主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔单克隆抗体[EPNCIR111A]到BRG1 适用于:Flow Cyt(Intra)、ChIC/CUT&RUN-seq、WB、IP、IHC-P、ICC/IF 敲除已验证 反应对象:小鼠、大鼠、人类
相关偶联物和制剂
概述
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产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EPNCIR111A]至BRG1 -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 老鼠、老鼠、人 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 -
阳性对照 WB:Hap1、HEK-293T、K562、HeLa、MOLT4、NIH3T3、RAW 264.7、C6和PC12细胞裂解物; 人类肾脏和睾丸组织溶解物。 IHC-P:人类睾丸、结肠、宫颈癌和肾组织、大鼠肝组织和小鼠肾组织。 ICC/IF:HeLa细胞、Raji细胞和SMARCA4-HAP1细胞。 流式细胞周期(内部):HeLa和HAP1细胞。 ChIC/CUT&RUN序列:HeLa细胞。
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常规说明 该产品是一种重组单克隆抗体,具有以下优点: -高批次一致性和再现性 -提高了灵敏度和特异性 -长期供应安全 -无动物制作
有关更多信息 请看这里 . 我们的RabMAb ® 该技术是一种基于杂交瘤的专利技术,用于制备兔单克隆抗体。 有关我们专利的详细信息,请参阅 拉布MAb ® 专利 . 这种抗体是由Epitomics、国家癌症研究所癌症研究中心和Gordon Hager实验室合作开发的。 查看NCI癌症研究合作中心的抗体 .
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 在-20°C下稳定12个月。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:40%甘油(甘油,甘油),0.05%牛血清白蛋白,59%PBS -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
克隆编号 EPNCIR111A公司 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
重组蛋白 -
相关产品
应用
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靶标
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功能 转录辅激活子与核激素受体协同增强转录激活。 CREST-BRG1复合物的成分,这是一种多蛋白复合物,通过调控阻遏物复合物钙依赖性释放和激活物复合物招募来调节启动子激活。 在静息神经元中,c-FOS启动子的转录被磷酸化RB1-HDAC阻遏物复合体的BRG1依赖性募集抑制。 钙内流后,RB1被钙调神经磷酸酶去磷酸化,导致阻遏物复合物的释放。 同时,CREST依赖机制增加了CREBBP对启动子的招募,从而导致转录激活。 CREST-BRG1复合物也与NR2B启动子结合,NR2B表达的活性依赖性诱导涉及HDAC1的释放和CREBBP的招募。 属于神经前体特异染色质重塑复合体(npBAF复合体)和神经特异染色质重构复合体(nBAF复合物)。 在神经发育过程中,当神经元退出细胞周期并进入成年状态时,会发生从干/祖细胞到有丝分裂后染色质重塑机制的转变。 从增殖的神经干/祖细胞向有丝分裂后神经元的转变需要npBAF和nBAF复合体亚单位组成的转换。 当神经祖细胞退出有丝分裂并分化为神经元时,含有ACTL6A/BAF53A和PHF10/BAF45A的npBAF复合物被交换为神经元特异复合物(nBAF)中的同源替代ACTL6B/BAF53B和DPF1/BAF45B或DPF3/BAF45C亚基。 npBAF复合物对多能神经干细胞的自我更新/增殖能力至关重要。 nBAF复合物和CREST在调节树突生长所必需基因的活性方面发挥作用。 SMARCA4/BAF190A可通过增强Notch依赖性增殖信号促进神经干细胞自我更新/增殖,同时使神经干细胞对SHH依赖性分化线索不敏感(通过相似性)。 还通过与WINAC复合体的关联参与维生素D偶联转录调控,WINAC复合物是维生素D受体(VDR)招募的染色质重塑复合体,是配体结合VDR介导的CYP27B1基因转阻遏所必需的。 作为ZEB1的辅抑制因子调节E-cadherin转录,并且是ZEB1诱导上皮-间充质转化(EMT)所必需的。 -
组织特异性 与ZEB1在已建立系的E-钙粘蛋白阴性细胞、正常结肠基质以及结直肠癌侵袭前沿的去分化上皮细胞(蛋白质水平)中进行结肠癌。 -
疾病相关 SMARCA4的缺陷是2型横纹肌样肿瘤易感综合征(RTPS2)的原因[MIM:613325]。 RTPS2是一种家族性癌症综合征,易诱发肾或肾外恶性横纹肌样肿瘤和多种中枢神经系统肿瘤,包括脉络丛癌、髓母细胞瘤和中枢原始神经外胚层肿瘤。 横纹肌样肿瘤是儿童早期发生的最具侵袭性和致命性的恶性肿瘤。 -
序列相似性 属于SNF2/RAD54解旋酶家族。 包含1个溴结构域。 包含1个解旋酶ATP-结合域。 包含1个解旋酶C末端结构域。 包含1个HSA域。 -
翻译后修饰 DNA损伤后发生磷酸化,可能是ATM或ATR引起的。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 6597 人类 Entrez基因: 20586 鼠标 Entrez基因: 171379 老鼠 Omim公司: 603254 人类 瑞士保护银行: 第51532页 人类 瑞士保护银行: Q3TKT4号机组 鼠标 瑞士保护银行: Q8K1P7问题 老鼠 尤尼金: 327527 人类
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别名 ATP依赖性解旋酶SMARCA4抗体 ATP依赖性解旋酶SMARCA4抗体 BAF 190抗体
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图片
