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.2023年1月1日；27(1):61-73.
doi:10.4196/kjpp.2023.7.1.61。

外显体介导的lnc-ABCA12-3通过调节toll-like receptor 4/nuclear factor kappa-B信号通路促进食管鳞癌增殖和糖酵解，但抑制凋亡

马俊良 1, 罗一军（Yijun Luo） 1, 刘英杰 2, 程晨 1, 陈安平 1, 吕彪梁 1, 王文祥 三, 宋永祥 1
附属公司

外泌体介导的lnc-ABCA12-3通过调节toll样受体4/核因子κB信号通路促进食管鳞状细胞癌的增殖和糖酵解，但抑制细胞凋亡

马军良等。 韩国生理药理学杂志. .

摘要

食管鳞状细胞癌（ESCC）是一种消化系统恶性肿瘤，发病率高，死亡率高。本研究旨在探讨lnc-ABCA12-3在食管鳞癌发生发展中的作用及其独特机制。应用RT-PCR检测组织或细胞系中的基因转录水平，如TE-1、EC9706和HEEC细胞。Western blot检测线粒体凋亡和toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路蛋白表达水平。采用CCK-8和EdU检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡。ELISA用于检查糖酵解相关指标的变化。Lnc-ABCA12-3在食管鳞癌组织和细胞中高表达，这使其成为候选靶点。下调lnc-ABCA12-3可明显抑制TE-1和EC9706细胞的增殖和糖酵解，促进细胞凋亡。TLR4激活剂能在很大程度上逆转lnc-ABCA12-3下调引起的细胞凋亡加速和糖酵解抑制。此外，lnc-ABCA12-3对ESCC细胞的作用是通过在外泌体的介导下激活TLR4/NF-κB信号通路来实现的。综上所述，lnc-ABCA12-3可以促进ESCC的增殖和糖酵解，而抑制其凋亡可能是通过调节TLR4/NF-κB信号通路来实现的。

关键词：食管鳞癌；外显子；Lnc-ABCA12-3；NF-κB；Toll样受体4。

PubMed免责声明

利益冲突声明

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数字

图1
图1。Lnc-ABCA12-3在食管鳞癌组织、血清（外泌体）和细胞中过度表达。
（A） ESCC和邻近正常组织微阵列中lncRNA表达差异分布的火山图。（B） 差异表达lncRNAs的前10个上调和下调显示在热图中。（C） 用RT-PCR检测正常组织和肿瘤组织中Lnc-ABCA12-3的水平**p<0.01与正常组织组。（D） 采用RT-PCR法测定健康人和食管鳞癌患者血清中Lnc-ABCA12-3水平。##p<0.01与。对照组。（E） 采用RT-PCR检测健康人和食管鳞癌患者血清外泌体Lnc-ABCA12-3水平。&&p<0.01与。对照组。（F） 通过RT-PCR评估HEEC、TE-1和EC9706细胞中Lnc-ABCA12-3的水平。^^p<0.01与HEEC组。数据表示为平均值±标准偏差。
图2
图2。敲除lnc-ABCA12-3抑制食管鳞癌（ESCC）细胞的增殖和糖酵解。
（A） sh-ABCA12-3转染后，通过RT-PCR检测lnc-ABCA12-3的表达。（B） 采用CCK-8法检测ESCC细胞的活性。（C，D）用EdU法检测细胞增殖。比例尺，20μm。（E–G）用相应的商业试剂盒测试ATP含量、葡萄糖摄取量和乳酸生成量。数据以平均值±标准偏差表示。**p<0.01与.sh-NC组。
图3
图3。敲除lnc-ABCA12-3可促进食管鳞癌细胞的凋亡。
流式细胞术检测（A，B）ESCC细胞凋亡。（C，D）Western blot检测Bax、Bcl-2、caspase-3、裂解caspase-2的表达。数据以平均值±标准偏差表示。**p<0.01与.sh-NC组。
图4
图4。lnc-ABCA12-3失活的toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路的敲除。
（A，B）Western blot检测TLR4、IκBα、p-IκBα、NF-κB、p-NF-κ的表达。数据以平均值±标准差表示。**p<0.01与.sh NC组。
图5
图5。Lnc-ABCA12-3调节增殖、糖酵解和凋亡通过激活TLR4。
（A） 采用CCK-8法检测食管鳞癌（ESCC）细胞的活性。（B，C）用EdU法检测细胞增殖。比例尺，20μm。（D–F）用相应的商业试剂盒测试ATP含量、葡萄糖摄取量和乳酸生成量。流式细胞术检测（G，H）ESCC细胞凋亡。数据表示为平均值±SD。TLR4，toll样受体4；脂多糖**p<0.01与.sh-NC组，##p<0.01与.sh-ABCA12-3组。
图6
图6。lnc-ABCA12-3对LPS处理的食管鳞癌（ESCC）细胞线粒体凋亡途径和toll-like receptor 4（TLR4）/nuclear factor kappa-B（NF-κB）途径的影响。
（A） Western blot检测Bax、Bcl-2、caspase-3、裂解caspase-2的表达。（B） Western blot检测TLR4、IκBα、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κ的表达。数据表示为平均值±标准偏差。LPS、脂多糖**p<0.01与.sh-NC组，##p<0.01与.sh-ABCA12-3组。
图7
图7。Lnc-ABCA12-3在外泌体介导下与食管鳞癌（ESCC）细胞发挥作用。
（A） 用转染或不转染sh-ABCA12-3的TE-1细胞的外泌体处理后。通过RT-PCR检测Lnc-ABCA12-3的表达。（B） 采用CCK-8法检测ESCC细胞的活性。（C，D）用EdU法检测细胞增殖。比例尺，20μm。（E–G）用相应的商业试剂盒测试ATP含量、葡萄糖摄取量和乳酸生成量。数据以平均值±标准偏差表示。**p<0.01与对照组，##p<0.01与.TE-1-exo组，&&p<0.01与.sh-NC-TE-1-外显基团。
图8
图8。Lnc-ABCA12-3在外泌体介导下调节线粒体凋亡途径和toll-like receptor 4（TLR4）/nuclear factor kappa-B（NF-κB）途径。
（A） Western blot检测Bax、Bcl-2、caspase-3、裂解caspase-2的表达。（B） Western blot检测TLR4、IκBα、p-IκB-α、NF-κB、p-NF-κ的表达。数据以平均值±标准偏差表示。**p<0.01与.对照组，##p<0.01与.TE-1-exo组，&&p<0.01与.sh-NC-TE-1-exo组。
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