主要功能和细节
重组生产(无动物),实现高批次一致性和长期供应安全 兔抗HLA A单克隆抗体[EP1395Y] 适用于:Flow Cyt(Intra)、WB、IP、IHC-P、ICC/IF 淘汰验证 反应对象:人类
相关共轭物和制剂
概述
-
产品名称 -
描述 兔单克隆抗体 [EP1395Y]至HLA A -
宿主 兔子 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 人类 -
免疫原 人类HLA A aa 50-150内的合成肽。 确切的顺序是专有的。 数据库链接: P04439号 -
阳性对照 IHC-P:人类扁桃体组织。 ICC/IF:MCF7和Raji细胞。 WB:A431、Jurkat、THP-1、A549、HL-60和Raji细胞裂解物。 IP:THP-1和A549细胞裂解物。 流动细胞(内部):Raji细胞。
-
常规说明
性能
-
形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.20 防腐剂:0.01%叠氮化钠 成分:PBS、40%甘油、0.05%牛血清白蛋白 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 蛋白质A纯化 -
克隆 单克隆 -
协调 EP1395Y型 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
相关产品
-
替代版本 -
兼容的辅助设备 -
同位素控制 -
KO细胞系 -
KO细胞裂解物 -
阳性对照 -
相关产品
应用
|
||
|
||
|
||
|
|
|
|
靶
-
相关性 HLA-A属于HLAⅠ类重链副logue。 该I类分子是由重链和轻链组成的异二聚体(β-2微球蛋白)。 重型链条固定在薄膜中。 I类分子通过提供来自内质网腔的肽在免疫系统中发挥中心作用。 它们几乎在所有细胞中表达。 重链约为45kDa,其基因包含8个外显子。 外显子1编码先导肽,外显子2和外显子3编码alpha1和alpha2结构域,这两个结构域都与肽结合,第4外显子编码alpha3结构域,第5外显子解码跨膜区,第6和第7外显子则编码细胞质尾部。 外显子2和外显子3内的多态性负责每个一类分子的肽结合特异性。 骨髓和肾脏移植通常会对这些多态性进行分型。 已有数百个HLA-A等位基因被描述。 -
数据库链接 -
别名 抗原呈递分子抗体 HLAⅠ类组织相容性抗原,A1α链抗体 HLAA抗体
查看所有内容
图片
-
所有车道: 抗-HLA A抗体[EP1395Y](ab52922),稀释度为1/10000 车道1: 野生型A549细胞裂解物 车道2: HLA-A敲除A549细胞裂解物 3号车道: 野生型A431细胞裂解物 车道4: HLA-A敲除A431细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 41千Da 观察到的频带大小: 41千Da 抗-HLA-A抗体[EP1395Y](ab52922)以1/10000稀释度染色,以绿色显示; 小鼠抗α-管蛋白[DM1A]( 约7291 )以1/20000稀释度进行负载控制染色,以红色显示。在Western blot中,ab52922被显示为与HLA-A特异性结合。在野生型A549细胞裂解液中的41 kDa处观察到一条带,在HLA-A敲除细胞系中未观察到该大小的信号。 为了生成此图像,分析了野生型和HLA-A敲除A549细胞裂解物。 首先,样品在SDS-PAGE凝胶上运行,然后转移到硝化纤维素膜上。 TBS-0.1%吐温中3%牛奶中的膜被堵塞 ® 20(TBS-T),然后在4°C下与一级抗体孵育过夜。 在TBS-T中清洗四次斑点,在室温下与二级抗体孵育1小时,再次清洗四次,然后成像。 二级抗体为羊抗兔IgG H&L 800CW和羊抗鼠IgG H&L 680RD,稀释度为1/20000。 -
人类扁桃体组织用纯化ab52922标记HLA A(1/100)的免疫组织化学(福尔马林/PFA-固定石蜡包埋切片)分析。 使用pH为9的EDTA缓冲液进行热介导抗原检索。 ab97051型 以羊抗兔IgG H&L(HRP)作为二级抗体(1/500)。 阴性对照使用PBS代替一抗。 苏木精复染。 -
所有车道: 抗-HLA A抗体[EP1395Y](ab52922),稀释度为1/10000 车道1: 野生型A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 车道2: HLA-A敲除A-431(人表皮样癌细胞系)全细胞裂解物 3号车道: A549(人肺癌细胞系)全细胞裂解物 车道4: Jurkat(来自外周血的人T细胞白血病细胞系)全细胞裂解物 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 41千Da 观察到的频带大小: 40千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? 1-4车道: 合并信号(红色和绿色)。 绿色-在40 kDa下观察到ab52922。 红色-装载控制, 约7291 (在55kDa下观察到小鼠抗α-微管蛋白[DM1A]。 Western blot显示ab52922与A431野生型细胞中的HLA-A反应。 使用HLA-A基因敲除样本时观察到信号丢失。 对A431野生型和HLA-A敲除细胞裂解物进行SDS-PAGE分析。 TBS-T中3%牛奶中的膜被堵塞(0.1%吐温 ® )在与ab52922和 约7291 (小鼠抗α-管蛋白[DM1A]在4°C下过夜,分别以1/10000和1/20000稀释。用山羊抗兔IgG H&L(IRDye ® 800CW)预吸收床( ab216773号 )和山羊抗鼠IgG H&L(IRDye ® 680RD)预吸收床( ab216776年 )二级抗体在成像前在室温下以1:20000稀释1小时。 -
