主要功能和细节
兔多克隆至RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2) 适用于:ELISA、WB、IHC-P、ICC/IF 对小鼠、大鼠、人类、酿酒酵母的反应 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2) -
宿主 兔子 -
特异性 从2024年1月起,该多克隆补货批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持人员,他们很乐意提供帮助。 该抗体识别C末端结构域重复序列YSPTSPS的氨基酸2位置中发现的磷酸化丝氨酸。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人、酿酒酵母 预测可用于: 非洲爪蟾(Xenopus laevis)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)、黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)、葡萄裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)等种类繁多 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 ab12793年 ) -
阳性对照 ICC/IF:HeLa细胞; NIH-3T3细胞。
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常规说明 多年来,生命科学行业一直面临着再现性危机。 Abcam正在通过我们的一系列重组单克隆抗体和用于金标准验证的敲除编辑细胞系引领解决这一问题。 购买前请检查此产品是否满足您的需求。 如果您有任何问题、特殊要求或疑虑,请在购买之前向我们发送查询和/或联系我们的支持团队。 以下是本产品的推荐替代品,以及出版物、客户评论和问答
性能
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形式 液体 -
存放说明 运输温度为4°C。 在+4°C下短期储存(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:98.98%PBS,1%BSA 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆 多克隆 -
同种型 免疫球蛋白G -
研究领域
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ChIP相关产品 -
兼容的辅助设备 -
控制肽 -
同位素控制 -
重组蛋白 -
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应用
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靶标
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功能 依赖于DNA的RNA聚合酶利用四种核糖核苷三磷酸作为底物催化DNA转录成RNA。 RNA聚合酶II的最大催化成分,合成mRNA前体和许多功能性非编码RNA。 与第二大亚基一起形成聚合酶活性中心。 Pol II是基础RNA聚合酶II转录机制的核心组成部分。 它由相对移动的移动元素组成。 RPB1是中心大裂口核心元件的一部分,夹持元件移动以打开和关闭裂口,以及夹持进入DNA模板的颌骨。 在转录开始时,启动子的单链DNA模板链位于Pol II的中央活性位点间隙内。 桥接螺旋来自RPB1并穿过催化位点附近的缝隙,被认为通过在核苷酸添加的每一步从直构象转换为弯构象,作为棘轮移动RNA-DNA杂交体穿过活性位点,从而促进Pol II的易位。 在转录延伸过程中,Pol II随着转录延伸在模板上移动。 延伸受Pol II最大亚基(RPB1)C末端结构域(CTD)磷酸化状态的影响,该结构域是调节转录起始、延伸、终止和mRNA处理的因子的组装平台。 当与三角型肝炎病毒的小三角抗原相关时,作为RNA依赖的RNA聚合酶,同时作为病毒RNA循环基因组的复制和转录酶。 -
序列相似性 属于RNA聚合酶β链家族。 -
结构域 C末端结构域(CTD)是调节转录起始、延伸、终止和mRNA处理的因子的组装平台。 -
翻译后修饰 C末端结构域(CTD)中的串联七肽重复序列可以被高度磷酸化。 磷酸化激活Pol II。 磷酸化主要发生在七肽重复序列的“Ser-2”和“Ser-5”残基上,至少由CDK7和CDK9介导。 与DNA相关的POLR2A的CDK7磷酸化通过触发与DNA的分离来促进转录启动。 七肽重复序列的“Ser-7”也发生磷酸化,这是snRNA基因高效转录和转录物处理所必需的。 磷酸化状态被认为是由位点特异性CTD激酶和磷酸酶的平衡作用引起的,并提出了一个“CTD编码”,用于指定Pol II在转录周期中的位置。 通过蛋白磷酸酶CTDSP1去磷酸化。 在C-末端结构域(CTD)的串联七肽重复序列中,有些不符合Y-S-P-T-S-P-S共识,第七个丝氨酸残基“Ser-7”被赖氨酸取代 在这些非感官七肽重复序列中,赖氨酸-7’可以选择性地乙酰化、甲基化和二甲基化。 EP300是一种能够乙酰化“Lys-7”的酶。 非感觉七肽重复序列的“Lys-7”乙酰化与“Ser-2”磷酸化和活性转录相关。 它可以调节转录的起始或早期延伸步骤,特别是诱导基因。 当CTD被低磷酸化时,在转录起始前在Arg-1810处甲基化,在Ser-1805和Ser-1808处磷酸化阻止这种甲基化。 分别由PRMT5和CARM1在Arg-1810处对称或不对称二甲基化。 对称或不对称二甲基化调节与CTD结合蛋白(如SMN1/SMN2和TDRD3)的相互作用。 SMN1/SMN2优先与对称二甲基形式相互作用,而TDRD3优先与不对称形式相互作用。通过SMN1/SMN2的招募,需要对称二甲基化来解析RNA聚合酶II产生的RNA-DNA杂种,该杂种在转录末端区域形成R-loop, 正确终止转录的重要步骤。 CTD二甲基化也可能促进选择性RNA的表达。 在C-末端结构域(CTD)的串联七肽重复序列中,有些不符合Y-S-P-T-S-P-S共识,第七个丝氨酸残基“Ser-7”被赖氨酸取代 在这些非感官七肽重复序列中,赖氨酸-7’可以选择性地乙酰化、甲基化和二甲基化。 甲基化发生在最早的转录阶段,先于或伴随着“Ser-5”和“Ser-7”磷酸化。 WWP2泛素化导致蛋白酶体降解(根据相似性)。 紫外线处理后,RNA聚合酶II(RNA pol IIo)的伸长形式是泛素化的紫外线损伤位点,不会导致降解:KIAA1530/UVSSA促进泛素化,并促进RNA polⅡo回溯,以允许进入核苷酸切除修复机制。 -
细胞定位 核心。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 177190 秀丽隐杆线虫 Entrez基因: 32100 黑腹果蝇 Entrez基因: 5430 人类 Entrez基因: 20020 鼠标 Entrez基因: 363633 老鼠 Entrez基因: 851415 酿酒酵母 Omim公司: 180660 人类 瑞士保护: 第18616页 拟南芥