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用浓度为0.1µg/ml的ab110641对福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体标记BRG1进行免疫组织化学分析。免疫染色是在Ventana DISCOVERY ULTRA(Roche Tissue Diagnostics)仪器上使用OptiView DAB IHC检测试剂盒进行的。 使用ULTRA细胞调节液(CC1,pH 8.5)在100°C下进行32分钟的热介导抗原回收。 ab110641抗BRG1抗体[EPNCIR111A]在37°C下孵育16分钟。 切片用苏木精II复染。 图像插页显示仅二级抗体对照组无染色。 -
用浓度为0.1µg/ml的ab110641对福尔马林固定石蜡包埋人扁桃体标记BRG1进行免疫组织化学分析。免疫染色在带有BOND™Polymer Refine检测试剂盒的Leica Biosystems BOND®RX仪器上进行。 用Tris-EDTA缓冲液(pH 9.0,表位检索溶液2)进行热介导抗原检索20分钟。 ab110641抗BRG1抗体[EPNCIR111A]在室温下培养30分钟。 切片用苏木精复染。 图像插页显示仅二级抗体对照组无染色。 -
流式细胞术重叠直方图显示左侧野生型Hap1阳性细胞和右侧SMARCA4基因敲除Hap1阴性细胞 ab95363型 (红线)。 用80%甲醇固定细胞(5分钟),然后用0.1%PBS-Triton X-100渗透15分钟。然后将细胞培养在含有10%正常山羊血清的1x PBS中,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后用抗体(ab110641)(1x 10 6 100μl,0.008μg/ml(1/266250)),在22°C下放置30分钟。 将二级抗体山羊抗狂犬病IgG H&L(Alexa Fluor®488)预吸附液在1/4000的温度下于22°C孵育30分钟 同位素对照抗体重组兔IgG单克隆[EPR25A]-同位素对照(黑线)在与主要抗体相同的浓度和条件下使用。 未标记样本也用作对照(蓝线)。 使用50 mW蓝光激光器(488nm)和525/40带通滤波器采集了超过5000个事件。 -
所有车道: 抗-BRG1抗体[EPNCIR111A](ab110641),稀释度为1/1000 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: SMARCA4敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测波段大小: 185千帕 观察到的频带大小: 185千帕 Western blot假彩色图像:抗BRG1抗体[EPNCIR111A]在1/1000稀释度下染色,以绿色显示; 小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab110641显示与BRG1特异结合。 在野生型HEK-293T细胞裂解液中185kDa处观察到一条带,在SMARCA4敲除细胞系中未观察到该大小的信号 ab255432号 (敲除细胞裂解物 约263853 ). 为了生成该图像,分析野生型和SMARCA4敲除HEK-293T细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 使用的二级抗体是山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( 约216776 )稀释1/20000。 -
所有车道: 抗-BRG1抗体[EPNCIR111A](ab110641),1/10000稀释 车道1: 野生型HEK-293T细胞裂解物 车道2: SMARCA4敲除HEK-293T细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测波段大小: 185千帕 观察到的频带大小: 185千帕 1-2车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在185 kDa时观察到ab110641。 红色-抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制( 约7291 )在50 kDa时观察到。 western blot显示ab110641与野生型HEK-293T细胞中的SMARCA4反应。 敲除细胞系时观察到信号丢失 ab255432号 (敲除细胞裂解物 约263853 )已使用。 对野生型HEK-293T和SMARCA4敲除型HEK-29.3T细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 在室温下,将膜在0.1%的TBST和3%的脱脂奶粉中封闭1小时。 ab110641和抗α-管蛋白抗体[DM1A]-负载控制( 约7291 )在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
ab110641染色HeLa细胞BRG1。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab110641以1/500的稀释度培养细胞,并 约195889年 (小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-微管标记物(Alexa Fluor®594)),在+4°C下以1/250稀释过夜,然后在室温下用 约150081 (羊抗兔IgG-H&L多克隆二级抗体(Alexa Fluor®488)),浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
石蜡包埋的人宫颈癌组织用ab110641标记BRG1,然后用现成的山羊抗Rabbit IgG H&L(HRP)进行免疫组织化学分析。 宫颈癌细胞核染色。 苏木精复染。 热介导抗原检索 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 -
所有车道: 抗-BRG1抗体[EPNCIR111A](ab110641),1/10000稀释 车道1: HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解物 车道2: NIH/3T3(小鼠胚胎成纤维细胞)全细胞裂解物 3号车道: RAW 264.7(小鼠Abelson小鼠白血病病毒诱导的肿瘤巨噬细胞)全细胞裂解物 车道4: C6(大鼠胶质瘤胶质细胞)全细胞裂解 车道5: K-562(人慢性粒细胞白血病淋巴细胞)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )稀释1/20000 预测波段大小: 185千帕 观察到的频带大小: 185千帕 阻塞/稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:通道1至4:5秒; 车道5:15秒 -