叠加直方图显示Raji细胞用ab52922染色(红线)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),然后用0.1%PBS-Tween渗透20分钟。然后在1x PBS/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸中培养细胞,以阻止非特异性蛋白-蛋白质相互作用,然后在22°C下用抗体(ab52922,1/100)培养30分钟。 使用的二级抗体是DyLight®488山羊抗兔IgG(H+L)( 约96899 )在22°C下,1/500稀释30分钟。 同型对照抗体(黑线)为兔IgG(单克隆)(1µg/1x10 6 电池)在相同条件下使用。 采集了超过5000个事件。 在相同条件下使用80%甲醇(5分钟)/0.1%PBS-Tween渗透固定20分钟的Raji细胞中,该抗体发出阳性信号。 -
Raji(人类Burkitt淋巴瘤)细胞的免疫细胞化学/免疫荧光分析用纯化的ab52922标记HLA A(1/100)。 细胞用4%多聚甲醛固定,并用0.1%Triton X-100渗透。 约150077 ,Alexa Fluor ® 使用488缀合的山羊抗兔IgG(1/1000)作为第二抗体。 DAPI(蓝色)用作核染色。 约7291 、小鼠抗微管蛋白(1/1000)和 ab150120型 ,Alexa Fluor ® 还使用了594-共轭山羊抗鼠IgG(1/1000)。 对照1:一级抗体(1/100)和二级抗体, ab150120型 ,Alexa Fluor ® 594-共轭山羊抗鼠IgG(1/500)。 控制2: 约7291 (1/1000)和二级抗体, 约150077 ,Alexa Fluor ® 488-共轭山羊抗兔IgG(1/500)。 -
所有车道: 1/5000稀释度的抗-HLA A抗体[EP1395Y](ab52922)(纯化) 车道1: 20µg的THP-1细胞裂解液 车道2: A549细胞裂解液1/20稀释 次要 所有车道: 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/1000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 41千Da 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
标记HLA A的Raji细胞的细胞内流式细胞术分析,纯化的ab52922为1/40(红色)。 细胞用2%多聚甲醛固定。 以FITC-偶联山羊抗兔IgG(1/500)作为二级抗体。 黑色-同位素对照,兔单克隆IgG。 蓝色-未标记对照,细胞未与初级和次级抗体孵育。 -
未纯化的ab52922染色的MCF7细胞的ICC/IF图像。 细胞经4%甲醛固定(10分钟),然后在1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸和0.1%PBS-Tween中孵育1小时,以使细胞渗透并阻断非特异性蛋白-蛋白质相互作用。 然后将细胞与抗体(ab52922,5µg/ml)在+4°C下孵育过夜。 二级抗体(绿色)为Alexa Fluor®488山羊抗兔IgG(H+L),以1/1000稀释度使用1h。 Alexa Fluor®594 WGA用于在1/200稀释度下标记质膜(红色)1小时。 DAPI用于染色浓度为1.43µM的细胞核(蓝色)。 -
1/2000稀释(纯化)的抗-HLA A抗体[EP1395Y](ab52922)+20µg的HL-60细胞裂解液 次要 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)( ab97051型 )1/1000稀释(山羊抗狂犬病IgG,(H+L),过氧化物酶结合) 预测的带宽大小: 41千Da 封闭缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 稀释缓冲液和浓度:5%NFDM/TBST。 -
1/10000稀释的抗HLA A抗体[EP1395Y](ab52922)+10µg的Raji细胞裂解物 次要 羊抗兔IgG HRP在1/2000稀释度下结合 预测的带宽大小: 41千Da 观察到的频带大小: 41千Da -
用免疫组织化学方法(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)对人扁桃体组织切片中的HLA A进行ab52922染色。 用甲醛固定组织并用3%H封闭 2 O(运行) 2 在25°C下保持10分钟; 抗原回收是在pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液中通过热调解进行的。 将样品与一级抗体(1/3000)在25°C下孵育20分钟。 未稀释的HRP结合山羊抗兔IgG多克隆用作二级抗体。 -
Ab52922 1/250稀释染色人扁桃体; 石蜡包埋。
实验方案
数据表及文件
-
SDS下载 -
数据表下载
文献 (89)
詹立 等。 LC3和NLRC5相互作用抑制子宫内膜癌中NLRC5介导的MHC I类抗原呈递途径。 癌症快报 529:37-52 (2022). 公共医学:34974132 安杰洛普洛斯一世 等。 在凝固的贫血小板血浆中输送可负担且可扩展的包封同种异体/自体间充质干细胞,用于牙髓再生。 科学代表 12:435 (2022). 公共医学:35013332 Joung J公司 等。 CRISPR激活筛选确定BCL-2蛋白和B3GNT2是T细胞介导细胞毒性的肿瘤耐药驱动因素。 国家公社 13:1606 (2022). 公共医学:35338135 星星P 等。 转移性黑色素瘤抗PD1免疫治疗期间的多发性鳞状增殖性皮损:发病机制、免疫组织化学分析和治疗。 皮肤病治疗 35:e15472(2022)。 公共医学:35347815 奥奇艾J 等。 体位学和无血清/异种基因工程脂肪基质细胞片。 前电池开发生物 10:873603 (2022). 公共医学:35557946