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2012年3月;91(3):407-17.
doi:10.1007/s00277-011-1315-z。 Epub 2011年9月14日。

营养缺乏条件下多发性骨髓瘤中的时间依赖性自噬通过Sirt1蛋白的可能参与防止细胞凋亡

附属机构

营养缺乏条件下多发性骨髓瘤中的时间依赖性自噬通过Sirt1蛋白的可能参与防止细胞凋亡

曾荣等。 Ann Hematol公司 2012年3月

摘要

由于缺乏对多发性骨髓瘤自噬的研究,促使我们探索营养素缺乏诱导多发性髓瘤细胞系RPMI8226细胞自噬生物学特性及其作用。通过TUNEL、透射电镜(TEM)和单丹西卡德韦(MDC)染色观察自噬和凋亡形态学。MDC染色荧光强度和LC3-I向LC3-II的转化表明,自噬在6、12和18小时随时间增加而增加,然后在24和48小时下降。Annexin V-FITC/PI(AV/PI)双重染色的FCM分析和TUNEL分析表明,凋亡在6、12,18、24和48 h随时间增加,当自噬下降时,它在24小时破裂。随着细胞凋亡的增加,Bax从细胞质向线粒体的移位和活性caspase3蛋白水平随时间而增加。我们证明Beclin1蛋白和mRNA水平的时间进程模式与自噬相同。当自噬增加时,S6K1的磷酸化速率在6、12和18小时受到抑制。3-甲基腺嘌呤(3-MA)对自噬的抑制在6、12和18小时促进了细胞凋亡和caspase3激活,但在24或48小时没有影响。随着自噬增加,细胞核中Sirt1蛋白水平逐渐增强,然而,3-MA抑制了这种增强。综上所述,营养素缺乏诱导了依赖时间的自噬和凋亡。凋亡表现为caspase3介导的Bax依赖性线粒体凋亡。自噬似乎是Beclin1依赖性的,并与mTORC1抑制有关。自噬在早期对细胞凋亡有保护作用。Sirt1可能参与了自噬,并参与自噬介导的促生存过程。

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