克隆集
ORF cDNA克隆集
除了单个克隆外，GeneCopoeia还以诱人的价格提供预先制作或定制的ORF cDNA克隆集。一致性和高质量的克隆集使其成为功能基因组学、蛋白质组学和系统生物学中大规模高内容和高通量筛选研究的理想选择。当您从下面的列表中订购ORF cDNA克隆集时，每个克隆最多可节省70%！
优势
- 大型系列。超过140000个预先制作的ORF cDNA克隆。
- 快速交付。预先制作的克隆分为基因家族或自定义组。
- 高质量。所有ORF cDNA克隆都经过序列验证。在中查看我们的克隆出版物!
要了解更多关于ORF cDNA克隆集的信息，请联系我们或致电301-762-0888。根据您选择的载体中的基因家族克隆集
有问题吗？请提交您的查询在这里或发送电子邮件至inquiry@genecopoeia.com.
常见问题解答秒
常见问题：ORF cDNA克隆
答案：我们提供的大多数ORF cDNA克隆为10µg纯化质粒。对于我们的NextDay™ORF cDNA克隆，您可以在细菌库存或转染成熟DNA（10µg或50µg）之间进行选择。您也可以通过以下地址联系我们，请求其他交付格式：support@genecopoeia.com.
答案：NextDay™ORF cDNA克隆是预先制作的ORF cDNA克隆。如果在东部时间中午下订单，它将以具有竞争力的价格提供，并在第二天发货。
答案：ORF cDNA克隆的周转时间因许多因素而异。如果您订购细菌库存中的NextDay™ORF cDNA克隆，如果订单是在美国东部时间中午下的，交货时间通常为1-2个工作日。大多数非NextDay ORF cDNA克隆的周转时间约为2-3周。如果我们需要进行任何定制，或者如果我们遇到任何未发现的技术困难，周转时间可能会更长。
答案：当您在我们200多种载体类型中的一种中订购OmicsLink™Expression-Ready ORF cDNA克隆时，您可以以更低的价格订购不同载体类型中相同的ORF克隆。
答案：克隆构建完成后，GeneCopoeia将遵循严格的质量控制流程，以确保向您交付正确的克隆。我们首先通过PCR扩增序列并验证其大小。接下来，对所有ORF进行完全排序。限制性内切酶消化用于检查整个质粒的完整性。
答案：全长ORF（开放阅读框）cDNA克隆是一种包含编码全长蛋白质的蛋白质编码DNA插入物的质粒。DNA插入仅包含全长基因（或cDNA）的蛋白质编码序列（从起始密码子到终止密码子），没有5′和3′末端非翻译区（UTR）或内含子。
答案：由于天然出现的蛋白质编码序列和NCBI参考序列之间存在差异，GeneCopoeia不能保证OmicsLink的100%匹配TM（TM）ORF cDNA克隆序列与NCBI RefSeq。GeneCopoeia保证我们的OmicsLinkTM（TM）ORF cDNA表达克隆序列没有人为的移码变异，包括碱基的缺失和添加，以及由点突变引起的翻译终止突变（不间断密码子到终止密码子）。该政策不包括由于可能自然发生的多态性和/或PCR在极少数情况下引入的突变而导致的点变异。如果你想从不同的cDNA文库中获得特定版本的基因，GeneCopoeia将尽最大努力获得该特定版本，但不能保证成功。
答案：应首先指定表达式系统。如果哺乳动物靶细胞难以转染，我们建议使用慢病毒系统。接下来，应该选择标记。GeneCopoeia提供荧光标记、溶解度和纯化标记、抗体免疫沉淀标记和多功能标记。
答案：标签应远离目标蛋白的活性中心和功能域。如果目标蛋白有一个N端信号肽，那么标签必须放在C端。
答案： EZShuttle™Gateway®PLUS ORF cDNA克隆不能在《基因药典》的pShuttle™载体中表达蛋白质。然而，这些克隆中的蛋白编码ORF cDNA可以简单快速地转移到任何兼容的GeneCopoeia pEZ™表达克隆或Gateway®目的表达载体中。然后，这些新载体可用于在目标细胞类型中表达所需的蛋白质。
答案：您可以在收到的克隆数据表中找到此信息。
