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.2019年1月8日；12（1）:135-151。
doi:10.1016/j.stemcr.2018.11.010。 Epub 2018年12月13日。

腊肠衰竭会干扰乳腺发育并改变乳腺祖细胞库的组成

玄毛角 1, 李志平 1, 王敏（Min Wang） 1, 桑杰·卡蒂亚尔 2, 加布里埃尔·迪·桑特 1, 迈赫迪·法什奇安 3, 安德鲁·普·南 3, 辛齐亚·科科拉 4, 丹尼尔·科伦坡 4, 罗兰·雷因博尔德 4, 伊莱娜·祖奇 4, 吴孔明博士 5, 伊拉·塔巴斯 6, 本杰明·斯派克 7, 理查德·佩塞尔 8
附属机构

腊肠衰竭会干扰乳腺发育并改变乳腺祖细胞库的组成

玄毛角等。 干细胞报告. .

摘要

DACH1在包括乳腺癌在内的人类恶性肿瘤中的丰度降低。在胚胎、混合系前体细胞、成人基底细胞和（ERα+)管腔祖细胞。转基因小鼠第6周Dach1基因缺失减少了导管分支，降低了乳腺基底细胞的比例（Lin-CD24型医学CD29型高的)基底细胞角蛋白5的丰度降低，而DACH1的过度表达导致导管分支，Gata3和Notch1增加，LA-7乳腺细胞的乳腺增生扩大。乳腺腺体转化生长因子β（TGF-β）活性在Dach1缺失后增加，与SMAD磷酸化增加相关，已知其可减少导管分支和基底细胞数量。内源性DACH1减少了用于受体活化的支架蛋白Smad锚与Smad2/3的关联，Smad2/3促进TGF-β活化。DACH1增加体内基底细胞，促进导管形成，抑制TGF-β活性。

