抗-Histone H3标记和ChIP等级(ab1791)
主要功能和细节
兔多克隆到组蛋白H3-核标记和ChIP等级 适用人群:IHC-P、ChIP、IP、WB、ICC/IF 对以下动物有反应:小鼠、大鼠、人类、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、黑腹果蝇、印度麂、裂殖酵母 同位素:IgG
选择批间可重复性更高的重组抗体
研究可靠 —— 各批次间结果一致且可重复 长期批量供应 —— 采用重组技术,可实现快速生产 首次实验即可成功 —— 经过大量验证确认了特异性 符合伦理标准 —— 产品不含动物成分
概述
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产品名称 -
描述 兔多克隆抗体 组蛋白H3标记和ChIP等级 -
宿主 兔子 -
特异性 从2024年3月起,该多克隆补充批次的QC测试发生了变化。 我们的Abcam产品承诺仍涵盖所有测试和预期的应用和反应性物种组合。 然而,我们不再测试所有应用程序。 有关特定批次的更多信息,请联系我们的科学支持人员,他们很乐意提供帮助。 仅基于序列同源性,我们预计抗体会与H3的多种变体(如H3.1、H3.2和H3.3)发生反应。 -
经测试应用 -
种属反应性 与反应: 小鼠、大鼠、人类、酿酒酵母、非洲爪蟾、拟南芥、果蝇、印度麂、裂殖酵母 预测可用于: 鸡肉、狗、秀丽隐杆线虫、雪貂、斑马鱼、各种其他物种、哺乳动物、丝虫、盘状网柄菌、虹鳟、粗糙脉孢菌、刚地弓形虫、大米、曼氏血吸虫、白色念珠菌、氰菌 -
免疫原 合成肽。 此信息为Abcam和/或其供应商专有。 (肽可用作 第12149页 ) -
常规说明
性能
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形式 液体 -
存放说明 在4°C下装运。 短期储存在+4°C下(1-2周)。 交付时,等分。 储存于-20°C或-80°C。 避免冷冻/解冻循环。 -
存储溶液 pH值:7.40 防腐剂:0.02%叠氮化钠 成分:98.98%PBS,1%BSA 浓度<1mg/ml的该产品批次可添加BSA作为稳定剂。 如果您想了解有关特定批次配方的信息,请联系我们的科学支持团队,他们将乐于提供帮助。 -
浓度信息加载。。。 -
纯度 免疫原亲和力纯化 -
克隆 多克隆 -
同种型 IgG抗体 -
研究领域
相关产品
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替代版本 -
ChIP相关产品 -
协同免疫原 -
兼容的辅助设备 -
免疫肽(阻断) -
同位素控制 -
重组蛋白 -
相关产品 组蛋白H3总定量试剂盒(比色法)( 约115091 ) 预染蛋白阶梯-宽分子量(10-245 kDa)( ab116028号 ) 抗-Histone H3(二甲基K9)抗体[mAbcam 1220]-ChIP级( ab1220型 ) 人组蛋白H3(三甲基K4)肽( ab1342号 ) 人组蛋白H3(三甲基K9)肽( 公元1773年 ) 人组蛋白H3(三甲基K27)肽( 公元1782年 ) 组蛋白H3修饰复合检测试剂盒(比色法)( 约185910 ) 抗组蛋白H3抗体[mAbcam 24834]-核负荷控制和ChIP等级( ab24834号 ) 抗-Histone H3(三甲基K27)抗体[mAbcam 6002]-ChIP级( ab6002型 ) 人类组蛋白H3(未修饰)肽( 约7228 )
应用
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靶标
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功能 核小体的核心成分。 核小体将DNA包裹并压缩成染色质,限制了需要DNA作为模板的细胞机制对DNA的访问。 因此,组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中发挥着核心作用。 DNA可及性是通过组蛋白的一系列复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白密码)和核小体重塑来调节的。 -
序列相似性 属于组蛋白H3家族。 -
发展阶段 在S期表达,然后随着分化过程中细胞分裂减慢,表达强烈下降。 -