答案：GeneCopoeia提供了一套pEZ™表达克隆载体（类似于ThermoFisher Scientific的pDEST目的载体），可在不同宿主细胞系统（包括细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞系统）中产生各种形式的蛋白质（例如天然、N末端融合或C末端融合）。EZShuttle™Gateway®PLUS ORF cDNA克隆也可用于将ORF转移到ThermoFisher Scientific的pDEST目的载体。
答案：目前，我们提供预先制作的人类、小鼠和斑马鱼ORF cDNA克隆。我们正在从其他模型动物（如大鼠）中生产全长ORF克隆。这些全长ORF cDNA克隆将在不久的将来投放市场。如果您对其他模式生物感兴趣的任何基因的全长ORF感兴趣，请向我们发送这些基因的信息，如GenBank Accession或核苷酸序列。他们将被收取与我们其他目录ORF cDNA克隆相同的价格。我们还提供定制克隆服务，将其他模式生物的基因克隆到您选择的任何载体中。
答案：带有启动子的正确DNA序列不能保证你能表达蛋白质。许多因素对蛋白质表达的成功或失败有贡献：1）您是否为您的表达宿主系统使用了正确类型的表达载体？例如，我们的pReceiver-M01载体用于哺乳动物细胞表达，pReceover-B01用于细菌表达。2） 如果蛋白质是膜蛋白，它需要靶序列才能正确定位吗？3） 过度表达的蛋白质对宿主有毒吗？4） 蛋白质会折叠成正确的三维结构以进行适当的功能和/或免疫学分析吗？5） 你检查过测序，看是否有替代的拼接变体？
答案：pReceiver-B01和pReceover-WG02/WG03/WG04/WG05/WG09/WG16中的所有表达克隆均已在大肠杆菌或罗氏公司生产的无细胞蛋白质生产系统。具有不同特征和用于不同宿主细胞系统的其他表达克隆尚未测试蛋白质表达。
答案：我们将尽最大努力克隆原始拼接形式，并为您提供替换克隆。然而，我们不能保证我们将获得特定剪接变体的克隆。
答案：尽管我们无法为此类病例提供替代克隆，但我们确实提供诱变服务，以按要求改变任何核苷酸组成，只需支付象征性费用。
答案：我们保证与参考序列相比，我们的全长ORF cDNA插入中没有移码变化，也没有提前终止密码子。如果出现这种情况，我们将更换有缺陷的克隆或退还费用。
答案：差异可能来自两个潜在来源或两者的组合：1）自然发生的事件，包括多态性、选择性剪接、注释更新、测序错误和/或歧义导致的同一基因的多个副本/版本的不一致；2） 人为引入PCR克隆引起的变化。通常，克隆的潜在用户将我们的测序数据与只有一个参考转录物的序列进行比较，并将任何差异归因于PCR引入的突变。通过对近20000个人类基因的多个克隆进行分析，我们发现，当将我们的序列数据与相应基因座中的所有转录物和序列（包括基因组序列、EST、其他cDNA/mRNA转录物）进行比较时，绝大多数差异可明确归因于类别1）。通常，我们发现我们的ORF克隆序列与相应的基因组序列之间的差异比公共域基因转录物序列与相应基因组序列的差异更少。我们当然不能完全消除PCR克隆过程中引入突变的可能性，但我们相信这种情况很少发生。我们提供更改碱基核苷酸组成的服务，收费很低。
答案：我们将PCR与几种专利技术结合使用，以最大限度地提高PCR的保真度，从而生成全长ORF（更多信息可在ORF cDNA白皮书). 我们使用了70多个人类或小鼠组织的cDNA文库作为模板来生成全长ORF。
答案：对于EZShuttle™Gateway®PLUS ORF cDNA克隆，正向测序引物（来自ORF cDNA 5′端上游）为：5′-CCCAGTCACGACGTTAAAACG，反向测序引子（来自ORF3′端下游）为：5'-ATGGTATTCCTG。对于OmicsLink™克隆，每个克隆的测序引物都显示在数据表中。要下载数据表，请访问我们网站上的部分。请注意，您需要以下信息才能下载数据表：您在我们网站上的帐户登录信息、克隆产品的目录号和销售订单号（SO#）。如果您无法从我们的网站下载数据表，请联系技术支持.
