主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆[EPR17072]抗胶原VI 适用人群:WB、ICC/IF、IHC-P、mIHC 敲除已验证 反应:小鼠、大鼠、人类
相关共轭物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP17072]至胶原蛋白VI -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 重组片段。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:人骨骼肌、人胎盘、人胎脑、人胎心、人胎肾、人胎脾、小鼠心、小鼠肾、小鼠脾、大鼠肾和大鼠脾裂解物; HEK293T、WI-38和NIH/3T3全细胞裂解物。 IHC-P:人类肝脏、人类心肌、小鼠肾脏和大鼠胃组织。 mIHC:人类肝脏和前列腺组织,人类乳房。 ICC/IF:HeLa细胞。
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常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 长期储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.2 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:59%PBS、40%甘油(甘油、甘油)、0.05%BSA -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPR17072型 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物
应用
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靶标
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功能 胶原蛋白VI是一种细胞结合蛋白。 -
疾病相关 COL6A1缺陷是Bethlem肌病(BM)的原因[MIM:158810]。 BM是一种罕见的常染色体显性近端肌病,其特征是儿童早期发病(5岁时完全外显),关节挛缩最常影响肘部和脚踝。 COL6A1缺陷是Ullrich先天性肌营养不良(UCMD)的原因[MIM:254090]; 也称为Ullrich硬化性肌营养不良。 UCMD是一种常染色体隐性遗传性先天性肌病,其特征是肌无力和多关节挛缩,通常在出生或婴儿早期发现。 临床过程比Bethlem肌病更严重。 -
序列相似性 属于VI型胶原蛋白家族。 包含3个VWFA域。 -
翻译后修饰 三肽重复单元(G-X-Y)第三位的脯氨酸在部分或全部链中羟基化。 -
细胞定位 分泌>细胞外间隙>细胞外基质。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 1291 人类 Entrez基因: 1292 人类 Entrez基因: 1293 人类 Entrez基因: 12833 鼠标 Entrez基因: 12834 鼠标 Entrez基因: 12835 鼠标 Entrez基因: 294337 老鼠 Entrez基因: 361821 老鼠
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别名 α1(VI)链(61 AA)抗体 CO6A1_人类抗体 COL6A1抗体
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图片
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该数据是在不同的缓冲液配方中使用相同的抗体克隆得到的( 约271938 ). 人类乳腺标记细胞角蛋白18的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析 约93741 在1/200稀释度(1.02µg/mL)(B)下,胶原蛋白VI与 约271938 1/500稀释(2.084μg/ml)(C)和细胞角蛋白14 约236439 1/2000稀释(0.519μg/ml)(D)。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体,DAPI用于核反染。 用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0,表位回收溶液1)加热介导的抗原回收20分钟。 A组:人类乳腺上抗细胞角蛋白14(洋红色;Opal™690)、抗细胞角素18(绿色;Opal®520)和抗胶原蛋白VI(红色;Opel™570)的合并染色。 B组:管腔上皮细胞上的抗细胞角蛋白18染色。 C组:基质上有抗胶原VI染色。 D组:肌上皮细胞上的抗细胞角蛋白14染色。 切片经过三轮染色培养:按照 约236439 30分钟, 约93741 10分钟,以及 约271938 在室温下保持30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 免疫染色在莱卡生物系统BOND®RX仪器和Opal™4色试剂盒上进行。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 -
