2)]对LAMP2A-溶酶体标记 适用于:WB、IP、IHC-P、Flow Cyt(Intra)、ICC/IF 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPR4207(2)]至LAMP2A-溶酶体标记 -
宿主 兔子 -
特异性 在免疫细胞化学/免疫荧光应用中,该抗体不会与小鼠和大鼠物种发生反应。 LAMP2A在胎盘、肺和肝中高表达,在肾脏和胰腺中表达较少,在大脑和骨骼肌中表达较低(PMID:10212251PubMed:7488019,PubMed:26856698)。 为了更好地在低表达水平的组织中使用它,我们建议优化实验方案(增加裂解液量,使用低稀释度或高灵敏度ECL底物)。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:HeLa、Jurkat、ECV-304、JAR、NIH/3T3、RAW 264.7、PC-12和C6全细胞裂解物。 小鼠肾脏裂解物和大鼠肝脏和肾脏裂解物。 IHC-P:人胎盘和肝组织。 小鼠和大鼠肝组织。 IP:HeLa和RAW 264.7全细胞裂解物。 流式细胞仪(内部):HeLa细胞。 ICC/IF:野生型HeLa细胞。
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油,0.05%牛血清白蛋白,59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR4207(2) -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
偶联试剂盒 -
同位素控制 -
阳性对照 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
|
靶标
-
功能 与肿瘤细胞转移有关。 可能在保护溶酶体膜免受自噬、维持溶酶体的酸性环境、在细胞表面(质膜)表达时的粘附以及细胞间和细胞内信号转导中发挥作用。 保护细胞免受甲基化诱变剂的毒性影响。 -
组织特异性 LAMP-2A在胎盘、肺和肝中高表达,在肾脏和胰腺中表达较少,在大脑和骨骼肌中表达较低。 同构LAMP-2B在骨骼肌中高表达,在大脑、胎盘、肺、肾和胰腺中表达较少,在肝脏中表达很低。 -
疾病相关 达农病 -
序列相似性 属于LAMP家族。 -
翻译后修饰 O-和N-糖基化; 16个N-连接聚糖中的一些是聚乳糖多糖。 -
细胞定位 细胞膜。 内体膜。 溶酶体膜。 这种蛋白质在溶酶体、内体和质膜之间穿梭。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 3920 人类 Entrez基因: 16784 鼠标 Omim公司: 309060 人类 瑞士保护银行: 第13473页 人类 瑞士保护银行: 第17047页 鼠标 瑞士保护银行: 第17046页 老鼠 尤尼金: 496684 人类 尤尼金: 414016 鼠标
查看所有内容 -
形式 选择性剪接产生3种亚型。 -
别名 CD107抗原样家族成员B抗体 CD107b抗体 LAMP 2抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),稀释1/1000 车道1: 小鼠肾组织裂解物 车道2: 小鼠肝组织裂解物 3号车道: 小鼠脾组织裂解物 车道4: 小鼠肺组织裂解物 车道5: 小鼠脑组织裂解物 车道6: 小鼠大脑皮层组织裂解物 7号车道: 小鼠心脏组织裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 40秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 约181602 用作GAPDH加载控件。 LAMP2A在胎盘、肺和肝中高表达,在肾脏和胰腺中表达较少,在大脑和骨骼肌中表达较低(PMID:10212251PubMed:7488019,PubMed:26856698)。 为了更好地在低表达水平的组织中使用它,我们建议优化实验方案(增加裂解液量,使用低稀释度或高灵敏度ECL底物)。 -
使用兔子多克隆对ICC性能进行侧面比较 约18528年 和RabMab ® ab125068。对野生型HeLa细胞(顶部面板)和LAMP2敲除HeLa电池(底部面板,可用作 ab255402 ). 用4%PFA固定细胞(10分钟),用0.1%吐温-20渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-吐温中封闭1小时。 然后将细胞与 约18528年 或ab125068在+4°C温度下过夜,三种不同浓度:1.0μg/mL、0.2μg/mL和0.04μg/mL。二级抗体与羊抗兔IgG(Alexa Fluor)二级抗体在室温下孵育1h ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)为1/1000,核DNA用DAPI标记(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 使用 约18528年 1.0µg/mL,但进一步滴定抗体可改善ICC染色结果。 RabMab公司 ® ab125068在整个稀释范围内显示出可忽略不计的非特异性染色。 使用至少135个细胞对抗体信号进行量化,数据以平均值±SD表示。 最佳稀释度/浓度可能因不同的电池类型/实验条件而异,应由最终用户确定。 -
使用兔子多克隆对ICC性能进行侧面比较 约18528年 和RabMab ® ab125068。对野生型HeLa细胞(顶部面板)和LAMP2敲除HeLa电池(底部面板,可用作 ab255402型 ). 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%吐温-20渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-吐温中封闭1小时。 然后将细胞与 约18528年 或ab125068在+4°C温度下过夜,三种不同浓度:1.0μg/mL、0.2μg/mL和0.04μg/mL。二级抗体与羊抗兔IgG(Alexa Fluor)二级抗体在室温下孵育1h ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)为1/1000,核DNA用DAPI标记(以蓝色显示)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 使用 约18528年 1.0µg/mL,但进一步滴定抗体可改善ICC染色结果。 RabMab ® ab125068在整个稀释范围内显示出可忽略不计的非特异性染色。 使用至少180个细胞对抗体信号进行量化,数据表示为平均值±标准偏差。 最佳稀释度/浓度可能因不同的电池类型/实验条件而异,应由最终用户确定。 -
ab125068染色野生型HeLa细胞中的LAMP2a(顶面板)和LAMP2敲除HeLa电池(底面板,可用作 ab255402型 ). 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%吐温-20渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-吐温中封闭1小时。 然后用ab125068以0.04µg/mL和 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下与山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG(Alexa Fluor)的二级抗体 ® 594) ( ab150120型 )(以红色显示)均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 在我们手中,0.1%Triton X-100的渗透作用(5分钟)导致信号大大降低,我们建议使用0.1%吐温-20(5 min)检测该目标。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab125068染色野生型HeLa细胞中的LAMP2a(顶面板)和LAMP2敲除HeLa电池(底面板,可用作 ab255402型 ). 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%吐温-20渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-吐温中封闭1小时。 