答案：每个全长ORF cDNA插入都进行了完全测序。在交付每个克隆之前，我们使用基因特异性引物通过PCR重新检查克隆，以确保运送正确的克隆。
答案：是的，我们会为你克隆基因。克隆人类基因的所有全长ORF cDNA是我们的使命和持续努力。很可能您感兴趣的基因已经在我们的生产线中，或者正在等待将来的克隆。如果您向我们提供GenBank登录号、基因名称、核苷酸或氨基酸序列，我们将把该基因放在优先克隆基因列表中。通常，完成克隆需要两周时间，尽管我们不能保证我们会得到基因。一旦克隆可用，您就会收到通知。不会额外收费。
答案：一个基因座中通常有多个基因转录本，这些转录本是由选择性剪接、ORF cDNA的更新信息、多态性或不同实验室组克隆工作重复产生的冗余造成的。在选择全长基因进行ORF cDNA克隆的过程中，我们试图从每个基因位点中选择最具代表性的转录本，这些转录本可能与同一基因位点中的其他转录本略有或显著不同。这种方法提供了所有基因位点的最广泛覆盖范围。在许多情况下，我们确实从克隆生产管道中获得了全长ORF cDNA的多种变体或版本。鼓励客户向inquiry@genecopoeia.com如果他/她有兴趣获得基因/ORF cDNA的特定变体/版本。在某些情况下，差异可能源于ORF开始和/或停止位置的注释因新的可用序列信息和/或实验证据而改变。我们定期检查公共数据库（如NCBI和EMBL）中ORF注释的信息更新。新的ORF cDNA注释将用于我们的重新定位工作，以保持ORF cDNA克隆的更新。
答案：不，网站上的序列不是实际序列，而是NCBI的参考序列。克隆的实际序列可能因遗传变异和选择性剪接而不同。任何ORF cDNA克隆的实际序列都可以通过电子邮件随时请求。然而，请注意，预生产中克隆的实际序列或通过自定义基因合成提供的克隆可能尚不可用。
答案：坎。
答案：GeneCopoeia的OmicsLink™Expression克隆由我们的专利RecJoin™克隆技术生成。利用该技术构建5′tag-ORF融合表达克隆，在全长ORF的5′tag和起始密码子ATG之间没有attB位点。ThermoFisher Scientific的pDEST表达克隆中attB位点编码的额外8个氨基酸将不会出现在使用OmicsLink™表达克隆产生的蛋白质中。同样的原理也适用于3′融合蛋白的生产。
答案：融合肽（或N-末端标签）和ORF cDNA编码的蛋白质之间有14个氨基酸。这十四种氨基酸从N端到C端为Thr-Ser-Leu-Tyr-Lys-Lys-Ala-Gly-Val-Arg-Thr。八种氨基酸（Thr-Ser-Leu-Tyr-Lys-Lys-Ala-Gly）由attB重组位点编码，六种氨基酸（Leu-Gly-Gly-Val-Arg-Thr）由att B和ATG起始密码子之间的序列编码。
答案：是的，有两种选择。首先，您可以使用我们开发的OmicsLink™Expression Clones。我们已经在带有N末端标记或C末端标记的表达载体中构建了ORF cDNA克隆，如His标记和eGFP。有10多种类型的标签可满足您的需求。请查看OmicsLink™产品信息页面(https://www.genecopoeia.com/tech/omics链接/). 其次，您还可以使用GeneCopoeia的pEZ™或ThermoFisher Scientific的Gateway®表达载体表达N端或C端融合蛋白。因为我们的EZShuttle™Gateway®PLUS ORF cDNA克隆如果含有终止密码子，则在将ORF插入物转移到GeneCopoeia的pEZ™或ThermoFisher Scientific的pDEST表达载体中以产生C末端标记的融合蛋白之前，需要删除终止密码子。
答案：选择程序非常严格。它包括从多个公共和私人来源提取、比较和验证基因序列及其注释信息。聚类和人工管理用于减少冗余和消除错误基因。
答案：GeneCopoeia提供了一套pEZ™表达克隆载体（类似于ThermoFisher Scientific的pDEST目的载体），可在不同宿主细胞系统（包括细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞系统）中产生各种形式的蛋白质（例如天然、N末端融合或C末端融合）。
答案：的向量EZShuttle™Gateway®OLUS ORF cDNA克隆由GeneCoppoyme制造的全长ORF侧翼为attL1和attL2重组位点，与含有attR1和attR2重组位点的Gateway®pDEST表达载体配对。当GeneCopoire的EZShuttle™Gateway®PLUS ORF克隆与Gateway®兼容的pDEST表达载体在最佳酶浓度和条件下混合时，EZShuttle™Gateway®PLUS ORF克隆中的ORF可以转移到Gateway®pDEST表达载体中。由于载体中重组位点的独特特性，转移的ORF将受目的表达载体中启动子的控制。
答案：我们建议您按产品目录号（例如：EX-V0379-M29）提及该产品，并将我们称为GeneCopoeia，Inc.（马里兰州罗克维尔）。