人肾上腺荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林固定石蜡包埋切片)。 A组显示肾上腺髓质上的抗PCSK2融合染色( 约274418 ; 灰色; Opal™690),浓度为1:2000(0.263μg/ml)[图B],抗CYP11A1染色于肾上腺皮质( 约272494 ; 绿色; 蛋白石™520)(1:10000(0.053μg/ml)[C组])和人肾上腺细胞外基质(ab182744;红色;蛋白石®570)(1:1000(1.518μg/ml,D组])上的抗胶原蛋白VI染色。 DAPI用作核反染剂。 其次是蛋白石聚合物HRP Ms+Rb二级抗体。 免疫染色在莱卡生物系统BOND®RX仪器和Opal™4色试剂盒上进行。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 切片经过三轮染色培养:按照 约274418 , 约272494 和ab182744在室温下保持30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行20分钟的热介导抗原检索。 -
人类前列腺组织的荧光多重免疫组织化学分析(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)。 A组:抗胶原VI融合染色( 约271938 ,洋红; Opal™690),抗细胞角蛋白5( 约236216 ,绿色; Opal™520)和抗前列腺特异性抗原( 约76113 ,红色; Opal™570)。 B组:管腔细胞上的抗前列腺特异性抗原染色。 C组:基底细胞上有抗细胞角蛋白5染色。 D组:基质上有抗胶原VI染色。 蛋白石聚合物HRP Ms+Rb用作二级抗体。 免疫染色在徕卡生物系统BOND上进行 ® 带有Opal™4色套件的RX仪器。 切片经过三轮染色培养:按照 约271938 (1/500), 约236216 (1/400),以及 约76113 (1/2000)在室温下保持30分钟。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 每一轮之后都有一个单独的荧光酪胺信号放大系统。 使用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位回收溶液2)进行热介导的抗原回收20分钟。 DAPI(蓝色)用作核反染剂。 使用徕卡SP8共焦显微镜进行图像采集。 -
对石蜡包埋的人肝组织进行免疫组织化学分析,用ab182744在1/250稀释度下标记胶原VI,然后用预先稀释的HRP聚合物检测兔/鼠IgG。 窦状内皮基底膜周围可见阳性染色。 苏木精反染。 阴性对照:使用PBS代替初级ab,次级ab是兔/小鼠IgG的HRP聚合物的预稀释物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 稀释1/1000的抗VI型胶原抗体[EPR17072](ab182744) 车道1: 野生型HEK293T细胞裂解物 车道2: COL6A1敲除HEK293T细胞裂解物 3号车道: 人骨骼肌组织裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(IRDye®800CW)预吸附( ab216773号 )稀释度为1/10000 预测的带宽大小: 109千帕 观察到的波段大小: 136千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在136 kDa下观察到ab182744。 红色-加载控制 约8245 在36 kDa时观察到。 ab182744抗VI型胶原抗体[EPR17072]被证明与野生型HEK293T细胞中的VI型胶原特异性反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 约265060 (敲除细胞裂解物 约256879 )已使用。 野生型和VI型胶原抗体敲除样品进行SDS-PAGE。 ab182744和抗-GAPDH抗体[6C5]-负荷控制( 约8245 )在室温下孵育2。 5小时,分别为1000倍和20000倍稀释液中的1倍。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
所有车道: 抗胶原VI抗体[EP17072](ab182744) 车道1: 野生型HEK293全细胞裂解物 车道2: COL6A1敲除HEK293全细胞裂解物 3号车道: 人骨骼肌全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测的带宽大小: 109千帕 1-3车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在109 kDa下观察到ab182744。 红色-装载控制, 约9484 ,在37 kDa下观察到。 ab182744在野生型HEK293细胞中识别胶原VI,因为在COL6A1敲除细胞的预期MW时信号丢失。 在野生型和敲除型细胞中观察到额外的交叉反应带。 对野生型和COL6A1敲除样品进行SDS-PAGE分析。 Ab182744和 约9484 (小鼠抗GAPDH负荷对照)分别在4°C、1/2000稀释度和1/20000稀释度下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床 ab216773号 和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床 约216776 二级抗体在成像前在室温下以1/20000稀释1小时。 -
人类肝组织的多重免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 A组:胶原VI(ab182744;绿色)、抗CD68的合并染色( 约213363 ; 红色)和抗层粘连蛋白B1( ab229025号 ; 洋红色)。 B组:细胞外基质上的抗胶原VI(绿色)染色。 图C:抗CD68(红色)在库普弗细胞上染色。 D组:核膜上的抗-Lamin B1(洋红色)染色。 关键方案步骤:用ab182744(1/1000稀释)三轮染色培养切片, 约213363 (1/1000稀释)和 ab229025号 (1/4000稀释)在室温下保持30分钟。 每轮之后用适当的荧光团进行酪胺信号放大。 免疫染色在徕卡生物系统BOND®RX仪器上进行。 DAPI用作核反染剂。 使用现成的抗兔和鼠聚合物HRP作为次要药物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