然后将细胞与ab125068以0.04µg/mL孵育 约7291 以1µg/mL在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor ® 488) ( 约150081 )(以绿色显示)和山羊对小鼠IgG(Alexa Fluor)的二级抗体 ® 594) ( ab150120型 )(以红色显示)均为1/1000。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 在我们手中,0.1%Triton X-100的渗透作用(5分钟)导致信号大大降低,我们建议使用0.1%吐温-20(5 min)检测该目标。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),稀释1/2000 车道1: 野生型HeLa细胞裂解物 车道2: LAMP2 CRISPR-Cas9编辑的HeLa细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? Western blot假彩色图像:抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记染色,稀释1/2000,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab125068显示与LAMP2A特异性结合。 在野生型HeLa细胞裂解液中观察到100kDa的带,在LAMP2 CRISPR-Cas9编辑的细胞系中未观察到该大小的信号 ab255402型 (CRISPR-Cas9编辑的细胞裂解物 约263861 ). 在CRISPR-Cas9编辑的低于100kDa的裂解液通道中观察到的条带可能代表LAMP2A的截断形式。 这还没有进一步研究,基因产物的功能特性也没有确定。 为了生成该图像,分析了野生型和LAMP2 CRISPR-Cas9编辑的HeLa细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/2000稀释(纯化) 车道1: 小鼠肾组织裂解物 车道2: 大鼠肾组织裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 100千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 分子量的差异可能是由不同程度的糖基化引起的。 -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/10000稀释(纯化) 车道1: Jurkat细胞裂解物 车道2: ECV-304细胞裂解物 3号车道: JAR细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 过氧化物酶结合山羊抗兔IgG(H+L)(1/1000稀释) 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞和稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 可在约50 kDa处看到,代表LAMP2的未糖基化亚型,约120 kDa代表糖基化形式。 -
人肝组织标记LAMP2A的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析,纯化的ab125068为1/200。 使用Tris/EDTA缓冲液pH 9进行热介导抗原检索。 ab97051型 以HRP结合的山羊抗兔IgG(H+L)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
LAMP2A从1mg HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)全细胞裂解液中用未纯化的ab125068以1/100稀释液免疫沉淀。 使用ab125068在1/2000稀释度下对免疫沉淀物进行Western blot。 针对非还原型IgG的抗抗体IgG(HRP)被用作1/1500稀释度的二级抗体。 泳道1:HeLa全细胞裂解物10ug(输入)。 通道2:ab125068 IP在HeLa全细胞裂解液中。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解液中的ab125068。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/5000稀释(未纯化)+HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液,20µg 次要 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
从1mg RAW 264.7(用Abelson鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞)全细胞裂解液中免疫沉淀LAMP2A,ab125068的稀释度为1/100。 使用未纯化的ab125068在1/2000稀释度下对免疫沉淀物进行蛋白质印迹。 针对非还原型IgG的抗抗体IgG(HRP)被用作1/1500稀释度的二级抗体。 通道1:RAW 264.7全细胞裂解液10ug(输入)。 泳道2:RAW 264.7全细胞裂解物中的ab125068IP。 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是RAW 264.7全细胞裂解液中的ab125068。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/5000稀释(未净化) 车道1: Jurkat(外周血T细胞白血病细胞)全细胞裂解物 车道2: ECV-304(人膀胱癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: 人胎盘绒毛膜癌细胞系全细胞裂解物 每条泳道20µg的裂解物/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 30秒 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/2000稀释(未净化) 车道1: 小鼠肾脏 车道2: RAW 264.7(用Abelson小鼠白血病病毒转化的小鼠巨噬细胞)全细胞裂解物 3号车道: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 45千帕 观察到的波段大小: 120千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 3分钟 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST -
所有车道: 抗-LAMP2A抗体[EPR4207(2)]-溶酶体标记物(ab125068),1/2000稀释(未净化) 车道1: 大鼠肝脏 车道2: 大鼠肾脏 3号车道: C6(大鼠胶质瘤细胞)全细胞裂解物 车道4: PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 45千帕 暴露时间: 3分钟 封闭和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (53)
徐C 等。 脑池糖苷A通过线粒体吞噬对帕金森病多巴胺能神经元的保护作用。 生物技术应用生物化学 70:268-280 (2023). 公共医学:35420720 张TM 等。 TOLLIP介导的自噬降解途径将VCP-TMEM63A-DERL1信号轴与三阴性乳腺癌进展联系起来。 自噬 19:805-821 (2023). 公共医学:35920704 钟Y 等。 肌球蛋白轻链4基因转移可减轻心房纤维化,同时纠正自噬流量失调。 氧化还原生物 60:102606 (2023). 公共医学:36645977 中村H 等。 溶酶体相关膜蛋白3通过破坏Sjögren病患者唾液腺中自噬性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8的降解,诱导溶酶体依赖性细胞死亡。 关节炎风湿病 75:1586-1598 (2023). 公共医学:37096570 康罗伊LR 等。 空间代谢组学揭示糖原是肺纤维化的一个可行靶点。 国家公社 14:2759 (2023). 公共医学:37179348