翻译后修饰 乙酰化通常与基因激活有关。 Lys-10(H3K9ac)上的乙酰化破坏Arg-9(H3R8me2s)的甲基化。 Lys-19(H3K18ac)和Lys-24(H3K24ac)上的乙酰化有利于Arg-18(H3R17me)上的甲基化。 PADI4对Arg-9(H3R8ci)和/或Arg-18(H3R17ci)的瓜氨酸化损害甲基化并抑制转录。 CARM1在Arg-18(H3R17me2a)处的不对称二甲基化与基因激活有关。 PRMT5在Arg-9(H3R8me2s)处的对称二甲基化与基因抑制有关。 PRMT6在Arg-3(H3R2me2a)处的不对称二甲基化与基因抑制有关,并且与H3 Lys-5甲基化(H3K4me2和H3K4me3)相互排斥。 H3R2me2a存在于基因的3'处,无论其转录状态如何,并且在非活性启动子上富集,而在活性启动子上不存在。 Lys-5(H3K4me)、Lys-37(H3K36me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化与基因激活有关。 Lys-5(H3K4me)的甲基化促进H3和H4的后续乙酰化。 Lys-80甲基化(H3K79me)与DNA双链断裂(DSB)反应相关,是TP53BP1的特异靶点。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化与基因抑制有关。 Lys-10(H3K9me)的甲基化是HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)的一个特定靶点,可防止随后Ser-11(H3S10ph)的磷酸化以及H3和H4的乙酰化。 Lys-5(H3K4me)和Lys-80(H3K 79me)的甲基化需要H2B在“Lys-120”的初步单泛素化。 Lys-10(H3K9me)和Lys-28(H3K27me)的甲基化富集在非活性X染色体染色质中。 前期GSG2/haspin在Thr-4(H3T3ph)下磷酸化,后期去磷酸化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化对有丝分裂和减数分裂期间的染色体凝聚和细胞周期进展至关重要。 此外,RPS6KA4和RPS6KA5在Ser-11(H3S10ph)处的磷酸化在间期很重要,因为它能够在外界刺激后转录基因,如丝裂原、应激、生长因子或紫外线照射,并导致基因的激活,如c-fos和c-jun, 与基因激活相关,防止Lys-10(H3K9me)甲基化,但促进H3和H4的乙酰化。 AURKB在Ser-11(H3S10ph)的磷酸化介导HP1蛋白(CBX1、CBX3和CBX5)与异染色质的分离。 Ser-11的磷酸化(H3S10ph)也是肿瘤细胞转化的重要调节机制。 在有丝分裂期间或紫外线B照射下,MLTK亚型1、RPS6KA5或AURKB在Ser-29(H3S28ph)下磷酸化。 PRKCBB在Thr-7(H3T6ph)处的磷酸化是表观遗传转录激活的特异标记,可防止LSD1/KDM1A对Lys-5(H3K4me)的去甲基化。 在着丝粒处,DAPK3和PKN1在Thr-12(H3T11ph)从前期到后期的早期特异性磷酸化。 PKN1在Thr-12(H3T11ph)处的磷酸化是促进KDM4C/JMJD2C对Lys-10(H3K9me)去甲基化的表观遗传转录激活的特异标记。 JAK2在Tyr-42(H3Y41ph)处的磷酸化促进CBX5(HP1α)从染色质中排除。 RAG1在淋巴细胞中单泛素化,V(D)J重组需要单泛素(根据相似性)。 CUL4-DDB-RBX1复合物对紫外线照射的反应中泛素化。 这可能会削弱组蛋白和DNA之间的相互作用,并促进DNA可接近性以修复蛋白质。 -
细胞定位 核心。 染色体。 -
UniProt提供的信息 -
数据库链接 Entrez基因: 8350 人类 Entrez基因: 8351 人类 Entrez基因: 8352 人类 Entrez基因: 8353 人类 Entrez基因: 8354 人类 Entrez基因: 8355 人类 Entrez基因: 8356 人类 Entrez基因: 8357 人类
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别名 H3组蛋白家族成员E假基因抗体 H3组蛋白家族成员A抗体 H3/A抗体
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图片