所有车道: 抗-BRG1抗体[EPNCIR111A](ab110641),1/10000稀释 车道1: 野生型HAP1细胞裂解物 车道2: BRG1敲除HAP1细胞裂解物 3号车道: K562细胞裂解物 车道4: Molt-4细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 预测波段大小: 185千帕 其他波段位于: 185千Da。 我们不确定这些额外波段的身份。 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在185 kDa时观察到ab110641。 红色-装载控制, 约18058 ,在124 kDa时观察到。 ab110641在野生型HAP1细胞中与BRG1特异性反应。 使用BRG1敲除样品时未观察到条带。 野生型和BRG1基因敲除样品经过SDS-PAGE、ab110641和 约18058 (文丘林负荷控制)均稀释1/10000并在4°C下培养过夜。 用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸附床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸附床( 约216776 )二级抗体在成像前在室温下以1/10000稀释1hr。 -
BRG1由0.35 mg HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10μg与Ab110641以1:20稀释(0.35 mg裂解液中0.3μg)进行免疫沉淀。 免疫沉淀采用Ab110641 1:1000稀释液(0.12μg/ml)进行Western blot。 IP检测试剂VeriBlot(HRP)( 阿布131366 )以1:1000稀释度作为二级抗体。 通道1:HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)全细胞裂解液10μg 通道2:HeLa全细胞裂解物中的Ab110641 IP 通道3:兔单克隆IgG( 约172730 )而不是HeLa全细胞裂解液中的ab110641。 阻塞和稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 曝光时间:1秒 -
在1/200稀释度(10µg/ml)(红色)下用纯化的ab110641标记BRG1的HeLa(人宫颈腺癌)细胞的细胞内流式细胞术分析。 细胞用4%多聚甲醛固定,用90%甲醇渗透。 山羊抗兔IgG(Alexa Fluor ® 488)(1/2000稀释)作为次级抗体。 使用兔单克隆IgG(黑色)作为同型对照,使用未与一级抗体和二级抗体(蓝色)孵育的细胞作为未标记对照。 -
在HeLa(人宫颈腺癌上皮细胞)裂解液上以0.5µg/ml的速度测试不同批次的ab110641。在每条车道上装载15µg裂解液。 185 kDa时观察到的谱带。 -
ab110641染色野生型HAP1细胞中的BRG1(顶部面板)和BRG1敲除HAP1的细胞(底部面板)。 细胞用4%甲醛固定(10分钟),用0.1%Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS-Tween中封闭1小时。 然后用ab110641以1/500的稀释度培养细胞,并 约195889年 以1/250稀释度(以伪红色显示)在+4°C下过夜,然后在室温下用山羊抗兔IgG二级抗体(Alexa Fluor®488)进一步孵育1小时( 约150081 )浓度为2μg/ml(以绿色显示)。 核DNA用DAPI标记为蓝色。 使用共聚焦显微镜(Leica Microsystems,TCS SP8)拍摄图像。 -
用ab110641标记BRG1的石蜡包埋大鼠肝组织的免疫组织化学分析,然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 大鼠肝脏细胞核染色。 苏木精复染。 热介导抗原检索 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 -
用ab110641标记BRG1的石蜡包埋小鼠肾组织,然后使用现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)进行免疫组织化学分析。 小鼠肾脏细胞核染色。 苏木精复染。 热介导抗原检索 约93684 (Tris/EDTA缓冲液,pH 9.0)。 仅二级抗体对照:使用PBS代替一级抗体,二级抗体是一种现成的山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)。 -
用ab110641在1/100稀释度下对石蜡包埋人睾丸组织染色BRG1进行免疫组织化学分析。 用柠檬酸缓冲液(pH 6)进行热介导抗原回收。 -
用ab110641在1/100稀释度下对石蜡包埋人肾组织BRG1染色进行免疫组织化学分析。 用柠檬酸缓冲液(pH 6)进行热介导抗原回收。
数据表及文件
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文献 (191)
布拉特尼克A 等。 高钙血症型卵巢小细胞癌患者的一项基于人群的研究,为期30年。 病理学实验室医学档案 148:299-309 (2024). 公共医学:37270804 Brahma S&Henikoff S公司 BAF染色质重塑器与RNA聚合酶II和转录因子协同清除核小体。 自然基因 56:100-111 (2024). 公共医学:38049663 肖M 等。 BRD9通过调节染色质状态决定造血干细胞的细胞命运。 国家公社 14:8372 (2023). 公共医学:38102116 Johann PD公司 等。 复发性非典型畸胎瘤/横纹肌样瘤(AT/RT)在组织学、表观遗传学、拷贝数分析和转录组学方面表现出不同的进展特征。 神经病理学报 146:527-541 (2023). 公共医学:37450044 康JS 等。 Baf155通过HIF-1a信号调节骨骼肌代谢。 公共科学图书馆生物 21:e3002192(2023)。 公共医学:37478146