4%对甲醛固定、0.1%Triton X-100渗透HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞)细胞的免疫荧光分析,在1/200稀释度下用ab182744标记胶原VI,然后用山羊抗兔IgG(Alexa Fluor®488)( 约150077 )1/400稀释度的二级抗体(绿色)。 观察HeLa细胞系的细胞质染色。 核反染为DAPI(蓝色)。 用检测到Tubulin 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500 约150120 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500(红色)。 阴性对照如下:- -ve控制1-ab182744在1/200稀释后 约150120 (AlexaFluor®594山羊抗鼠次要),稀释度为1/500。 -ve控制2- 约7291 (抗Tubulin小鼠单克隆抗体),稀释1/500,然后 约150077 (Alexa Fluor®488 Goat Anti-Rabbit IgG H&L),稀释度为1/400。 -
对石蜡包埋的人心肌组织进行免疫组织化学分析,用ab182744在1/250稀释度下标记胶原VI,然后用预先稀释的HRP聚合物检测兔/鼠IgG。 人心脏肌膜和间质呈阳性染色。 苏木精反染。 阴性对照:使用PBS代替初级ab,次级ab是兔/小鼠IgG的HRP聚合物的预稀释物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
对石蜡包埋的小鼠肾脏组织进行免疫组织化学分析,用ab182744在1/250稀释度下标记胶原VI,然后用预先稀释的HRP聚合物标记兔/小鼠IgG。 小鼠肾小管基底膜周围可见阳性染色。 苏木精反染。 阴性对照:使用PBS代替初级ab,次级ab是兔/小鼠IgG的HRP聚合物的预稀释物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
石蜡包埋大鼠胃组织用ab182744在1/250稀释度下标记胶原VI,然后用预先稀释的HRP聚合物进行兔/鼠IgG的免疫组织化学分析。 大鼠胃上皮基底膜周围可见阳性染色。 苏木精反染。 阴性对照:使用PBS代替初级ab,次级ab是兔/小鼠IgG的HRP聚合物的预稀释物。 在开始IHC染色方案之前,使用Tris/EDTA缓冲液pH 9.0进行热介导抗原回收。 -
所有车道: 1/2000稀释的抗胶原VI抗体[EP17072](ab182744) 车道1: 人骨骼肌裂解物 车道2: WI-38(人胎肺成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: 人胎盘裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 109千帕 观察到的波段大小: 147千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 由于平移后修正,观测到的MW大于预测的MW。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗VI型胶原抗体[EPR17072](ab182744) 车道1: 人胎脑裂解物 车道2: 人胎心裂解物 3号车道: 人胎肾裂解物 车道4: 人胎脾裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 抗狂犬病IgG(HRP),针对1/1000稀释度的非还原型IgG 预测的带宽大小: 109千帕 观察到的波段大小: 147千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 由于平移后修正,观测到的MW大于预测的MW。 -
所有车道: 1/2000稀释度的抗VI型胶原抗体[EPR17072](ab182744) 车道1: 小鼠心脏裂解物 车道2: 小鼠肾裂解物 3号车道: 小鼠脾脏裂解物 车道4: 大鼠肾裂解物 车道5: 大鼠脾裂解物 车道6: NIH/3T3(鼠胚成纤维细胞)全细胞裂解物 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合1/1000稀释 预测的带宽大小: 109千帕 观察到的波段大小: 147千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 阻塞/稀释缓冲液:5%NFDM/TBST。 由于翻译后的修饰,观察到的MW大于预测的MW。
数据表及文件
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合格证书
文献 (30)
马勒巴A 等。 在OPMD A17小鼠模型中全身递送免疫阻断Myostatin的单克隆抗体。 分子生物学方法 2587:557-568 (2023). 公共医学:36401050 吴C 等。 使用3D标记的zPDX模型芯片评估基质SCD诱导的PDAC耐药。 i科学 26:105723 (2023). 公共医学:36590169 斯特伦扎克KA 等。 抗生素Kitasamycin是一种潜在的预防青光眼瘘管术后纤维化的药物? 药剂学 15:不适用(2023年)。 公共医学:36839651 卢L 等。 单细胞转录组学揭示甲状腺癌的非变性转化。 临床研究杂志 133:不适用(2023年)。 公共医学:37053016 Koop K公司 等。 白细胞介素36受体诱导的基质金属蛋白酶13介导肠纤维化。 前部免疫 14:1163198 (2023). 公共医学:37207229