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所有车道: 抗-Histone H3抗体-核标记物和1/1000稀释度的ChIP等级(ab1791) 车道1: A431(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 车道2: Jurkat(人T细胞淋巴母细胞样细胞系)全细胞裂解液 3号车道: HEK293(人胚肾细胞系)全细胞裂解液 车道4: A431(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 人组蛋白H3肽( 第12149页 )浓度为1µg/ml 车道5: Jurkat(人T细胞淋巴母细胞样细胞系)全细胞裂解液 人组蛋白H3肽( ab12149号 )浓度为1µg/ml 车道6: HEK293(人胚肾细胞系)全细胞裂解液 人组蛋白H3肽( ab12149号 )浓度为1µg/ml 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊抗兔IgG H&L(HRP)( ab6721号 )稀释1/5000 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的波段大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 10秒 该印迹是在MES缓冲系统下使用4-12%双三凝胶产生的。 凝胶在200V下运行35分钟,然后在30V下转移到硝化纤维膜上70分钟。 然后用2%牛血清白蛋白封闭膜一小时,然后在4°C下与ab1791孵育过夜。 山羊抗狂犬病IgG H&L(HRP)(ab6721)二级抗体 用于检测。 使用ECL开发解决方案对抗体结合进行可视化 第133406页 . -
使用0.5mg HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)全细胞提取物、5µg兔多克隆至和50µl蛋白g磁珠(+)免疫沉淀组蛋白H3-ChIP级。 对照组(-)未添加抗体。 将抗体与G蛋白珠在搅拌下孵育10分钟,将在RIPA缓冲液中稀释的HeLa全细胞提取物裂解物添加到每个样品中,并在搅拌下再孵育10分钟。 通过添加40µl SDS负载缓冲液洗脱蛋白质,并在70°C下孵育10分钟; 在SDS-PAGE凝胶上分离10µl每个样品,转移到硝化纤维素膜上,用5%BSA封闭,并用ab1791进行探测。 次级抗体:鼠抗兔HRP轻链(HRP)( ab99697型 ). 频带:15kDa; 组蛋白H3-ChIP等级 -
染色质来自 非洲爪蟾 根据Abcam X-ChIP协议制备卵母细胞。 用甲醛固定卵母细胞10分钟。 使用25 mg染色质和3 mg染色质进行ChIP 约7834 (抗H3,浅蓝色)和3µg ab1791(抗-H3,深蓝色),以及20 ml蛋白质A/g sepharose珠。 使用非特异性抗体作为对照(黄色)。 用实时PCR(Taqman方法)定量免疫沉淀DNA。 -
公元1796年 用免疫组织化学(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)染色小鼠肝组织切片中的组蛋白H3。 组织用多聚甲醛固定,用0.05%Triton X-100在PBS中渗透30分钟,用5%BSA封闭1小时; 抗原回收是在pH为6的柠檬酸钠中通过热调解进行的。 样品与一级抗体(1/500在封闭缓冲液中)在4°C下孵育16小时。 Alexa Fluor公司 ® 以488-结合山羊抗兔IgG多克隆(1/400)为二级抗体。 -
ab1791染色HeLa细胞组蛋白H3。 细胞用100%甲醇固定(5分钟),用0.1%PBS-Triton X-100渗透5分钟,然后用1%BSA/10%正常山羊血清/0.3M甘氨酸在0.1%PBS吐温中封闭1小时。 然后在4°C下用ab1791以0.1µg/mL和 约7291 ,小鼠单克隆[DM1A]到α-管蛋白-负载控制。 然后将细胞与 约150081 、山羊抗兔IgG-H&L(Alexa Fluor)多克隆二级抗体 ® 488),以1/1000稀释度预吸附(以绿色显示)和 约150120 小鼠IgG-H&L(Alexa Fluor)山羊多克隆二级抗体 ® 594),以1/1000稀释度预吸附(以伪红色显示)。 用DAPI标记细胞核DNA(以蓝色显示)。 -
所有车道: 抗-Histone H3抗体-核标记物和1/1000稀释度的ChIP等级(ab1791) 车道1: 小鼠骨骼肌线粒体分数 车道2: 小鼠骨骼肌细胞核分数 每车道20µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: HRP-结合山羊抗兔IgG(稀释度为1/4000) 使用ECL技术开发。 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的波段大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? 暴露时间: 7分钟 在25°C下用3%的牛奶封闭1小时。 在4°C的温度下,在TBS-tween中的3%牛奶中与一级抗体孵育16小时。 -