关键词：DACH公司；萨拉；转化生长因子-β；乳腺癌；乳腺；干细胞。

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数字

图1
图1
可诱导的第1天小鼠乳腺缺失（A）多基因三苯氧胺治疗方案示意图第1天转基因(第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mT mGfl型). （B） 荧光显微镜显示，通过番茄-GFP颜色转化，三苯氧胺诱导的Cre重组酶活性。（a–c）第1天液体/重量俄罗斯26重量/CreERT2未经他莫昔芬治疗的乳腺（未经Cre报告和Cre诱导的阴性对照）显示GFP（mG）和番茄红荧光（mT）均为阴性。（b–f）第1天液体/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl未经他莫昔芬治疗的乳腺（未经Cre诱导的阴性对照）显示存在mT而无mG。（g–i）第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl和（j–l）第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl三苯氧胺治疗乳腺癌第1天缺失小鼠分析显示强mG和弱mT。组合图像显示三苯氧胺治疗后乳腺导管中mT到mG的转换。（C） 小鼠乳腺DACH1蛋白的免疫组织化学染色(第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl和第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl).
图2
图2
第1天发育期间乳腺上皮细胞中的RNA转录物（A）单细胞RNA测序（scRNA-seq）转录体扩散图，按发育阶段注释。Epcam公司+乳腺上皮细胞（MEC）来源于发育期（胚胎第16天[E16]和E18天）、出生后第4天（P4）和成年MEC（Giraddi等人，2018年），并使用软件根据扩散成分（DC）绘制scRNA-seq(http://uofuhealth.utah.edu/huntsman/labs/spike/d3.php），如前所述（Giraddi等人，2018年）。DC1代表从基底亚型到管腔亚型的相对富集连续体。DC2代表从原始（E16和E18）到P4成年乳腺细胞占据DC2轴末端的发育时间。（B） 丰富的第1天转录物绘制在扩散图scRNA-seq转录组学上，以显示与发育阶段和管腔与基础亚型相对丰度的相关性。第1天在胚胎中的多能干细胞和青春期前的混合血统前体细胞中表达第1天在成人基底细胞（右下角的深蓝色圆点）和（ERα+)管腔祖细胞（右上角的淡蓝色圆点）。（C–F）第1天RNA转录物在出生后发育期间表达。（C） 来自未产妇、妊娠中期、哺乳期和退化后乳腺的MECs的scRNA-seq鉴定出15组MECs（Bach等人，2017）。（D） 每个簇类型中Dach1的相对表达以比色显示，相对表达显示在右侧的栏中。（E） 基于15个簇的对数转换平均表达值的簇树状图。红色方框显示集群子类型，其中第1天根据（F）中显示的转录物相对丰度表示。第1天基因表达主要在推测的基底细胞和肌上皮细胞（簇C12、C13和C14）中检测到，在管腔ERα中也检测到少量表达+（C3簇）和管腔祖细胞簇（C6/7）。
图3
图3
第1天基因缺失减少乳腺细胞增殖、导管分支和肌上皮/干细胞（A）细胞增殖，通过Ki-67免疫染色评估，细胞核标记DAPI染色（A）。（B） 如上所述，但量化为每组n=3只单独小鼠的平均值±SEM。显示的数据第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl与第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl三苯氧胺治疗后，如图1A所示。（C） 导管分支分析（显示为n=3只小鼠的平均值±SEM）。图S3中以高倍率显示了典型示例。（D） 乳腺上皮的典型荧光激活细胞分选（FACS）分析显示mT和mG细胞分离，随后的Lin分离负极细胞和CD24/CD29状态的分配。（E） 林的比例负极细胞（乳腺细胞，不包括血管和造血细胞）通过FACS分析进行测定，并对n=4个分离小鼠进行定量。林的比例负极基因型之间的细胞没有显著变化。（F） 林的百分比负极CD24型医学CD29型你好每组4只小鼠的细胞通过FACS分析进行测定。（G） 管腔上皮细胞显示为Lin负极CD24型你好CD29型洛n=4只分离小鼠的数据为平均值±SEM。
图4
图4
第1天基因缺失降低乳腺干细胞和导管细胞世系基因靶的丰度（A）细胞角蛋白5（CK5）和CK8的免疫荧光双重染色显示，Dach1基因缺失降低了CK5阳性细胞与CK8阳性细胞的相对数量。（B） 分化因子的免疫组织化学染色(加塔3，百万分之一、和Pygo2号)在乳腺中第1天+/+与第1天−/−（Cre缺失小鼠）(第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl与第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl). 红色箭头表示基底上皮细胞。（C） 免疫组织化学染色的定量显示为n=3只单独小鼠的平均值±SEM。
图5
图5
DACH1占据乳腺干细胞和导管细胞谱系基因靶标的启动子区域（A–F）参与乳腺干细胞及导管发育基因mRNA的qRT-PCR分析，（A）第1天，（B）加塔3，（C）精灵5，（D）百万分之一，（E）缺口1，和（F）Pygo2号，在Cre缺失小鼠的乳腺中(第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl与第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl)n=3只分离小鼠的定量显示为平均值±SEM。缺口1mRNA水平在第1天−/−乳腺。通过对DACH1稳定的MDA-MB-231细胞（G）进行染色质免疫沉淀测序分析，评估DACH1与这些靶基因的结合情况。（H）加塔3，（一）精灵5，（J）百万分之一，（K）缺口1、和（L）Pygo2号.
图6
图6
DACH1诱导LA-7细胞中的导管分支和肥大细胞（A）显示了在胶原板上培养的LA-7细胞（上图）、用对照载体转导的LA-7细胞（中图）或表达DACH1的载体（下图）的代表性相差显微镜图像。（B和C）在第20天（B）对细胞进行导管形成分析。每个视图的LA-7小管芽数显示为平均值±SEM（C）。免疫印迹法检测用对照载体或DACH1表达载体转导的LA-7细胞的抗体。β-肌动蛋白用作蛋白质负荷控制。（D） 对乳腺干细胞调节基因进行RT-PCR分析。结果显示为n=3个单独实验的平均值±SEM。∗p<0.05。（E） 转染DACH1或空载体的LA-7细胞的免疫荧光，生长在3D类器官结构中。DACH1降低了肌上皮标记物（CK14，绿色），而管腔标记物（CDH1）上调。（F） 对LA-7细胞或用表达DACH1的控制载体或载体转导的LA-7电池进行分析，以确定其是否能形成乳腺。在第8天，用500个细胞/1.4 mL培养基的限制稀释液培养细胞，并对乳腺（150–200个细胞）进行计数。显示了代表性场的相位对比图像和乳房球的数量（n=3个单独实验的平均值±SEM），∗p＜0.01）。（G） 用DACH1或载体控制转导的LA-7细胞的一个单独克隆在24孔板中作为乳腺球生长，典型图像显示为2×。
图7
图7
第1天基因缺失激活乳腺中的TGF-β信号传递（A）第1天基因缺失，与转化生长因子-β从文献中总结出的基因缺失（Daniel和Robinson，1992年，Moses和Barcellos-Hoff，2011年，Bottinger等人，1997年，Nelson等人，2006年，Pierce等人，1993年）。（B和C）小鼠乳腺中pSMAD2/3免疫组化染色的代表性示例（B）和定量分析（C），如下所示第1天+/+(第1天重量/重量俄罗斯26CreERT2/mTmGfl)和DACH1号机组–/–(第1天飞行/飞行俄罗斯26CreERT2/mTmGfl). （D和E）pSMAD 1/5/8（D）免疫染色的代表性示例，量化（E）显示为n=3只单独动物的平均值±SEM。用DACH1表达载体转导的Met-1乳腺癌细胞的（F和G）Western blots，使用针对所示蛋白的抗体（F）针对p-SMAD2/3和（G）针对DACH1、p-SMAD1/5/8和Cyclin D1。（H） 蛋白质印迹第1天重量与第1天−/−免疫沉淀后3T3细胞与SARA的相关性为Smad 2/3。S.E.，短期接触；L.E.，暴露时间更长。β-肌动蛋白用作蛋白质负荷控制。
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    1. Adriance M.C.、Inman J.L.、Petersen O.W.、Bissell M.J.肌上皮细胞：良好的围栏造就良好的邻居。2005年乳腺癌研究；7:190–197.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Asselin-Labat M.L.、Sutherland K.D.、Barker H.、Thomas R.、Shackleton M.、Forrest N.C.、Hartley L.、Robb L.、Grosveld F.G.、van der Wees J.Gata-3是乳腺形态发生和管腔细胞分化的重要调节因子。自然细胞生物学。2007;9:201–209.-公共医学
    1. Bach K.、Pensa S.、Grzelak M.、Hadfield J.、Adams D.J.、Marioni J.C.、Khaled W.T.通过单细胞RNA测序揭示的乳腺上皮细胞分化动力学。国家公社。2017;8:2128.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bissell M.J.、Labarge M.A.背景、组织可塑性和癌症：肿瘤干细胞也受微环境调节吗？癌细胞。2005;7点17分至23分。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Bottinger E.P.、Jakubczak J.L.、Haines D.C.、Bagnall K.、Wakefield L.M.转基因小鼠过度表达显性阴性突变体II型转化生长因子β受体后，乳腺和肺部的肿瘤发生率增加，这是对致癌物7,12-二甲基苯-[a]-蒽的反应。1997年癌症研究；57:5564–5570。-公共医学

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