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.2005年11月;15(11):1111-24.
doi:10.1093/glycob/cwi099。 Epub 2005年6月22日。

跨膜和分泌型MUC1探针显示O-聚糖核心轮廓的交通依赖性变化

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跨膜和分泌型MUC1探针显示O-聚糖核心轮廓的交通依赖性变化

卡蒂娅·恩格尔曼等。 糖生物学. 2005年11月.

摘要

人粘蛋白MUC1表达为跨膜异二聚体蛋白复合物,通过转高尔基网络(TGN)循环,也表达为分泌型亚型。为了确定细胞贩运的差异是否会影响这些亚型上的O-糖基化谱,我们开发了一个由膜结合和分泌重组糖基化探针组成的模型系统。分泌型MUC1-S仅包含一个截短的重复结构域,而在MUC1-M构建物中,该结构域直接(M0)或通过间歇非功能(M1)或功能性精子蛋白-鞘氨醇激酶-果糖(SEA)模块(M2)连接到MUC1的天然跨膜和细胞质结构域;SEA模块包含一个假定的蛋白水解酶裂解位点,与接受广泛O-糖基化的蛋白质相关。我们发现,MUC1-M2通过从中国仓鼠卵巢(CHO)突变体ldlD14细胞的细胞表面通过其糖基化持续的细胞内隔间循环,模拟内源性MUC1。上皮EBNA-293和MCF-7乳腺癌细胞分泌的MUC1-S上O-连接聚糖的图谱显示了以核心2-基低聚糖为主的模式。相反,在相同细胞中表达的相应膜棚探针显示出向唾液酸核心1主导的模式的完全转变。总之,聚糖核心图谱反映了分泌或膜探针的亚细胞贩运途径以及常驻糖基转移酶的修饰活性。

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