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别名 DNA定向RNA聚合酶ⅡA抗体 DNA导向RNA聚合酶Ⅱ最大亚单位RNA聚合物Ⅱ220kd亚单位抗体 DNA导向RNA聚合酶II亚单位A抗体
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图片
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ab5095染色HeLa细胞中的RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab5095以1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 ,山羊抗兔IgG多克隆第二抗体-H&L(Alexa Fluor ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150080 ,山羊抗兔IgG多克隆第二抗体-H&L(Alexa Fluor ® 594),稀释度为1/1000(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 也适用于用100%甲醇固定的电池(5分钟)。 使用高含量分析仪(Operetta CLS、Perkin Elmer)采集图像,并显示共焦截面的最大强度投影。 -
ab5095染色NIH-3T3细胞中RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)。 用4%多聚甲醛固定细胞(10分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%牛血清/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab5095以1µg/ml和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 ,山羊抗兔IgG多克隆第二抗体-H&L(Alexa Fluor ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 ab150120型 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 使用共焦显微镜(Leica-Microsystems TCS SP8)采集图像,显示单个共焦切片。 -
所有车道: 抗-RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)抗体(ab5095),1µg/ml 车道1: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 车道2: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解液 3号车道: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS肽( 公元12795年 )浓度为1µg/ml 车道4: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS肽( 公元12795年 )浓度为1µg/ml 车道5: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解物与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)肽( 公元12793年 )浓度为1µg/ml 车道6: 酿酒酵母(Y190)与酿酒酵母RNA聚合酶II CTD重复YSPTSPS(磷酸S2)肽的全细胞裂解物( 公元12793年 )浓度为1µg/ml 7号车道: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 人类RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)肽( 约18488 )浓度为1µg/ml 第8车道: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解物 人类RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S5)肽( 约18488 )浓度为1µg/ml 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 217千Da 观察到的频带大小: 240千帕 为什么实际的频带大小与预测的不同? -
HeLa或MCF7细胞用4%甲醛固定在PEM缓冲液中。 盖玻片在室温下在TBS-T中5%奶粉加0.02%叠氮化钠的封闭缓冲液中培养1小时。 去除封闭缓冲液,以1/500的稀释度添加一级抗体,并在4摄氏度下培养过夜。 然后用阻挡缓冲液清洗盖玻片4-5次,持续5分钟。 二级抗体,即羊抗兔Alexa 594,以1/1000的稀释度添加,并在室温下孵育1小时。 从这一点上来说,盖玻片上覆盖了箔纸,以保护它们免受阳光照射。 用TBS-T洗涤5次,然后用PEM洗涤一次,每次洗涤5分钟。将盖玻片固定在4%甲醛的PEM缓冲液中10-30分钟,然后用PE缓冲液洗涤3次,每次5分钟。 在PEM缓冲液中添加0.1M氯化铵10分钟以熄灭自发光,然后在PEM中清洗卡瓦2次5分钟,然后清洗3次 -
用ICC/IF(免疫细胞化学/免疫荧光)ab5095染色HeLa细胞中的RNA聚合酶II CTD重复序列YSPTSPS(磷酸化S2)。 细胞用多聚甲醛固定,并用0.5%Triton X100渗透。 样品与一级抗体(PBS中的1/200)在22°C下孵育1小时。 Alexa Fluor公司 ® 用488个山羊多克隆抗体(1/200)作为二级抗体。 -
图片由提供 图谱 人脑ab5095染色,显示浦肯野细胞染色(棕色)。 将石蜡包埋的脑组织与ab5095(1:900稀释)在室温下孵育30分钟。 在pH为6的柠檬酸盐缓冲液中通过热诱导进行抗原回收。 ab5095在组织芯片(TMA)中进行了测试,该芯片包含广泛的正常和癌症组织,以及由一系列常用的、特征明确的人类细胞系组成的细胞芯片。 有关此抗体的进一步结果,请访问 网址:www.proteinalas.org .
实验方案
数据表及文件
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文献 (542)
胡Q 等。 抗-hsa-miR-59可缓解与哈金森-吉尔福德早衰综合征相关的小鼠过早衰老。 欧洲工商管理硕士J 42:e110937(2023)。 公共医学:36382717 马库斯H 等。 延伸因子1是拟南芥RNA聚合酶II延伸复合体的组成部分,与转录基因的子集相关。 新植物醇 238:113-124 (2023). 公共医学:36627730 赵F 等。 配位组蛋白变体H2A。 Z驱逐和H3.3沉积控制植物热形态发生。 新植物醇 238:750-764 (2023). 公共医学:36647799 Gyenis A公司 等。 基因组RNA聚合酶停滞在衰老过程中形成转录组。 自然基因 55:268-279 (2023). 公共医学:36658433 Fanourgakis S公司 等。 活性基因5'区的组蛋白H2Bub动力学与紫外线诱导的转录反应密切相关。 计算结构生物技术J 21:614-629 (2023). 公共医学:36659919