用免疫细胞化学/免疫荧光法(ICC/IF)对HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)中的组蛋白H3进行ab1791染色。 用甲醇固定细胞,并在25°C下用0.2%鱼鳞明胶封闭1小时。 将样品与第一抗体(1/300,PBS+0.2%明胶)在25°C下孵育20分钟。 Alexa Fluor公司 ® 用488-结合驴抗兔IgG多克隆(1/500)作为二级抗体。 绿色-组蛋白H3。 蓝色-DAPI。 红色-管蛋白。 -
所有车道: 1µg/ml时抗-Histone H3抗体-核标记和ChIP等级(ab1791) 车道1: HeLa(人上皮癌细胞系)全细胞裂解液 车道2: NIH/3T3全细胞裂解物( 约7179 ) 3号车道: 果蝇胚胎核提取物(来自黑腹果蝇胚胎0-12Hr) 车道4: 酿酒酵母(Y190)全细胞裂解液 车道5: S.pombe全细胞裂解液 每车道10µg的裂解液/蛋白质。 次要 所有车道: 山羊多克隆至兔IgG-H&L-Pre-Adsorbed(HRP),稀释度为1/3000 在还原条件下进行。 预测的带宽大小: 15千Da 观察到的波段大小: 17千Da 为什么实际的频带大小与预测的不同? ab1791在一系列物种上进行了western-blot测试。 我们建议添加更多的蛋白质(20-30ug)以增加酵母裂解物中的信号 -
在酿酒酵母全细胞裂解液(每车道40 ug)上以1/5000的比例对组蛋白H3(ab1791)进行兔多克隆。 蛋白质在15%SDS-PAGE凝胶上溶解。 转移到PVDF膜后,在1X PBS、0.1%吐温-20和5%牛奶中阻断斑点。 ab1791在5 ml封闭缓冲液中以1/5000稀释。斑点加一级抗体在4°C下培养过夜或在RT下培养2小时。 在添加二级抗体之前,用0.1%吐温-20在PBS中洗涤印迹6次,每次10分钟。 二级抗体在封闭缓冲液中稀释1/2000,并在RT下用印迹培养2小时。二级印迹在PBS中用0.1%吐温-20和2X分别洗涤4次10分钟和10分钟。 -
根据Abcam X-ChIP协议,从HeLa(宫颈腺癌人上皮细胞系)细胞制备染色质。 用甲醛固定细胞10分钟。 使用25µg染色质、2µg ab1791(蓝色)和20µl蛋白A/g sepharose珠进行ChIP。 没有向珠子对照中添加抗体(黄色)。 免疫沉淀DNA通过实时PCR(Taqman方法用于活性和非活性位点,Sybr green方法用于异色位点)进行定量。 引物和探针位于转录区的第一kb。 -
免疫组织化学分析中,使用ab1791以1/8000稀释度对石蜡包埋大鼠脑组织进行组蛋白H3染色。 -
用免疫组织化学方法(IHC-P-副甲醛固定石蜡包埋切片)对人类婴儿纤维瘤病组织切片中的组蛋白H3进行ab1791染色。 组织用甲醛固定,并在室温下用1%FBS/BSA封闭3小时; 抗原回收是在Tris pH9中通过热调解进行的。 样品与一级抗体(1/100在TBS+1%BSA+1%FBS中)孵育16小时。 使用未稀释的HRP缀合的山羊抗兔IgG多克隆作为第二抗体。 -
ab1791免疫组织化学染色大鼠脑组织切片中的组蛋白H3(红色)(IHC-P-石蜡包埋切片)。 用甲醛固定组织,用0.1%TBS-TritonX渗透,并用10%血清在25°C下封闭1小时; 抗原回收是通过柠檬酸盐缓冲液中的热介导进行的。 样品与一级抗体(10%正常山羊血清中的1/500)在24°C下孵育24小时。 Alexa Fluor公司 ® 用594结合羊抗兔IgG多克隆(1/500)作为二级抗体。 绿色-细胞核染色。 红色-组蛋白H3染色。
实验方案
数据表及文件
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文献 (4739)
福田Y 等。 利用伴侣蛋白进行序列分析的小鼠精子染色质的溶解。 分子生物学方法 2577:161-173 (2023). 公共医学:36173572 Diffendall GM公司 等。 发现参与恶性疟原虫免疫逃逸的RUF6 ncRNA相互作用蛋白。 生命科学联盟 6:不适用(2023年)。 公共医学:36379669 林·L 等。 化学修饰小干扰RNA靶向Hedgehog信号通路治疗类风湿关节炎。 摩尔热核酸 31:88-104 (2023). 公共医学:36618268 福田T 等。 线粒体膜间空间蛋白mitofisin驱动线粒体分裂,而线粒体分裂是有丝分裂所必需的。 分子电池 83:2045-2058.e9(2023)。 公共医学:37192628 林县 等。 SAMS-1通过组蛋白甲基化来协调HLH-30/TFEB和PHA-4/FOXA活性,以调节饮食限制诱导的自噬和寿命。 自噬 19:224-240 (2023). 公共医学:35503435